摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
英汉缩略词对照表 | 第10-11页 |
前言 | 第11-13页 |
1 实验材料 | 第13-16页 |
1.1 细胞株 | 第13页 |
1.2 主要试剂及其来源 | 第13-14页 |
1.3 主要仪器设备 | 第14-16页 |
2 实验技术路线 | 第16-17页 |
3 实验方法 | 第17-31页 |
3.1 人支气管上皮细胞株的培养 | 第17页 |
3.2 JurkatE6-1细胞的培养 | 第17页 |
3.3 慢病毒构建 | 第17-22页 |
3.4 慢病毒感染支气管上皮细胞 | 第22-23页 |
3.5 免疫共沉淀筛选相互作用蛋白 | 第23-24页 |
3.6 质谱鉴定 | 第24-25页 |
3.7 Western blot分析 | 第25页 |
3.8 Notch1甲基化检测 | 第25-29页 |
3.9 慢病毒感染HBECs与CD4+T淋巴细胞共培养 | 第29页 |
3.10 抑制HBECs泛素化通路与CD4+T淋巴细胞共培养 | 第29页 |
3.11 CD4+T淋巴细胞亚群的检测 | 第29-30页 |
3.12 ELISA法检测细胞因子IFN-γ、IL-4、IL-17 | 第30页 |
3.13 统计学分析 | 第30-31页 |
4 结果 | 第31-43页 |
4.1 高滴度目的基因慢病毒 | 第31-35页 |
4.2 慢病毒感染支气管上皮细胞MOI为10 | 第35-36页 |
4.3 筛选证实相互作用蛋白H2BD | 第36-38页 |
4.4 NS1对组蛋白H2BD的单泛素化修饰 | 第38-39页 |
4.5 NS1对Notch1启动子区有去甲基化作用 | 第39页 |
4.6 共培养体系中CD4+T淋巴细胞亚群分化趋势 | 第39-41页 |
4.7 共培养体系中IL-4、IFN-γ、IL-17表达量 | 第41-43页 |
5 讨论 | 第43-45页 |
5.1 RSV非结构蛋白与组蛋白H2B相互作用并诱导H2B泛素化修饰 | 第43页 |
5.2 RSV非结构蛋白诱导Notch-1基因去甲基化 | 第43-44页 |
5.3 RSV非结构蛋白影响Th亚群分化,并受泛素化酶抑制剂调节 | 第44-45页 |
6 结论 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-49页 |
综述 | 第49-56页 |
参考文献 | 第53-56页 |
攻读学位期间主要的研究成果目录 | 第56-57页 |
致谢 | 第57页 |