重组大肠杆菌生产胸腺素β4的工艺研究及活性鉴定
| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 第一章 文献综述 | 第8-19页 |
| 1.1 胸腺素β4 研究概述 | 第8-12页 |
| 1.2 培养重组大肠杆菌生产重组蛋白药物 | 第12-18页 |
| 1.2.1 宿主菌 | 第12-13页 |
| 1.2.2 载体设计 | 第13-14页 |
| 1.2.3 高密度发酵过程的影响因素 | 第14-15页 |
| 1.2.4 发酵方式 | 第15-16页 |
| 1.2.5 发酵过程放大 | 第16-17页 |
| 1.2.6 分离纯化过程 | 第17-18页 |
| 1.3 本论文主要研究内容 | 第18-19页 |
| 第二章 摇瓶发酵研究 | 第19-27页 |
| 2.1 引言 | 第19页 |
| 2.2 材料和方法 | 第19-22页 |
| 2.2.1 菌种 | 第19页 |
| 2.2.2 试剂 | 第19页 |
| 2.2.3 主要仪器 | 第19-20页 |
| 2.2.4 摇瓶培养方法 | 第20页 |
| 2.2.5 分析方法 | 第20-22页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第22-26页 |
| 2.3.1 诱导后的培养温度 | 第22-23页 |
| 2.3.2 接种量的影响 | 第23页 |
| 2.3.3 摇瓶装液量的影响 | 第23-24页 |
| 2.3.4 诱导时机的影响 | 第24-25页 |
| 2.3.5 诱导后培养时间的影响 | 第25页 |
| 2.3.6 诱导剂 IPTG 浓度的优化 | 第25-26页 |
| 2.4 摇瓶发酵小结 | 第26-27页 |
| 第三章 30L 发酵罐发酵工艺研究 | 第27-41页 |
| 3.1 引言 | 第27-28页 |
| 3.2 材料和方法 | 第28-32页 |
| 3.2.1 菌种 | 第28页 |
| 3.2.2 试剂 | 第28-29页 |
| 3.2.3 培养基 | 第29页 |
| 3.2.4 实验仪器和设备 | 第29-30页 |
| 3.2.5 实验方法 | 第30-32页 |
| 3.2.6 分析方法 | 第32页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第32-40页 |
| 3.3.1 补糖策略的研究 | 第32-35页 |
| 3.3.2 诱导后的培养条件 | 第35-39页 |
| 3.3.3 诱导时机的优化 | 第39-40页 |
| 3.4 上罐发酵工艺小结 | 第40-41页 |
| 第四章 纯化工艺及活性鉴定 | 第41-52页 |
| 4.1 引言 | 第41页 |
| 4.2 材料和方法 | 第41-46页 |
| 4.2.1 试剂 | 第41页 |
| 4.2.2 仪器 | 第41页 |
| 4.2.3 层析介质 | 第41页 |
| 4.2.4 蛋白纯化实验方法 | 第41-44页 |
| 4.2.5 蛋白分析方法 | 第44页 |
| 4.2.6 生物活性鉴定 | 第44-46页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第46-51页 |
| 4.3.1 破菌 | 第46页 |
| 4.3.2 镍离子金属螯合层析 | 第46-48页 |
| 4.3.3 凝胶过滤 | 第48页 |
| 4.3.4 酶切 | 第48-49页 |
| 4.3.5 阴离子交换层析 | 第49-50页 |
| 4.3.6 生物活性鉴定 | 第50-51页 |
| 4.4 纯化及活性鉴定小结 | 第51-52页 |
| 第五章 结论与展望 | 第52-53页 |
| 5.1 结论 | 第52页 |
| 5.2 展望 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-58页 |
| 发表论文和科研情况说明 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
