中文摘要 | 第3-6页 |
英文摘要 | 第6-8页 |
前言 | 第12-14页 |
第一章 材料 | 第14-17页 |
1 实验室所需的嗅黏膜来源和实验操作的地点 | 第14页 |
2 主要试剂 | 第14-15页 |
3 主要实验仪器 | 第15页 |
4 培养液和基础试剂的配制 | 第15-17页 |
4.1 胎牛血清的分装 | 第15-16页 |
4.2 DMEM/F12培养基的配制 | 第16页 |
4.3 常规的OM-MSCs培养液配制 | 第16页 |
4.4 无菌PBS平衡盐溶液配制 | 第16页 |
4.5 0.25%胰蛋白酶的配制 | 第16-17页 |
第二章 方法 | 第17-27页 |
1 OM-MSCs及OECs的取材和培养 | 第17页 |
2 OM-MSCs的传代 | 第17-18页 |
3 细胞的冻存于复苏 | 第18页 |
4 OM-MSCs流式细胞术检测细胞表面标记、细胞周期及凋亡 | 第18-19页 |
5 低氧微环境下OECs上清液诱导OM-MSCs的方法及实验分组 | 第19页 |
6 细胞免疫荧光 | 第19页 |
7 采用免疫荧光PCR检测各实验组的目的基因表达情况 | 第19-22页 |
7.1 提取组织总RNA | 第19-21页 |
7.2 RNA反转录 | 第21页 |
7.3 Q-qPCR | 第21-22页 |
8 用Western-blot分别检测各实验组的蛋白表达情况 | 第22-24页 |
8.1 样品制备 | 第22页 |
8.2 蛋白浓度检测 | 第22-23页 |
8.3 western blot | 第23-24页 |
9 用膜片钳检测分化后神经元离子通道开放情况 | 第24-25页 |
10 酶联免疫吸附实验操作步骤 | 第25-26页 |
11 统计学处理 | 第26-27页 |
第三章 结果 | 第27-37页 |
1 OM-MSCs细胞表面标记物流式鉴定分析 | 第27页 |
2 OM-MSCs、OECs的免疫荧光、Western blot鉴定 | 第27-28页 |
3 低氧微环境促进OM-MSCs增殖及凋亡的结果 | 第28-31页 |
4 诱导OM-MSCs分化后神经元光学显微镜下结果 | 第31页 |
5 诱导OM-MSCs分化后神经元免疫荧光染色结果 | 第31-32页 |
6 低氧微环境对神经元及胶质细胞标记物表达的影响 | 第32-33页 |
7 低氧微环境对HIF-1α及其下游靶基因TH表达的影响 | 第33-35页 |
7.1 扩增曲线 | 第33-34页 |
7.2 熔解曲线 | 第34-35页 |
7.3 Q-PCR相对表达量如下 | 第35页 |
8 低氧微环境下诱导OM-MSCs分化的神经元电生理特性检测 | 第35-36页 |
9 ELISA检测诱导分化后各组细胞分泌多巴胺浓度的差异 | 第36-37页 |
第四章 讨论 | 第37-41页 |
1 帕金森疾病是目前神经科学领域的难题之一 | 第37页 |
2 OM-MSCs的生物学特性 | 第37-38页 |
3 低氧微环境促进OM-MSCs增殖与分化及其相关的研究结果 | 第38-39页 |
4 MAPK介导HIF-1信号通路在促进MSCs增殖、分化中的作用 | 第39-41页 |
结论 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-46页 |
综述 | 第46-54页 |
参考文献 | 第50-54页 |
主要缩写词表 | 第54-55页 |
在读期间发表的主要学术论文及参与课题 | 第55-56页 |
致谢 | 第56-57页 |