| 摘要 | 第9-10页 |
| Abstract | 第10页 |
| 前言 | 第11-19页 |
| 第一章 Ps-Ⅳ成熟肽基因的获得 | 第19-30页 |
| 1.实验材料与仪器 | 第19页 |
| 1.1 菌株与质粒 | 第19页 |
| 1.2 引物 | 第19页 |
| 1.3 试剂 | 第19页 |
| 1.4 仪器 | 第19页 |
| 2.实验方法 | 第19-25页 |
| 2.1 绿脓杆菌培养及培养液处理 | 第19-20页 |
| 2.2 绿脓杆菌培养液Ps-Ⅳ酶活测定 | 第20页 |
| 2.3 琼脂糖凝胶电泳 | 第20页 |
| 2.4 绿脓杆菌基因组DNA的提取 | 第20-21页 |
| 2.5 Ps-Ⅳ成熟肽基因的获得 | 第21-25页 |
| 3.实验结果 | 第25-29页 |
| 3.1 绿脓杆菌培养液Ps-Ⅳ酶活测定 | 第25页 |
| 3.2 绿脓杆菌基因组DNA的提取 | 第25-26页 |
| 3.3 前体基因Ps-Ⅳ-1的PCR扩增 | 第26页 |
| 3.4 成熟肽基因Ps-Ⅳ的PCR扩增 | 第26-27页 |
| 3.5 含重组质粒细菌菌落的鉴定 | 第27-29页 |
| 4.小结 | 第29页 |
| 5.讨论 | 第29-30页 |
| 第二章 pET-28a-Tag(his)-Ps-Ⅳ的构建及表达 | 第30-37页 |
| 1.实验材料与仪器 | 第30页 |
| 1.1 菌株与质粒 | 第30页 |
| 1.2 引物 | 第30页 |
| 1.3 试剂 | 第30页 |
| 1.4 仪器 | 第30页 |
| 2.实验方法 | 第30-33页 |
| 2.1 重组质粒pET-28a-Tag(his)-Ps-Ⅳ的构建 | 第30-33页 |
| 2.2 重组质粒pET-28a-Tag(his)-Ps-Ⅳ的表达 | 第33页 |
| 3、实验结果 | 第33-35页 |
| 3.1 插入片段的PCR扩增 | 第33页 |
| 3.2 载体pET-28a双酶切 | 第33-34页 |
| 3.3 含重组质粒细菌菌落的鉴定 | 第34-35页 |
| 3.4 重组质粒pET-28a-Tag(his)-Ps-Ⅳ的表达 | 第35页 |
| 4.小结 | 第35页 |
| 5.讨论 | 第35-37页 |
| 第三章 pNJUTRX-Tag(his)-Ps-Ⅳ的构建及表达 | 第37-51页 |
| 1.实验材料与仪器 | 第37页 |
| 1.1 菌株与质粒 | 第37页 |
| 1.2 试剂 | 第37页 |
| 1.3 仪器 | 第37页 |
| 2.实验方法 | 第37-42页 |
| 2.1 表达载体pNJUTRX-Tag(his)-Ps-Ⅳ的构建 | 第37-39页 |
| 2.2 pNJUTRX-Tag(his)-Ps-Ⅳ的诱导表达 | 第39-40页 |
| 2.3 分离纯化 | 第40-42页 |
| 3.实验结果 | 第42-49页 |
| 3.1 表达载体pNJUTRX-Tag(his)-Ps-Ⅳ的构建 | 第42-44页 |
| 3.2 pNJUTRX-Tag(his)-Ps-Ⅳ的诱导表达 | 第44-45页 |
| 3.3 分离纯化 | 第45-49页 |
| 4.小结 | 第49页 |
| 5.讨论 | 第49-51页 |
| 全文结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-55页 |
| 致谢 | 第55页 |
