| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-13页 |
| 第一章 哺乳动物乳腺生物反应器的研究进展 | 第13-19页 |
| ·哺乳动物乳腺生物反应器的简介 | 第13-16页 |
| ·动物乳腺生物反应器的定义 | 第13页 |
| ·动物乳腺生物反应器的制备 | 第13-16页 |
| ·哺乳动物乳腺生物反应器生产基因工程药物的优越性 | 第16页 |
| ·乳腺生物反应器操作程序简单 | 第16页 |
| ·利用动物乳腺生物反应器可以生产出具有完全生物活性的药用蛋白 | 第16页 |
| ·利用乳腺生物反应器可获得高产量，高质量的药用蛋白 | 第16页 |
| ·利用乳腺生物反应器生产药用蛋白的经济效益高 | 第16页 |
| ·利用乳腺生物反应器来获取药用蛋白，生产成本低廉，纯化简单 | 第16页 |
| ·利用乳腺生物反应器生产的药用蛋白安全性好，无污染 | 第16页 |
| ·哺乳动物乳腺生物反应器生产基因工程药物存在的问题 | 第16-18页 |
| ·转基因效率相对低下 | 第16-17页 |
| ·目的基因乳腺特异性表达水平较低 | 第17页 |
| ·转基因表达产物自身存在的问题 | 第17页 |
| ·转基因动物对自然生态平衡的影响 | 第17-18页 |
| ·乳腺生物反应器的道德伦理问题 | 第18页 |
| ·转基因动物乳腺生物反应器的应用与展望 | 第18-19页 |
| 第二章 基因打靶技术的研究进展 | 第19-22页 |
| ·基因打靶技术简介 | 第19-20页 |
| ·基因打靶的定义以及分子机理 | 第19-20页 |
| ·基因打靶技术的一般步骤 | 第20页 |
| ·基因打靶技术在试验动物中的应用 | 第20-22页 |
| ·基因打靶技术在人类疾病小鼠模型研究中的应用 | 第20-21页 |
| ·基因打靶技术在疾病基因治疗中的应用 | 第21页 |
| ·在改造生物和培养新生物品种中的应用 | 第21页 |
| ·展望 | 第21-22页 |
| 第三章 人白细胞介素-2 的应用前景 | 第22-24页 |
| ·人白介素-2 的生物学特性 | 第22页 |
| ·人白介素-2 的理化性质 | 第22页 |
| ·IL-2 的功能 | 第22页 |
| ·白介素-2 的临床应用 | 第22-23页 |
| ·白介素-2 在抗肿瘤治疗中的应用 | 第22页 |
| ·IL-2 在抗病毒感染中的应用 | 第22页 |
| ·IL-2 在感染性疾病治疗中的应用 | 第22-23页 |
| ·白介素-2 的应用前景 | 第23-24页 |
| 第四章 本研究的目的意义及技术路线 | 第24-27页 |
| ·本研究的目的意义 | 第24页 |
| ·本研究的技术路线 | 第24-27页 |
| ·白细胞介素-2 基因克隆技术路线 | 第24-25页 |
| ·打靶载体的构建 | 第25-26页 |
| ·白细胞介素-2 基因的整合表达载体的构建 | 第26-27页 |
| 第五章 hIL-2 编码基因的克隆 | 第27-35页 |
| ·引言 | 第27页 |
| ·材料与方法 | 第27-31页 |
| ·材料 | 第27-28页 |
| ·方法 | 第28-31页 |
| ·结果与分析 | 第31-34页 |
| ·人全血总RNA 的提取 | 第31页 |
| ·RT-PCR 扩增IL-2 编码区 | 第31-32页 |
| ·IL-2 基因编码区的克隆及鉴定 | 第32-33页 |
| ·测序分析 | 第33-34页 |
| ·讨论 | 第34页 |
| ·小结 | 第34-35页 |
| 第六章 山羊β-酪蛋白基因座打靶载体的构建 | 第35-55页 |
| ·引言 | 第35页 |
| ·材料与方法 | 第35-41页 |
| ·材料 | 第35-36页 |
| ·方法 | 第36-41页 |
| ·结果与分析 | 第41-53页 |
| ·克隆5’同源臂及鉴定 | 第41-44页 |
| ·将5’同源臂与骨架pBluskm 连接 | 第44-45页 |
| ·克隆3’同源臂及鉴定 | 第45-47页 |
| ·将3’同源臂与载体5’-E 连接 | 第47-49页 |
| ·克隆 neo~r 的及鉴定 | 第49-51页 |
| ·将 neor 与载体 5’-3’-E 连接 | 第51-53页 |
| ·讨论 | 第53-54页 |
| ·小结 | 第54-55页 |
| 第七章 白细胞介素-2 基因的整合表达载体的构建 | 第55-59页 |
| ·引言 | 第55页 |
| ·材料与方法 | 第55-56页 |
| ·材料 | 第55页 |
| ·方法 | 第55-56页 |
| ·结果与分析 | 第56-58页 |
| ·鉴定5’-3’- E-neor-IL-2 | 第56-58页 |
| ·讨论 | 第58页 |
| ·小结 | 第58-59页 |
| 第八章 奶山羊胎儿成纤维细胞培养 | 第59-63页 |
| ·引言 | 第59页 |
| ·材料与方法 | 第59-60页 |
| ·材料 | 第59页 |
| ·试验方法 | 第59-60页 |
| ·结果与分析 | 第60-61页 |
| ·奶山羊成纤维细胞原代培养观察 | 第60-61页 |
| ·奶山羊胎儿成纤维细胞传代培养观察 | 第61页 |
| ·细胞冻存 | 第61页 |
| ·细胞复苏 | 第61-62页 |
| ·讨论 | 第62页 |
| ·小结 | 第62-63页 |
| 第九章 重组质粒转染奶山羊胎儿成纤维细胞及转染后的检测 | 第63-71页 |
| ·引言 | 第63页 |
| ·材料与方法 | 第63-66页 |
| ·材料 | 第63-64页 |
| ·方法 | 第64-66页 |
| ·结果与分析 | 第66-69页 |
| ·pIRES2-ZsGreen1 质粒的转化效率 | 第66页 |
| ·G418 筛选阳性克隆 | 第66-69页 |
| ·阳性克隆PCR 鉴定 | 第69页 |
| ·讨论 | 第69-70页 |
| ·小结 | 第70-71页 |
| 结论、创新点以及不足之处 | 第71-72页 |
| 1 结论 | 第71页 |
| 2 创新点 | 第71页 |
| 3 不足之处 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-76页 |
| 附录 | 第76-90页 |
| 致谢 | 第90-91页 |
| 作者简介 | 第91页 |
