| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 1 绪论 | 第11-16页 |
| 1.1 SCW研究进展 | 第11-13页 |
| 1.1.1 SCW组成 | 第11-12页 |
| 1.1.2 SCW转录调控机制的研究进展 | 第12-13页 |
| 1.2 NF-Y结构特点及分类 | 第13页 |
| 1.3 NF-Y转录因子的生物学功能 | 第13-14页 |
| 1.3.1 NF-Y在植物发育中的作用 | 第13-14页 |
| 1.3.2 NF-Y在调控植物开花中的作用 | 第14页 |
| 1.3.3 NF-Y在调控植物逆境胁迫中的作用 | 第14页 |
| 1.4 研究的目的与意义 | 第14-15页 |
| 1.5 技术路线 | 第15-16页 |
| 2 杨树PsnNF-YA5转录因子的克隆及表达分析 | 第16-30页 |
| 2.1 实验材料 | 第16-17页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第16页 |
| 2.1.2 菌种与载体 | 第16页 |
| 2.1.3 试剂和药品 | 第16页 |
| 2.1.4 主要仪器设备 | 第16页 |
| 2.1.5 主要试剂及培养基配制 | 第16-17页 |
| 2.1.6 引物合成及测序 | 第17页 |
| 2.2 实验方法 | 第17-24页 |
| 2.2.1 小黑杨次生木质部RNA提取及纯化 | 第17页 |
| 2.2.2 cDNA第一链的合成 | 第17-18页 |
| 2.2.3 小黑杨克隆载体pEASYTM-Blunt Zero-NF-YA5构建 | 第18-20页 |
| 2.2.4 PsnNF-YA5生物信息学分析 | 第20-21页 |
| 2.2.5 PsnNF-YA5基因的表达模式分析 | 第21-23页 |
| 2.2.6 PsnNF-YA5亚细胞定位 | 第23-24页 |
| 2.3 结果与分析 | 第24-29页 |
| 2.3.1 小黑杨次生木质部总RNA提取 | 第24-25页 |
| 2.3.2 小黑杨克隆载体pEASYTM-Blunt Zero-NF-YA5构建 | 第25页 |
| 2.3.3 PsnNF-YA5的生物信息学分析 | 第25-27页 |
| 2.3.4 小黑杨NF-YA亚家族基因组织特异性表达模式分析 | 第27-28页 |
| 2.3.5 PsnNF-YA5亚细胞定位 | 第28-29页 |
| 2.4 本章小结 | 第29-30页 |
| 3 PsnNF-YA5启动子的克隆及瞬时表达分析 | 第30-38页 |
| 3.1 实验材料 | 第30页 |
| 3.1.1 菌种与载体 | 第30页 |
| 3.1.2 试剂与药品 | 第30页 |
| 3.1.3 主要仪器设备 | 第30页 |
| 3.1.4 溶液配制 | 第30页 |
| 3.2 实验方法 | 第30-34页 |
| 3.2.1 PsnNF-YA5启动子序列的克隆 | 第30-32页 |
| 3.2.2 植物表达载体pBI121-ProPtrNF-YA5-GUS的克隆 | 第32-33页 |
| 3.2.3 植物表达载体pBI121-ProPtrNF-YA5-GUS转化根瘤农杆菌EHA105 | 第33-34页 |
| 3.2.4 PsnNF-YA5启动子的GUS瞬时表达分析 | 第34页 |
| 3.3 结果与分析 | 第34-37页 |
| 3.3.1 PsnNF-YA5启动子序列的克隆 | 第34-35页 |
| 3.3.2 PsnNF-YA5启动子调控元件PlantCARE分析 | 第35-36页 |
| 3.3.3 PsnNF-YA5启动子的GUS瞬时表达分析 | 第36-37页 |
| 3.4 本章小结 | 第37-38页 |
| 4 PsnNF-YA5转录活性分析 | 第38-50页 |
| 4.1 实验材料 | 第38-39页 |
| 4.1.1 菌株和载体 | 第38页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第38页 |
| 4.1.3 主要仪器设备 | 第38页 |
| 4.1.4 试剂及培养基配制 | 第38-39页 |
| 4.2 实验方法 | 第39-45页 |
| 4.2.1 PsnNF-YA5转录自激活活性分析 | 第39-41页 |
