主要英文缩写词 | 第4-6页 |
摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
第1章 绪论 | 第12-20页 |
1.1 HIV概述与研究现状 | 第12-13页 |
1.2 HIV中和抗体 | 第13-14页 |
1.3 HIV疫苗研究现状 | 第14-15页 |
1.4 腺病毒载体 | 第15-16页 |
1.5 腺相关病毒载体 | 第16-17页 |
1.6 双基因共表达研究现状 | 第17-18页 |
1.7 本研究的主要内容及意义 | 第18-20页 |
第2章 HIV中和抗体全基因共表达质粒的构建及稳定细胞株的筛选 | 第20-34页 |
2.1 材料 | 第20-21页 |
2.1.1 细胞、菌株、质粒和病毒株 | 第20-21页 |
2.1.2 试剂 | 第21页 |
2.1.3 主要仪器与设备 | 第21页 |
2.2 方法 | 第21-27页 |
2.2.1 表达中和抗体N60-B1.1 基因重组质粒的构建 | 第21-24页 |
2.2.2 细胞水平检测重组质粒的表达效果 | 第24页 |
2.2.3 N60-B1.1 稳定表达细胞株的筛选 | 第24-25页 |
2.2.4 抗体N60-B1.1 的表达与纯化 | 第25-26页 |
2.2.5 抗体的定量检测及蛋白鉴定 | 第26页 |
2.2.6 抗体的活性检测 | 第26-27页 |
2.3 实验结果 | 第27-31页 |
2.3.1 重组质粒的鉴定 | 第27-28页 |
2.3.2 ELISA检测重组质粒的表达效果 | 第28-29页 |
2.3.3 稳定表达细胞株的筛选与抗体表达纯化 | 第29-30页 |
2.3.4 抗体结合活性分析 | 第30页 |
2.3.5 抗体中和活性分析 | 第30-31页 |
2.4 讨论 | 第31-32页 |
2.5 本章小结 | 第32-34页 |
第3章 表达HIV中和抗体N60-B1.1 的重组病毒的包装与动物免疫 | 第34-50页 |
3.1 材料 | 第34-35页 |
3.1.1 质粒、菌株和细胞株 | 第34页 |
3.1.2 试剂 | 第34-35页 |
3.1.3 实验动物 | 第35页 |
3.1.4 主要仪器与设备 | 第35页 |
3.2 实验方法 | 第35-41页 |
3.2.1 重组病毒rAdv-N60的包装和纯化 | 第35-37页 |
3.2.2 重组病毒rAAV-N60的包装和纯化 | 第37页 |
3.2.3 重组病毒的鉴定 | 第37-38页 |
3.2.4 重组病毒的滴度测定 | 第38-39页 |
3.2.5 重组病毒在细胞水平的表达 | 第39页 |
3.2.6 rAAV-N60和rAdv-N60在小鼠体内的表达 | 第39-41页 |
3.3 实验结果 | 第41-46页 |
3.3.1 重组腺病毒rAdv-N60的鉴定 | 第41-42页 |
3.3.2 纯化后重组腺病毒的滴度测定 | 第42页 |
3.3.3 重组病毒rAdv-N60在细胞水平的表达 | 第42-43页 |
3.3.4 rAAV-N60和rAdv-N60在小鼠体内的表达 | 第43-45页 |
3.3.5 重组病毒在小鼠体内表达的中和抗体结合活性分析 | 第45-46页 |
3.4 讨论 | 第46-48页 |
3.5 本章小结 | 第48-50页 |
结论 | 第50-52页 |
参考文献 | 第52-58页 |
附录 | 第58-60页 |
攻读硕士学位期间所发表的学术论文 | 第60-62页 |
致谢 | 第62页 |