| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 缩略词 | 第17-18页 |
| 第一章 前言 | 第18-31页 |
| 1 抗肿瘤研究现状 | 第18-24页 |
| 1.1 肿瘤发生相关机制研究 | 第18-19页 |
| 1.2 抗肿瘤治疗现状 | 第19-24页 |
| 1.2.1 抗肿瘤相关化疗药物 | 第19-22页 |
| 奥沙利铂 | 第19页 |
| 异长春花碱 | 第19页 |
| 紫杉醇 | 第19-20页 |
| 多西他赛 | 第20页 |
| 吉西他滨 | 第20页 |
| 卡培他滨 | 第20页 |
| 利妥昔单抗 | 第20页 |
| 羟基喜树碱 | 第20-21页 |
| 多柔比星 | 第21页 |
| 吡柔比星 | 第21页 |
| 表柔比星 | 第21-22页 |
| 1.2.2 抗肿瘤中药研究 | 第22-24页 |
| 人参皂苷与人参多糖 | 第22页 |
| 薏苡酯 | 第22页 |
| 通关藤 | 第22页 |
| 鸦胆子油酸 | 第22-23页 |
| 黄芪 | 第23页 |
| 莪术 | 第23-24页 |
| 2 抗衰老相关研究现状 | 第24-28页 |
| 2.1 衰老发生的原因 | 第24页 |
| 2.2 抗衰老药物研究 | 第24-28页 |
| 2.2.1 抗氧化剂 | 第24-25页 |
| 2.2.2 维生素类 | 第25-26页 |
| 2.2.3 还原酶类与微量元素 | 第26页 |
| 2.2.4 营养素类 | 第26页 |
| 2.2.5 单胺氧化酶抑制剂 | 第26页 |
| 2.2.6 免疫调节剂 | 第26-27页 |
| 2.2.7 抗衰老激素 | 第27页 |
| 2.2.8 抗衰延寿相关中药 | 第27-28页 |
| 人参 | 第27页 |
| 丹参 | 第27页 |
| 黄芪 | 第27页 |
| 银杏 | 第27-28页 |
| 刺五加 | 第28页 |
| 五味子 | 第28页 |
| 马齿苋 | 第28页 |
| 枸杞子 | 第28页 |
| 3 端粒学说 | 第28-29页 |
| 3.1 端粒与抗衰相关研究进展 | 第28-29页 |
| 3.2 端粒酶逆转录酶(TERT)研究现状和意义 | 第29页 |
| 4 关于抗衰老与抗肿瘤立题意义 | 第29-31页 |
| 第二章 实验材料 | 第31-35页 |
| 2.1 DMEM培养基的配制 | 第31页 |
| 2.2 PBS (1×)的配制 | 第31页 |
| 2.3 胰酶(0.2%)的配制 | 第31-32页 |
| 2.4 细胞冻存液的配制 | 第32页 |
| 2.5 细胞裂解液的配制 | 第32页 |
| 2.6 考马斯亮蓝R-250 | 第32-33页 |
| 2.7 SDS-PAGE电泳凝胶各组分配制 | 第33页 |
| 2.8 SDS-PAGE Buffer (SDS-free)10×缓冲液的配制 | 第33-34页 |
| 2.9 电泳缓冲液和转膜液的配制 | 第34页 |
| 2.10 封闭液的配制 | 第34页 |
| 2.11 洗膜液的配制 | 第34-35页 |
| 第三章 实验方法 | 第35-46页 |
| 3.1 荧光报告载体的构建 | 第35-36页 |
| 3.2 细胞培养 | 第36-37页 |
| 3.2.1 复苏细胞 | 第36页 |
| 3.2.2 细胞传代 | 第36-37页 |
| 3.2.3 细胞冻存 | 第37页 |
| 3.3 启动子细胞荧光筛药 | 第37-38页 |
| 3.4 细胞RNA提取 | 第38-39页 |
| 3.5 MTT与SRB实验 | 第39-40页 |
| 3.5.1 MTT实验原理 | 第39页 |
| 3.5.2 MTT实验步骤 | 第39页 |
| 3.5.3 SRB实验原理 | 第39-40页 |
| 3.5.4 SRB实验步骤 | 第40页 |
| 3.6 蛋白质免疫印迹实验 | 第40-43页 |
| 3.6.1 样品处理 | 第40页 |
| 3.6.2 蛋白质浓度标准曲线的绘制(考马斯亮蓝法) | 第40-41页 |
| 3.6.3 蛋白样品浓度的测定 | 第41页 |
| 3.6.4 配胶 | 第41-42页 |
| 3.6.5 蛋白凝胶电泳 | 第42页 |
| 3.6.6 转膜 | 第42页 |
| 3.6.7 封闭 | 第42页 |
| 3.6.8 一抗孵育 | 第42页 |
| 3.6.9 二抗孵育 | 第42-43页 |
| 3.6.10 显影 | 第43页 |
| 3.7 流式细胞仪检测ROS水平 | 第43-44页 |
| 3.7.1 实验原理 | 第43页 |
| 3.7.2 细胞加药 | 第43页 |
| 3.7.3 装载探针 | 第43-44页 |
| 3.7.4 设定流式细胞仪,上机检测。 | 第44页 |
| 3.8 细胞划痕实验 | 第44-46页 |
| 3.8.1 细胞铺板 | 第44页 |
| 3.8.2 模拟伤口 | 第44页 |
| 3.8.3 细胞加药 | 第44-45页 |
| 3.8.4 数据处理 | 第45-46页 |
| 第四章 实验仪器 | 第46-47页 |
| 第五章 实验结论 | 第47-65页 |
| 5.1 农科院A、B组200种天然植物提取物的启动子荧光筛选 | 第47-51页 |
| 5.2 MTT实验与SRB实验 | 第51-54页 |
| 5.3 Western-Blot进一步筛选A组和B组药物对启动子的激活情况 | 第54-56页 |
| 5.4 RT-PCR检测药物对细胞TERT活性的影响 | 第56页 |
| 5.5 B90号药物（十字崖爬藤）具有抗肿瘤活性 | 第56-62页 |
| 5.5.1 十字崖爬藤能同时激活wt细胞的p53和p19 | 第56-57页 |
| 5.5.2 十字崖爬藤相对明显地抑制结肠癌和肝癌细胞的生长 | 第57-62页 |
| 5.6 基于启动子筛选平台对C组200种中药提取物进行筛选 | 第62-65页 |
| 5.6.1 启动子细胞的荧光初筛 | 第62页 |
| 5.6.2 对部分通过初筛的药物进行蛋白质免疫印迹验证 | 第62-65页 |
| 第六章 讨论 | 第65-68页 |
| 第七章 致谢 | 第68-70页 |
| 第八章 参考文献 | 第70-75页 |
| 附录A A组104种云南特色天然化合物提取来源信息 | 第75-79页 |
| 附录B B组96种云南特色天然化合物提取来源信息 | 第79-83页 |
| 附录C C组200种药典来源的天然提取物来源信息 | 第83-91页 |
| 附录D 硕士期间发表文章 | 第91页 |