| 4.2.2 PsnNF-YA5结合顺式作用元件分析 | 第41-45页 |
| 4.3 结果与分析 | 第45-49页 |
| 4.3.1 pGBKT7-PsnNF-YA5的构建 | 第45页 |
| 4.3.2 PsnNF-YA5的转录自激活活性检测 | 第45-47页 |
| 4.3.3 pGADT7-Rec2-PsnNF-YA5效应载体的构建 | 第47页 |
| 4.3.4 报告载体的构建 | 第47-48页 |
| 4.3.5 PsnNF-YA5结合顺式作用元件分析 | 第48-49页 |
| 4.4 本章小结 | 第49-50页 |
| 5 PsnNF-YA5过表达载体构建及烟草遗传转化 | 第50-57页 |
| 5.1 实验材料 | 第50页 |
| 5.1.1 植物材料 | 第50页 |
| 5.1.2 菌种与载体 | 第50页 |
| 5.1.3 试剂和药品 | 第50页 |
| 5.1.4 主要仪器设备 | 第50页 |
| 5.1.5 主要培养基配制 | 第50页 |
| 5.2 实验方法 | 第50-53页 |
| 5.2.1 过表达载体ProkII-PsnNF-YA5构建 | 第50-51页 |
| 5.2.2 ProkII-PsnNF-YA5转基因烟草的获得 | 第51-52页 |
| 5.2.3 ProkII-PsnNF-YA5转基因烟草鉴定 | 第52-53页 |
| 5.2.4 T0代转基因烟草种子筛选 | 第53页 |
| 5.3 结果与分析 | 第53-56页 |
| 5.3.1 过表达载体ProkII-PsnNF-YA5的构建 | 第53-54页 |
| 5.3.2 ProkII-PsnNF-YA5转基因烟草鉴定 | 第54-56页 |
| 5.4 本章小结 | 第56-57页 |
| 6 PsnNF-YA5转基因烟草的表型与次生性状分析 | 第57-70页 |
| 6.1 实验材料 | 第57页 |
| 6.1.1 主要试剂 | 第57页 |
| 6.1.2 主要仪器设备 | 第57页 |
| 6.2 实验方法 | 第57-62页 |
| 6.2.1 PsnNF-YA5转基因烟草表型及生长性状相关分析 | 第57-58页 |
| 6.2.2 PsnNF-YA5转基因烟草叶绿素含量测定 | 第58页 |
| 6.2.3 PsnNF-YA5转基因烟草次生生长性状测定 | 第58-60页 |
| 6.2.4 PsnNF-YA5转基因烟草与次生生长相关功能基因的分析 | 第60-62页 |
| 6.3 结果与分析 | 第62-68页 |
| 6.3.1 PsnNF-YA5转基因烟草表型及生长性状相关分析 | 第62-64页 |
| 6.3.2 PsnNF-YA5转基因烟草次生生长性状测定 | 第64-67页 |
| 6.3.3 PsnNF-YA5转基因烟草与次生生长相关基因的功能分析 | 第67-68页 |
| 6.4 本章小结 | 第68-70页 |
| 7 拟南芥nf-ya5突变体的次生性状分析 | 第70-78页 |
| 7.1 实验材料 | 第70页 |
| 7.1.1 植物材料 | 第70页 |
| 7.1.2 主要试剂 | 第70页 |
| 7.2 实验方法 | 第70-73页 |
| 7.2.1 拟南芥nf-ya5突变体鉴定与筛选 | 第70-71页 |
| 7.2.2 拟南芥nf-ya5突变体的表型观察 | 第71页 |
| 7.2.3 拟南芥nf-ya5突变体次生生长性状测定 | 第71-73页 |
| 7.3 结果与分析 | 第73-77页 |
| 7.3.1 拟南芥nf-ya5突变体的鉴定与筛选 | 第73-74页 |
| 7.3.2 拟南芥nf-ya5突变体的表型观察 | 第74页 |
| 7.3.3 拟南芥nf-ya5突变体次生生长性状测定 | 第74-76页 |
| 7.3.4 拟南芥nf-ya5突变体细胞壁电镜观察 | 第76页 |
| 7.3.5 拟南芥nf-ya5突变体与次生生长相关功能基因的分析 | 第76-77页 |
| 7.4 本章小结 | 第77-78页 |
| 结论 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-85页 |
| 附录 | 第85-86页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第86-87页 |
| 致谢 | 第87-88页 |
