| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-20页 |
| 1.1 副猪嗜血杆菌概述 | 第10-16页 |
| 1.1.1 病原学 | 第10页 |
| 1.1.2 流行病学 | 第10-11页 |
| 1.1.3 毒力因子 | 第11-12页 |
| 1.1.4 副猪嗜血杆菌的致病机理 | 第12-13页 |
| 1.1.5 病理学和临床症状 | 第13-14页 |
| 1.1.6 副猪嗜血杆菌的诊断 | 第14-16页 |
| 1.1.7 防控 | 第16页 |
| 1.2 细胞致死膨胀毒素CDT研究进展 | 第16-19页 |
| 1.2.1 CDT概述 | 第16页 |
| 1.2.2 CDT的结构与功能 | 第16-17页 |
| 1.2.3 CDT作为磷酸酶 | 第17页 |
| 1.2.4 CDT的合成和分泌 | 第17-18页 |
| 1.2.5 CdtB的保守性 | 第18-19页 |
| 1.3 研究目的与意义 | 第19-20页 |
| 第二章 副猪嗜血杆菌CdtB的原核表达 | 第20-36页 |
| 2.1 实验材料 | 第20-22页 |
| 2.1.1 试验菌株和基因组 | 第20页 |
| 2.1.2 主要实验仪器 | 第20-21页 |
| 2.1.3 主要试剂和耗材 | 第21页 |
| 2.1.4 溶液配制 | 第21-22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-27页 |
| 2.2.1 信号肽预测 | 第22页 |
| 2.2.2 基因组提取 | 第22-23页 |
| 2.2.3 CdtB引物设计及PCR扩增 | 第23页 |
| 2.2.4 酶切产物的回收与连接 | 第23-24页 |
| 2.2.5 重组质粒的转化及鉴定 | 第24-25页 |
| 2.2.6 重组蛋白的表达、纯化及鉴定 | 第25-26页 |
| 2.2.7 纯化后的蛋白浓度的测定 | 第26-27页 |
| 2.2.8 CdtB亚基的保守性验证 | 第27页 |
| 2.3 结果 | 第27-34页 |
| 2.3.1 信号肽预测结果 | 第27-28页 |
| 2.3.2 CdtB基因扩增结果 | 第28页 |
| 2.3.3 重组质粒的鉴定结果 | 第28-29页 |
| 2.3.4 重组蛋白的表达、纯化及鉴定结果 | 第29-30页 |
| 2.3.5 CdtB亚基保守性验证结果 | 第30-34页 |
| 2.3.6 纯化的rCdtB蛋白浓度测定结果 | 第34页 |
| 2.4 讨论 | 第34-35页 |
| 2.5 小结 | 第35-36页 |
| 第三章 副猪嗜血杆菌病间接ELISA检测方法的建立 | 第36-48页 |
| 3.1 实验材料 | 第36-37页 |
| 3.1.1 试验血清 | 第36页 |
| 3.1.2 主要实验仪器 | 第36页 |
| 3.1.3 主要试剂和耗材 | 第36-37页 |
| 3.1.4 溶液配制 | 第37页 |
| 3.2 实验方法 | 第37-39页 |
| 3.2.1 rCdtB-ELISA最佳条件的确定 | 第37-38页 |
| 3.2.2 临界值的确定 | 第38-39页 |
| 3.2.3 特异性试验 | 第39页 |
| 3.2.4 重复性试验 | 第39页 |
| 3.2.5 rCdtB-ELISA与商品化试剂盒的符合率 | 第39页 |
| 3.2.6 rCdtB-ELISA的临床检测 | 第39页 |
| 3.2.7 rCdtB-ELISA的保质期试验 | 第39页 |
| 3.3 结果 | 第39-46页 |
| 3.3.1 rCdtB-ELISA最佳条件结果 | 第39-42页 |
| 3.3.2 临界值结果 | 第42-43页 |
| 3.3.3 特异性试验结果 | 第43页 |
| 3.3.4 重复性试验结果 | 第43-44页 |
| 3.3.5 rCdtB-ELISA与商品化试剂盒的符合率结果 | 第44-45页 |
| 3.3.6 rCdtB-ELISA的临床检测结果 | 第45页 |
| 3.3.7 rCdtB-ELISA保质期试验结果 | 第45-46页 |
| 3.4 讨论 | 第46-47页 |
| 3.5 小结 | 第47-48页 |
| 第四章 结论 | 第48-50页 |
| 参考文献 | 第50-60页 |
| 致谢 | 第60-62页 |
| 作者简历 | 第62页 |
