摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
符号说明 | 第12-13页 |
第一章 前言 | 第13-42页 |
1.1 等温核酸扩增技术的研究进展 | 第13-23页 |
1.1.1 等温核酸扩增技术的简介 | 第13-14页 |
1.1.1.1 等温核酸扩增技术的特点 | 第13-14页 |
1.1.1.2 等温核酸扩增技术的种类 | 第14页 |
1.1.2 等温核酸扩增技术在生化分析中的应用 | 第14-23页 |
1.1.2.1 链置换扩增技术 | 第14-15页 |
1.1.2.2 多位移放大技术 | 第15-16页 |
1.1.2.3 滚环扩增技术 | 第16-17页 |
1.1.2.4 环介导等温扩增技术 | 第17-18页 |
1.1.2.5 等温和嵌合引物启动的核酸扩增技术 | 第18-19页 |
1.1.2.6 杂交链式反应技术 | 第19-22页 |
1.1.2.7 酶切扩增反应技术 | 第22-23页 |
1.2 生物小分子适体传感器的研究发展 | 第23-32页 |
1.2.1 生物小分子适体传感器的现状 | 第23页 |
1.2.2 荧光适体传感器 | 第23-30页 |
1.2.2.1 标记的荧光适配体传感器 | 第24-27页 |
1.2.2.1.1 典型的基于FRET的荧光适体传感器 | 第24-25页 |
1.2.2.1.2 基于纳米颗粒的荧光适体传感器 | 第25-26页 |
1.2.2.1.3 其他标记的荧光适体传感器 | 第26-27页 |
1.2.2.2 免标记的荧光适体传感器 | 第27-30页 |
1.2.2.2.1 基于DNA插入剂的荧光适体传感器 | 第27-28页 |
1.2.2.2.2 碱性位点结合染料基荧光适体传感器 | 第28页 |
1.2.2.2.3 基于金属纳米材料的荧光适体传感器 | 第28-29页 |
1.2.2.2.4 其他免标记的荧光适体传感器 | 第29-30页 |
1.2.3 比色适体传感器 | 第30-32页 |
1.2.3.1 金纳米粒子适体传感器 | 第30-31页 |
1.2.3.1.1 DNA功能化AuNPs适体传感器 | 第30-31页 |
1.2.3.1.2 免标记的AuNPs适体传感器 | 第31页 |
1.2.3.2 HRP模拟DNAzyme适体传感器 | 第31-32页 |
1.3 蛋白质检测技术的研究发展 | 第32-40页 |
1.3.1 蛋白质检测技术的现状 | 第32-33页 |
1.3.1.1 蛋白质的功能 | 第32页 |
1.3.1.2 蛋白质检测所面临的难题 | 第32-33页 |
1.3.2 蛋白质检测在生化分析中的应用 | 第33-40页 |
1.3.2.1 基于DNA的蛋白质检测 | 第33-34页 |
1.3.2.2 基于PCR的蛋白质测定 | 第34-35页 |
1.3.2.3 核酸的等温扩增 | 第35-37页 |
1.3.2.4 基于酶的信号放大策略 | 第37-38页 |
1.3.2.5 基于纳米材料和DNA的蛋白质测定 | 第38-40页 |
1.4 立题依据及主要研究内容 | 第40-42页 |
第二章 基于树状滚环循环放大法诱导荧光灵敏检测DNA甲基化转移酶的研究 | 第42-54页 |
2.1 前言 | 第42-43页 |
2.2 实验部分 | 第43-47页 |
2.2.1 仪器与试剂 | 第43-44页 |
2.2.2 实验步骤 | 第44-47页 |
2.2.2.1 DNA修饰磁性微球 | 第44-45页 |
2.2.2.2 杂交探针的甲基化和裂解 | 第45页 |
2.2.2.3 树突状RCA反应 | 第45页 |
2.2.2.4 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第45-46页 |
2.2.2.5 用荧光分光光度计进行检测 | 第46页 |
2.2.2.6 DNA甲基化抑制性测定 | 第46-47页 |
2.3 结果与讨论 | 第47-53页 |
2.3.1 实验原理 | 第47-48页 |
2.3.2 信号放大反应的可行性验证 | 第48-49页 |
2.3.3 实验条件的优化 | 第49-51页 |
2.3.3.1 甲基化过程中的甲基化时间对实验的影响 | 第49页 |
2.3.3.2 甲基化过程中AdoMet(SAM)浓度对实验的影响 | 第49-50页 |
2.3.3.3 甲基化的抑制性测定 | 第50-51页 |
2.3.4 实验的线性范围与检测限 | 第51页 |
2.3.5 选择性实验 | 第51-52页 |
2.3.6 在实际样品中对Dam MTase的检测 | 第52页 |
2.3.7 比较不同方法对MTase的活性测定 | 第52-53页 |
2.4 小结 | 第53-54页 |
第三章 基于三通交叉结构和自组装循环放大技术荧光检测DNA的研究 | 第54-63页 |
3.1 前言 | 第54页 |
3.2 实验部分 | 第54-57页 |
3.2.1 仪器与试剂 | 第54-56页 |
3.2.2 实验步骤 | 第56-57页 |
3.2.2.1 三通结构以及ESQM的步骤 | 第56页 |
3.2.2.2 熵驱动自组装循环放大的步骤 | 第56页 |
3.2.2.3 检测荧光信号 | 第56-57页 |
3.3 结果与讨论 | 第57-62页 |
3.3.1 实验原理 | 第57-58页 |
3.3.2 实验的可行性验证 | 第58-59页 |
3.3.3 实验条件的优化 | 第59-60页 |
3.3.3.1 Klenow DNA聚合酶的用量对实验的影响 | 第59页 |
3.3.3.2 反应时间对实验的影响 | 第59-60页 |
3.3.3.3 反应温度对实验的影响 | 第60页 |
3.3.4 实验的线性范围与检测限 | 第60-61页 |
3.3.5 选择性实验 | 第61-62页 |
3.4 小结 | 第62-63页 |
第四章 基于酪胺酶信号放大新型免疫传感器检测凝血酶的研究 | 第63-71页 |
4.1 前言 | 第63页 |
4.2 实验部分 | 第63-66页 |
4.2.1 仪器与试剂 | 第63-64页 |
4.2.2 实验步骤 | 第64-66页 |
4.2.2.1 金纳米粒子的制备 | 第64-65页 |
4.2.2.2 凝血酶适体1的固定 | 第65页 |
4.2.2.3 HRP/适体 2-金纳米粒子共轭体的制备 | 第65页 |
4.2.2.4 酪胺-HRP共轭体的合成 | 第65页 |
4.2.2.5 在反应溶液中的反应 | 第65-66页 |
4.2.2.6 检测荧光信号 | 第66页 |
4.3 结果与讨论 | 第66-70页 |
4.3.1 实验原理 | 第66-67页 |
4.3.2 可行性实验 | 第67-68页 |
4.3.3 实验条件的优化 | 第68-69页 |
4.3.3.1 HRP/凝血酶适体 2 用量的比例对实验的影响 | 第68页 |
4.3.3.2 反应时间对实验的影响 | 第68-69页 |
4.3.4 实验的线性范围与检测限 | 第69-70页 |
4.3.5 选择性实验 | 第70页 |
4.4 小结 | 第70-71页 |
结论 | 第71-73页 |
参考文献 | 第73-81页 |
致谢 | 第81-82页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第82-83页 |