摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
1 绪论 | 第9-13页 |
1.1 引言 | 第9页 |
1.2 组蛋白修饰 | 第9页 |
1.3 组蛋白乙酰化 | 第9-12页 |
1.3.1 组蛋白乙酰基转移酶 | 第10页 |
1.3.2 组蛋白去乙酰化酶 | 第10-12页 |
1.4 本课题的研究目的意义及内容 | 第12-13页 |
2 84K杨HDA909基因克隆与生物信息学分析 | 第13-22页 |
2.1 实验材料 | 第13页 |
2.1.1 植物材料 | 第13页 |
2.1.2 菌种与载体 | 第13页 |
2.1.3 主要试剂 | 第13页 |
2.1.4 溶液配制 | 第13页 |
2.2 实验方法 | 第13-16页 |
2.2.1 84K杨总RNA提取和cDNA的合成 | 第13-14页 |
2.2.2 cDNA的合成 | 第14页 |
2.2.3 84K杨HDA909基因克隆 | 第14-16页 |
2.2.4 84K杨HDA909基因生物信息学分析 | 第16页 |
2.3 实验结果与分析 | 第16-21页 |
2.3.1 84KHDA909基因克隆 | 第16-17页 |
2.3.2 84K杨HDA909基因编码的氨基酸序列 | 第17-18页 |
2.3.3 84K杨HDA909蛋白理化性质分析 | 第18页 |
2.3.4 结构域分析 | 第18-19页 |
2.3.5 同源序列比对分析 | 第19-20页 |
2.3.6 系统进化树 | 第20-21页 |
2.4 本章小结 | 第21-22页 |
3 84K杨HDA909基因表达分析 | 第22-26页 |
3.1 实验材料 | 第22页 |
3.1.1 植物材料 | 第22页 |
3.1.2 主要试剂 | 第22页 |
3.2 实验方法 | 第22-23页 |
3.2.1 84K杨幼苗的甘露醇处理 | 第22页 |
3.2.2 84K杨幼苗的盐处理 | 第22页 |
3.2.3 胁迫处理后的 84K杨RNA提取和cDNA合成 | 第22页 |
3.2.4 HDA909基因在 84K杨中的组织特异性表达 | 第22-23页 |
3.3 结果与分析 | 第23-25页 |
3.3.1 84KHDA909基因在 84K杨中的组织特异性表达 | 第23页 |
3.3.2 84K杨HDA909基因在甘露醇胁迫下的表达 | 第23-24页 |
3.3.3 84K杨HDA909基因在盐胁迫下的表达 | 第24-25页 |
3.4 本章小结 | 第25-26页 |
4 84KHDA909亚细胞定位 | 第26-35页 |
4.1 实验材料 | 第26-27页 |
4.1.1 植物材料 | 第26页 |
4.1.2 菌种与载体 | 第26页 |
4.1.3 主要试剂 | 第26页 |
4.1.4 溶液配制 | 第26-27页 |
4.2 实验方法 | 第27-31页 |
4.2.1 84K杨叶片RNA提取 | 第27页 |
4.2.2 cDNA的合成 | 第27页 |
4.2.3 84KHDA909- GFP融合蛋白表达载体的构建 | 第27-30页 |
4.2.4 84KHDA909蛋白的亚细胞定位 | 第30-31页 |
4.2.5 PEG介导原生质体瞬时表达方法 | 第31页 |
4.3 结果与分析 | 第31-34页 |
4.3.1 84KHDA909- GFP融合基因表达载体的构建 | 第31-32页 |
4.3.2 84KHDA909亚细胞定位 | 第32-34页 |
4.4 本章小结 | 第34-35页 |
5 84K杨HDA909基因遗传转化拟南芥及其功能分析 | 第35-52页 |
5.1 实验材料 | 第35-36页 |
5.1.1 植物材料 | 第35页 |
5.1.2 植物过表达载体 | 第35页 |
5.1.3 培养基 | 第35页 |
5.1.4 试剂及溶液 | 第35-36页 |
5.2 实验方法 | 第36-41页 |
5.2.1 植物表达载体构建 | 第36-38页 |
5.2.2 拟南芥的播种与培养 | 第38-39页 |
5.2.3 拟南芥的转化 | 第39页 |
5.2.4 84KHDA909转基因拟南芥的抗性筛选 | 第39-40页 |
5.2.5 转基因拟南芥的分子检测 | 第40-41页 |
5.3 84KHDA909基因功能的分析 | 第41-43页 |
5.3.1 84KHDA909转基因拟南芥生长的情况 | 第41-42页 |
5.3.2 84KHDA909转基因拟南芥在干旱胁迫下的功能 | 第42-43页 |
5.3.3 84KHDA909转基因拟南芥在盐胁迫下的功能 | 第43页 |
5.4 实验结果与分析 | 第43-51页 |
5.4.1 植物表达载体的构建 | 第43-44页 |
5.4.2 84KHDA909转基因拟南芥的PCR鉴定 | 第44-45页 |
5.4.3 84KHDA909转基因阳性植株的RT-PCR鉴定 | 第45页 |
5.4.4 84KHDA909转基因拟南芥生长的情况 | 第45-46页 |
5.4.5 84KHDA909转基因拟南芥种子胁迫处理 | 第46-48页 |
5.4.6 84KHDA909转基因拟南芥幼苗胁迫处理 | 第48-51页 |
5.5 本章小结 | 第51-52页 |
6 84KHDA909基因遗传转化 84K杨及其功能分析 | 第52-57页 |
6.1 实验材料 | 第52页 |
6.1.1 植物材料 | 第52页 |
6.1.2 培养基 | 第52页 |
6.1.3 试剂及溶液 | 第52页 |
6.2 实验方法 | 第52-54页 |
6.2.1 84K杨培养及遗传转化 | 第52-53页 |
6.2.2 HDA909转基因 84K杨的抗性筛选 | 第53页 |
6.2.3 转基因 84K杨的分子检测 | 第53-54页 |
6.2.4 转基因 84K杨根长实验 | 第54页 |
6.3 实验结果与分析 | 第54-56页 |
6.3.1 84KHDA909转基因 84K杨PCR鉴定 | 第54页 |
6.3.2 84KHDA909转基因 84K杨RT-PCR鉴定 | 第54-55页 |
6.3.3 84KHDA909转基因 84K杨生根情况 | 第55-56页 |
6.4 本章小结 | 第56-57页 |
结论 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-62页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第62-63页 |
致谢 | 第63-64页 |