| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 1 文献综述 | 第10-16页 |
| 1.1 钼的生理作用及研究现状 | 第10-11页 |
| 1.2 Moco的合成途径以及含钼酶在植物生长发育中作用 | 第11-14页 |
| 1.2.1 Moco的合成途径 | 第11-12页 |
| 1.2.2 含钼酶的研究现状 | 第12-14页 |
| 1.3 植物对钼的吸收转运 | 第14页 |
| 1.4 植物钼营养与碳代谢、氮代谢的关系 | 第14-15页 |
| 1.5 Mo转运蛋白的研究进展 | 第15页 |
| 1.6 百脉根的生长特性及研究现状 | 第15-16页 |
| 2 引言 | 第16-18页 |
| 2.1 研究的目的与意义 | 第16-17页 |
| 2.2 主要研究内容 | 第17-18页 |
| 2.3 技术路线 | 第18页 |
| 3 材料与方法 | 第18-27页 |
| 3.1 实验材料 | 第18-19页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第18-19页 |
| 3.1.2 质粒与菌株 | 第19页 |
| 3.2 培养基 | 第19页 |
| 3.3 抗菌素 | 第19-20页 |
| 3.4 主要仪器和试剂 | 第20页 |
| 3.4.1 主要仪器 | 第20页 |
| 3.4.2 主要试剂 | 第20页 |
| 3.5 方法 | 第20-27页 |
| 3.5.1 百脉根种子消毒与培养方法 | 第20-21页 |
| 3.5.2 钼含量测定 | 第21页 |
| 3.5.3 含钼酶活性测定 | 第21-22页 |
| 3.5.4 克隆中所用到的引物 | 第22页 |
| 3.5.5 LjMOT1中间片段的扩增 | 第22-24页 |
| 3.5.6 LjMOT1全长cDNA的获得 | 第24页 |
| 3.5.7 LjMOT1的生物信息学分析 | 第24-25页 |
| 3.5.8 真核表达载体的构建 | 第25-26页 |
| 3.5.9 qRT-PCR检测 | 第26页 |
| 3.5.10 LjMOT1的亚细胞定位 | 第26-27页 |
| 3.5.11 农杆菌转化拟南芥 | 第27页 |
| 3.5.12 转基因拟南芥的筛选 | 第27页 |
| 4 结果与分析 | 第27-45页 |
| 4.1 不同钼浓度下百脉根生长的表型分析 | 第27-28页 |
| 4.2 百脉根的根、叶中钼含量分析 | 第28-29页 |
| 4.3 百脉根中的硝酸还原酶(NR)、醛氧化酶(AO)、黄嘌呤脱氢酶(XDH)的酶活分析 | 第29-30页 |
| 4.4 百脉根中LjMOT1全长cDNA的克隆 | 第30-33页 |
| 4.4.1 总RNA的提取及cDNA的合成 | 第30-31页 |
| 4.4.2 LjMOT1中间片段的扩增 | 第31-32页 |
| 4.4.3 3’Full RACE扩增 | 第32页 |
| 4.4.4 5’Full RACE扩增 | 第32-33页 |
| 4.4.5 LjMOT1全长cDNA序列 | 第33页 |
| 4.5 百脉根LjMOT1的生物信息学分析 | 第33-39页 |
| 4.5.1 LjMOT1编码的氨基酸序列分析 | 第33-36页 |
| 4.5.2 LjMOT1编码的氨基酸序列的同源性比较 | 第36-37页 |
| 4.5.3 LjMOT1编码的蛋白进化树分析 | 第37-39页 |
| 4.5.4 LjMOT1蛋白信号肽预测 | 第39页 |
| 4.6 LjMOT1的表达水平 | 第39-41页 |
| 4.7 LjMOT1的真核表达分析 | 第41-45页 |
| 4.7.1 植物表达载体的构建 | 第41-42页 |
| 4.7.2 LjMOT1亚细胞定位 | 第42-44页 |
| 4.7.3 农杆菌介导LjMOT1的遗传转化 | 第44-45页 |
| 5 讨论 | 第45-47页 |
| 5.1 Mo对百脉根生长及含钼酶活性的影响 | 第45页 |
| 5.2 百脉根中LjMOT1的克隆与序列分析 | 第45-46页 |
| 5.3 百脉根中LjMOT1的表达特性 | 第46页 |
| 5.4 农杆菌介导LjMOT1遗传转化 | 第46页 |
| 5.5 LjMOT1对钼的吸收和转运的机制 | 第46-47页 |
| 6 结论 | 第47-49页 |
| 参考文献 | 第49-55页 |
| 附录 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 作者简历 | 第57页 |
| 硕士在读期间发表的论文 | 第57页 |
