中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
英文缩略词 | 第13-14页 |
第1章 绪论 | 第14-19页 |
1.1 研究背景 | 第14页 |
1.2 骨组织工程的研究现状 | 第14-17页 |
1.3 本课题主要研究内容 | 第17-19页 |
第2章 胶原蛋白的提取、纯化及表征 | 第19-31页 |
2.1 材料与仪器 | 第19-20页 |
2.1.1 试剂 | 第19页 |
2.1.2 仪器 | 第19-20页 |
2.1.3 实验动物 | 第20页 |
2.2 方法 | 第20-23页 |
2.2.1 胶原蛋白的提取与纯化工艺 | 第20-21页 |
2.2.2 提取工艺单因素试验 | 第21页 |
2.2.3 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)验证胶原蛋白完整性 | 第21-22页 |
2.2.4 傅里叶红外透射光谱分析胶原结构完整性 | 第22页 |
2.2.5 氨基酸含量测定 | 第22页 |
2.2.6 单宁酸沉淀试验验证胶原蛋白降解程度 | 第22页 |
2.2.7 胶原凝胶的制备 | 第22页 |
2.2.8 扫描电子显微镜观察胶原交联前后的微观结构 | 第22-23页 |
2.2.9 统计学处理 | 第23页 |
2.3 结果 | 第23-29页 |
2.3.1 胶原样品观察 | 第23页 |
2.3.2 提取工艺单因素试验 | 第23-25页 |
2.3.3 正交试验结果 | 第25-26页 |
2.3.4 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)电泳实验验证胶原蛋白完整性 | 第26-27页 |
2.3.5 单宁酸沉淀试验验证胶原蛋白降解程度 | 第27页 |
2.3.6 傅里叶变换红外透射光谱(FT-IR)分析粗提物结构完整性 | 第27-28页 |
2.3.7 胶原氨基酸含量测定 | 第28-29页 |
2.3.8 胶原凝胶的制备 | 第29页 |
2.3.9 胶原交联前后的扫描电镜图 | 第29页 |
2.4 讨论 | 第29-31页 |
第3章 胶原/壳聚糖-明胶微球复合支架的制备及表征 | 第31-47页 |
3.1 材料与仪器 | 第31-33页 |
3.1.1 试剂 | 第31-32页 |
3.1.2 仪器 | 第32页 |
3.1.3 实验动物 | 第32-33页 |
3.2 方法 | 第33-38页 |
3.2.1 明胶微球的制备(乳化交联法) | 第33页 |
3.2.2 CC水凝胶及CC-GMS复合水凝胶的制备 | 第33-34页 |
3.2.3 CC-GMS复合支架及GMS的微观结构表征 | 第34页 |
3.2.4 CC水凝胶成胶时间的测定 | 第34页 |
3.2.5 CC水凝胶降解性的测定 | 第34-35页 |
3.2.6 CC水凝胶缓释rhBMP-2 的测定 | 第35页 |
3.2.7 大鼠骨髓间充质干细胞体外分离、培养与扩增 | 第35-36页 |
3.2.8 流式细胞仪测定BMSCs细胞周期 | 第36页 |
3.2.9 BMSCs表明标记物的鉴定 | 第36-37页 |
3.2.10 诱导BMSCs向成骨细胞分化 | 第37页 |
3.2.11 诱导BMSCs向成脂细胞分化 | 第37页 |
3.2.12 BMSCs在CC水凝胶支架中细胞活性的检测 | 第37-38页 |
3.3 结果 | 第38-44页 |
3.3.1 GMS粒径与外观及CC水凝胶制备 | 第38页 |
3.3.2 CC水凝胶支架成胶时间的测定 | 第38-39页 |
3.3.3 CC-GMS支架的降解性试验 | 第39-40页 |
3.3.4 CC-GMS支架的体外释放试验 | 第40-41页 |
3.3.5 BMSCs的形态学观察 | 第41-42页 |
3.3.6 BMSCs细胞周期 | 第42页 |
3.3.7 BMSCs表面标记物的表达 | 第42-43页 |
3.3.8 BMSCs成骨、成脂诱导分化鉴定 | 第43-44页 |
3.3.9 BMSCs在CC水凝胶支架中的生物学活性 | 第44页 |
3.4 讨论 | 第44-47页 |
第4章 缓释BMP-2 的CC-GMS支架应用于骨缺损的修复 | 第47-61页 |
4.1 材料与仪器 | 第47-48页 |
4.1.1 试剂 | 第47页 |
4.1.2 仪器 | 第47-48页 |
4.1.3 实验动物 | 第48页 |
4.2 方法 | 第48-52页 |
4.2.1 载有rhBMP-2 的CC-GMS复合支架的制备 | 第48页 |
4.2.2 原位动物实验 | 第48-50页 |
4.2.3 术后大体观察及动物处死取材 | 第50页 |
4.2.4 软X-ray检查及螺旋CT三维重建 | 第50页 |
4.2.5 Micro CT检查 | 第50页 |
4.2.6 组织学检查 | 第50-52页 |
4.3 结果 | 第52-58页 |
4.3.1 大体观察结果 | 第52页 |
4.3.2 软X-ray检测结果 | 第52-53页 |
4.3.3 螺旋CT三维重建 | 第53-54页 |
4.3.4 Micro CT结果 | 第54-55页 |
4.3.5 骨矿密度和骨矿含量结果 | 第55-56页 |
4.3.6 组织学检查结果 | 第56-58页 |
4.4 讨论 | 第58-61页 |
结论 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-71页 |
作者简介及在攻读硕士期间所取得的科研成果 | 第71-72页 |
致谢 | 第72-73页 |