| 中文摘要 | 第8-9页 |
| 英文摘要 | 第9页 |
| 文献综述 | 第11-27页 |
| 第一章 骨形成蛋白研究进展 | 第11-27页 |
| §1．1 骨形成蛋白（BMP）家族的研究综述 | 第11-21页 |
| §1．1．1 BMP发现简史和基因克隆 | 第11-12页 |
| §1．1．2 BMP的分布 | 第12-13页 |
| §1．1．3 BMP的结构 | 第13-14页 |
| §1．1．4 BMP的表达 | 第14-16页 |
| §1．1．5 BMP的功能 | 第16-19页 |
| §1．1．6 BMP的应用前景 | 第19-21页 |
| §1．2 人骨形成蛋白3（hBMP-3）研究进展 | 第21-25页 |
| §1．2．1 BMP-3的结构特点与组织分布 | 第21-22页 |
| §1．2．2 BMP-3生物学功能和作用机制 | 第22-24页 |
| §1．2．3 BMP-3动物实验及表达研究 | 第24-25页 |
| §1．3 反转录PCR | 第25-26页 |
| §1．4 本实验室的相关研究 | 第26-27页 |
| 实验研究 | 第27-47页 |
| 第二章 hBMP-3基因cDNA部分序列的RT-PCR克隆 | 第27-47页 |
| §2．1 材料与方法 | 第27-35页 |
| §2．1．1 材料 | 第27-30页 |
| §2．1．1．1 主要仪器设备 | 第27-28页 |
| §2．1．1．2 主要试剂与溶液 | 第28-29页 |
| §2．1．1．3 实验材料 | 第29页 |
| §2．1．1．4 PCR引物 | 第29-30页 |
| §2．1．2 方法 | 第30-35页 |
| §2．1．2．1 骨肿瘤组织的获得 | 第30页 |
| §2．1．2．2 总RNA的提取 | 第30-31页 |
| §2．1．2．3 RNA完整性的检测 | 第31页 |
| §2．1．2．4 反转录 | 第31页 |
| §2．1．2．5 PCR | 第31-32页 |
| §2．1．2．6 DNA琼脂糖凝胶电泳 | 第32页 |
| §2．1．2．7 目的片段的回收，纯化，检测 | 第32-33页 |
| §2．1．2．8 目的片段的连接 | 第33页 |
| §2．1．2．9 感受态细胞的制备及转化 | 第33-34页 |
| §2．1．2．10 蓝白斑筛选 | 第34页 |
| §2．1．2．11 提取质粒 | 第34页 |
| §2．1．2．12 质粒酶切鉴定重组克隆 | 第34-35页 |
| §2．1．2．13 做穿刺培养，测序 | 第35页 |
| §2．1．2．14 网上比较分析测序结果 | 第35页 |
| §2．2 结果与分析 | 第35-42页 |
| §2．2．1 总RNA的提取 | 第35-36页 |
| §2．2．2 RT-PCR扩增产物琼脂糖凝胶电泳 | 第36-37页 |
| §2．2．3 特异性条带的回收 | 第37-38页 |
| §2．2．4 感受态大肠杆菌细胞的效价测定 | 第38-39页 |
| §2．2．5 质粒提取结果 | 第39页 |
| §2．2．6 酶切与PCR鉴定重组克隆结果 | 第39-40页 |
| §2．2．7 测序结果 | 第40-41页 |
| §2．2．8 氨基酸序列 | 第41页 |
| §2．2．9 测序基因片段的同源性比较 | 第41-42页 |
| §2．3 讨论 | 第42-46页 |
| §2．3．1 关于TRIZOL法提取总RNA | 第42-43页 |
| §2．3．2 关于PCR反应的引物设计 | 第43-44页 |
| §2．3．3 关于RT-PCR反应中模板和引物的使用量问题 | 第44页 |
| §2．3．4 PCR反应中无须加入石蜡油 | 第44-45页 |
| §2．3．5 提高反转录试剂盒使用效率的策略 | 第45页 |
| §2．3．6 关于RT-PCR中克隆目的片段的长度与实验难易程度的关系 | 第45页 |
| §2．3．7 做转基因动物功能基因获得的途径探讨 | 第45-46页 |
| §2．4 结论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-54页 |
| 附录 | 第54-65页 |
| 作者简介 | 第65页 |
