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猪链球菌—副猪嗜血杆菌二联亚单位疫苗的研究

摘要第7-8页
Abstract第8-9页
缩略语表(Abbreviation)第10-12页
1. 文献综述第12-25页
    1.1 猪链球菌病的研究进展第12-19页
        1.1.1 前言第12页
        1.1.2 病原学及流行病学第12-13页
        1.1.3 猪链球菌病的临床症状第13页
        1.1.4 猪链球菌的毒力相关因子第13-15页
        1.1.5 猪链球菌致病机制的研究第15-17页
        1.1.6 猪链球菌的感染模型第17页
        1.1.7 猪链球菌疫苗的研究进展第17-19页
    1.2 副猪嗜血杆菌的研究进展第19-23页
        1.2.1 前言第19页
        1.2.2 病原学及流行病学第19-20页
        1.2.3 副猪嗜血杆菌病的临床症状及剖检变化第20页
        1.2.4 副猪嗜血杆菌的毒力因子及致病机制第20-22页
        1.2.5 副猪嗜血杆菌疫苗的研究第22-23页
    1.3 蛋白制取工艺的研究进展第23-25页
        1.3.1 微生物表达系统比较第23页
        1.3.2 影响大肠杆菌表达系统效率的因素第23-24页
        1.3.3 硫酸铵沉淀法纯化蛋白的研究第24-25页
2. 猪链球菌-副猪嗜血杆菌二联亚单位疫苗的研究第25-63页
    2.1 前言第25-26页
    2.2 试验材料第26-28页
        2.2.1 菌种和质粒第26页
        2.2.2 主要试剂第26页
        2.2.3 培养基和缓冲液第26-27页
        2.2.4 蛋白表达和提取相关试剂第27页
        2.2.5 SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western Blotting相关试剂第27-28页
        2.2.6 ELISA相关试剂第28页
        2.2.7 主要仪器第28页
        2.2.8 试验动物第28页
    2.3 试验方法第28-38页
        2.3.1 疫苗候选蛋白基因分布的检测第28-30页
        2.3.2 疫苗候选蛋白的分布检测第30-32页
        2.3.3 重组蛋白表达工艺的优化第32-33页
        2.3.4 重组蛋白提取工艺的优化第33-34页
        2.3.5 亚单位疫苗的制备第34页
        2.3.6 疫苗的安全性检测第34页
        2.3.7 小鼠的免疫试验第34-35页
        2.3.8 免疫小鼠血清ELISA抗体检测第35页
        2.3.9 免疫小鼠的攻毒试验第35-36页
        2.3.10 仔猪的免疫试验第36-37页
        2.3.11 免疫仔猪血清ELISA抗体检测第37页
        2.3.12 不同佐剂的疫苗免疫仔猪抗体消长规律的摸索第37页
        2.3.13 免疫仔猪的攻毒试验第37页
        2.3.14 仔猪攻毒后组织器官含菌量检测第37-38页
        2.3.15 仔猪攻毒后组织病理学变化第38页
    2.4 结果及分析第38-60页
        2.4.1 疫苗候选蛋白基因分布的检测第38-40页
        2.4.2 疫苗候选蛋白的重组表达第40-41页
        2.4.3 Western Bloting检测疫苗候选蛋白的分布第41页
        2.4.4 重组蛋白表达工艺的优化第41-44页
        2.4.5 重组蛋白提取工艺的优化第44-46页
        2.4.6 二联亚单位疫苗对仔猪的安全性评价第46-47页
        2.4.7 免疫小鼠后各抗原蛋白抗体滴度测定第47-49页
        2.4.8 小鼠LD50的测定第49-50页
        2.4.9 小鼠攻毒保护力评价第50-51页
        2.4.10 仔猪的抗体检测第51-53页
        2.4.11 不同佐剂疫苗免疫仔猪的抗体消长规律第53-54页
        2.4.12 仔猪的免疫攻毒保护效果第54页
        2.4.13 仔猪攻毒后组织含菌量检测第54-56页
        2.4.14 仔猪攻毒后组织病理学变化第56-60页
    2.5 讨论第60-63页
参考文献第63-69页
致谢第69页

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