| 摘要 | 第5-6页 |
| 缩略词表 | 第7-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-30页 |
| 1.1 抑癌基因p53 | 第14-22页 |
| 1.1.1 p53的激活 | 第15-17页 |
| 1.1.2 p53下游信号通路 | 第17-18页 |
| 1.1.3 p53的正负反馈调节 | 第18-22页 |
| 1.1.4 p53异构体 | 第22页 |
| 1.2 p53亚型△133p53/△113p53 | 第22-23页 |
| 1.3 斑马鱼 | 第23-28页 |
| 1.4 研究意义 | 第28-30页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第30-44页 |
| 2.1 不同的斑马鱼品系及其饲养 | 第30页 |
| 2.2 大肠杆菌菌株 | 第30页 |
| 2.3 抗体 | 第30-31页 |
| 2.4 DNA相关试验方法 | 第31-35页 |
| 2.4.1 基因克隆 | 第31-33页 |
| 2.4.2 DNA测序 | 第33-34页 |
| 2.4.3 质粒定点突变和基因内部特定片段的删除 | 第34页 |
| 2.4.4 斑马鱼基因组DNA的抽提 | 第34-35页 |
| 2.5 RNA相关操作 | 第35-37页 |
| 2.5.1 斑马鱼总RNA提取 | 第35-36页 |
| 2.5.2 带帽mRNA的体外合成 | 第36页 |
| 2.5.3 mRNA的纯化 | 第36-37页 |
| 2.6 蛋白质相关试验方法 | 第37-39页 |
| 2.6.1 斑马鱼鱼卵总蛋白提取 | 第37页 |
| 2.6.2 制作SDS聚丙烯酰胺凝胶 | 第37-38页 |
| 2.6.3 SDS-PAGE凝胶电泳以及转膜 | 第38-39页 |
| 2.6.4 蛋白信号检测 | 第39页 |
| 2.7 斑马鱼鱼卵显微注射 | 第39-40页 |
| 2.7.1 显微注射用毛细玻璃针管制备 | 第39-40页 |
| 2.7.2 显微注射斑马鱼胚胎 | 第40页 |
| 2.8 常规实验试剂配方 | 第40-44页 |
| 第三章 △113p53过表达转基因斑马鱼 | 第44-51页 |
| 3.1 四环素诱导表达的△113p53过表达转基因斑马鱼构建及筛选结果 | 第44页 |
| 3.2 外源△113p53基因序列插入位点鉴定结果 | 第44-48页 |
| 3.3 △113p53基因蛋白过表达western blot检测 | 第48-49页 |
| 3.4 小结 | 第49-51页 |
| 第四章 △113p53基因敲除的转基因斑马鱼构建 | 第51-59页 |
| 4.1 △113 p53基因定点敲除及转基因斑马鱼筛选 | 第51-53页 |
| 4.3 A113p53 knockdown蛋白表达量以及功能检测 | 第53-57页 |
| 4.5 小结 | 第57-59页 |
| 参考文献 | 第59-61页 |
| 作者简历 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62页 |
