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基于酶循环放大反应荧光检测生物小分子及DNA的研究

摘要第3-5页
Abstract第5-6页
符号说明第12-13页
第一章 前言第13-42页
    1.1 等温核酸扩增技术的研究进展第13-23页
        1.1.1 等温核酸扩增技术的简介第13-14页
            1.1.1.1 等温核酸扩增技术的特点第13-14页
            1.1.1.2 等温核酸扩增技术的种类第14页
        1.1.2 等温核酸扩增技术在生化分析中的应用第14-23页
            1.1.2.1 链置换扩增技术第14-15页
            1.1.2.2 多位移放大技术第15-16页
            1.1.2.3 滚环扩增技术第16-17页
            1.1.2.4 环介导等温扩增技术第17-18页
            1.1.2.5 等温和嵌合引物启动的核酸扩增技术第18-19页
            1.1.2.6 杂交链式反应技术第19-22页
            1.1.2.7 酶切扩增反应技术第22-23页
    1.2 生物小分子适体传感器的研究发展第23-32页
        1.2.1 生物小分子适体传感器的现状第23页
        1.2.2 荧光适体传感器第23-30页
            1.2.2.1 标记的荧光适配体传感器第24-27页
                1.2.2.1.1 典型的基于FRET的荧光适体传感器第24-25页
                1.2.2.1.2 基于纳米颗粒的荧光适体传感器第25-26页
                1.2.2.1.3 其他标记的荧光适体传感器第26-27页
            1.2.2.2 免标记的荧光适体传感器第27-30页
                1.2.2.2.1 基于DNA插入剂的荧光适体传感器第27-28页
                1.2.2.2.2 碱性位点结合染料基荧光适体传感器第28页
                1.2.2.2.3 基于金属纳米材料的荧光适体传感器第28-29页
                1.2.2.2.4 其他免标记的荧光适体传感器第29-30页
        1.2.3 比色适体传感器第30-32页
            1.2.3.1 金纳米粒子适体传感器第30-31页
                1.2.3.1.1 DNA功能化AuNPs适体传感器第30-31页
                1.2.3.1.2 免标记的AuNPs适体传感器第31页
            1.2.3.2 HRP模拟DNAzyme适体传感器第31-32页
    1.3 蛋白质检测技术的研究发展第32-40页
        1.3.1 蛋白质检测技术的现状第32-33页
            1.3.1.1 蛋白质的功能第32页
            1.3.1.2 蛋白质检测所面临的难题第32-33页
        1.3.2 蛋白质检测在生化分析中的应用第33-40页
            1.3.2.1 基于DNA的蛋白质检测第33-34页
            1.3.2.2 基于PCR的蛋白质测定第34-35页
            1.3.2.3 核酸的等温扩增第35-37页
            1.3.2.4 基于酶的信号放大策略第37-38页
            1.3.2.5 基于纳米材料和DNA的蛋白质测定第38-40页
    1.4 立题依据及主要研究内容第40-42页
第二章 基于树状滚环循环放大法诱导荧光灵敏检测DNA甲基化转移酶的研究第42-54页
    2.1 前言第42-43页
    2.2 实验部分第43-47页
        2.2.1 仪器与试剂第43-44页
        2.2.2 实验步骤第44-47页
            2.2.2.1 DNA修饰磁性微球第44-45页
            2.2.2.2 杂交探针的甲基化和裂解第45页
            2.2.2.3 树突状RCA反应第45页
            2.2.2.4 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳第45-46页
            2.2.2.5 用荧光分光光度计进行检测第46页
            2.2.2.6 DNA甲基化抑制性测定第46-47页
    2.3 结果与讨论第47-53页
        2.3.1 实验原理第47-48页
        2.3.2 信号放大反应的可行性验证第48-49页
        2.3.3 实验条件的优化第49-51页
            2.3.3.1 甲基化过程中的甲基化时间对实验的影响第49页
            2.3.3.2 甲基化过程中AdoMet(SAM)浓度对实验的影响第49-50页
            2.3.3.3 甲基化的抑制性测定第50-51页
        2.3.4 实验的线性范围与检测限第51页
        2.3.5 选择性实验第51-52页
        2.3.6 在实际样品中对Dam MTase的检测第52页
        2.3.7 比较不同方法对MTase的活性测定第52-53页
    2.4 小结第53-54页
第三章 基于三通交叉结构和自组装循环放大技术荧光检测DNA的研究第54-63页
    3.1 前言第54页
    3.2 实验部分第54-57页
        3.2.1 仪器与试剂第54-56页
        3.2.2 实验步骤第56-57页
            3.2.2.1 三通结构以及ESQM的步骤第56页
            3.2.2.2 熵驱动自组装循环放大的步骤第56页
            3.2.2.3 检测荧光信号第56-57页
    3.3 结果与讨论第57-62页
        3.3.1 实验原理第57-58页
        3.3.2 实验的可行性验证第58-59页
        3.3.3 实验条件的优化第59-60页
            3.3.3.1 Klenow DNA聚合酶的用量对实验的影响第59页
            3.3.3.2 反应时间对实验的影响第59-60页
            3.3.3.3 反应温度对实验的影响第60页
        3.3.4 实验的线性范围与检测限第60-61页
        3.3.5 选择性实验第61-62页
    3.4 小结第62-63页
第四章 基于酪胺酶信号放大新型免疫传感器检测凝血酶的研究第63-71页
    4.1 前言第63页
    4.2 实验部分第63-66页
        4.2.1 仪器与试剂第63-64页
        4.2.2 实验步骤第64-66页
            4.2.2.1 金纳米粒子的制备第64-65页
            4.2.2.2 凝血酶适体1的固定第65页
            4.2.2.3 HRP/适体 2-金纳米粒子共轭体的制备第65页
            4.2.2.4 酪胺-HRP共轭体的合成第65页
            4.2.2.5 在反应溶液中的反应第65-66页
            4.2.2.6 检测荧光信号第66页
    4.3 结果与讨论第66-70页
        4.3.1 实验原理第66-67页
        4.3.2 可行性实验第67-68页
        4.3.3 实验条件的优化第68-69页
            4.3.3.1 HRP/凝血酶适体 2 用量的比例对实验的影响第68页
            4.3.3.2 反应时间对实验的影响第68-69页
        4.3.4 实验的线性范围与检测限第69-70页
        4.3.5 选择性实验第70页
    4.4 小结第70-71页
结论第71-73页
参考文献第73-81页
致谢第81-82页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第82-83页

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