摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
第一部分 文献综述 | 第11-21页 |
第一节 RNAI研究进展 | 第12-15页 |
1.1 RNAi的发现 | 第12页 |
1.2 RNAi机制的研究 | 第12-13页 |
1.3 RNAi特异性 | 第13-14页 |
1.4 RNAi未来前景 | 第14-15页 |
第二节 H1基因研究进展 | 第15-17页 |
2.1 H1组蛋白家族 | 第15页 |
2.2 H1结构和功能 | 第15-16页 |
2.3 H1基因表达模式 | 第16-17页 |
第三节 脂质体转染 | 第17-19页 |
3.1 脂质体转染作用机制 | 第17-18页 |
3.2 影响脂质体转染效率因素 | 第18-19页 |
第四节 本研究的意义、目的与内容 | 第19-21页 |
4.1 研究意义 | 第19页 |
4.2 研究目的 | 第19-20页 |
4.3 研究内容 | 第20-21页 |
第二部分 试验部分 | 第21-49页 |
前言 | 第22页 |
一 试验材料 | 第22-24页 |
1 材料 | 第22-23页 |
2 试剂配制 | 第23页 |
3 主要仪器及设备 | 第23-24页 |
二 试验方法 | 第24-32页 |
1 干扰序列的设计与合成 | 第24页 |
2 干扰载体的构建与验证 | 第24-26页 |
3 质粒的扩增和提纯 | 第26-27页 |
4 细胞培养 | 第27-28页 |
5 脂质体转染细胞 | 第28页 |
6 优化脂质体转染条件 | 第28-29页 |
7 流式细胞仪检测 | 第29页 |
8 RNA抽提 | 第29-30页 |
9 反转录 | 第30页 |
10 QPCR扩增 | 第30-31页 |
11 细胞杀稻瘟菌素药敏性检测 | 第31-32页 |
12 纯化转染细胞 | 第32页 |
13 数据分析 | 第32页 |
三 结果与分析 | 第32-43页 |
1 质粒及对应的测序结果 | 第32-35页 |
2 转染条件优化 | 第35-38页 |
3 转染干扰质粒后对细胞Hlc的表达量的影响 | 第38-40页 |
4 干扰Hlc基因表达对细胞的影响 | 第40-42页 |
5 纯化转染细胞 | 第42-43页 |
四 讨论 | 第43-47页 |
1 干涉水牛胎儿皮肤成纤维细胞Hlc基因的表达 | 第43-44页 |
2 优化脂质体转染条件 | 第44-45页 |
3 干涉水牛胎儿皮肤成纤维细胞Hlc基因表达对细胞的影响 | 第45-47页 |
五 小结 | 第47-49页 |
参考文献 | 第49-57页 |
附章 | 第57-59页 |
致谢 | 第59-60页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第60页 |