| 华中科技大学博士学位论文创新点概述 | 第4-8页 |
| 中文摘要 | 第8-13页 |
| ABSTRACT | 第13-20页 |
| 前言 | 第21-32页 |
| 参考文献 | 第28-32页 |
| 第一部分 PLCE1表达对食管鳞癌细胞生物学行为的影响 | 第32-93页 |
| 材料与方法 | 第33-55页 |
| 1. 材料 | 第33-37页 |
| 1.1 石蜡组织样本 | 第33页 |
| 1.2 食管鳞癌细胞系 | 第33页 |
| 1.3 主要试剂与耗材 | 第33-36页 |
| 1.4 设计合成siRNA | 第36-37页 |
| 2. 方法 | 第37-55页 |
| 2.1 临床病理学研究内容和方法 | 第37-38页 |
| 2.2 组织芯片制备技术 | 第38-40页 |
| 2.3 免疫组织化学方法 | 第40-41页 |
| 2.4 细胞培养 | 第41-43页 |
| 2.5 小干扰RNA转染 | 第43页 |
| 2.6 实时定量PCR | 第43-48页 |
| 2.7 Western blot检测 | 第48-51页 |
| 2.8 MTT测细胞生长曲线 | 第51页 |
| 2.9 克隆形成实验 | 第51-52页 |
| 2.10 流式细胞仪检测细胞的凋亡 | 第52页 |
| 2.11 细胞免疫荧光实验 | 第52页 |
| 2.12 Transwell侵袭实验 | 第52-53页 |
| 2.13 Transwell迁移实验 | 第53页 |
| 2.14 抑制PLCE1表达后全基因组表达谱的分析 | 第53页 |
| 2.15 Meta分析 | 第53-54页 |
| 2.16 统计学方法 | 第54-55页 |
| 结果 | 第55-84页 |
| 1. 食管鳞癌样本临床病理特点 | 第55-57页 |
| 2. 食管鳞癌、癌前病变组织及癌旁正常组织中PLCE1蛋白的表达 | 第57-61页 |
| 3. PLCE1蛋白的表达与食管鳞癌患者预后的相关性 | 第61-63页 |
| 4. Meta分析PLCE1蛋白在食管鳞癌组织中表达及其意义 | 第63-64页 |
| 5. 特异siRNA转染食管鳞癌细胞下调PLCE1表达 | 第64-66页 |
| 6. 干扰PLCE1表达对食管鳞癌细胞增殖和周期的影响 | 第66-69页 |
| 7. 干扰PLCE1表达对食管鳞癌细胞侵袭和迁移的影响 | 第69-70页 |
| 8. PLCE1 siRNA转染食管鳞癌细胞对其骨架的影响 | 第70-71页 |
| 9. PLCE1 siRNA对食管鳞癌细胞药物敏感性的影响 | 第71-73页 |
| 10. 运用表达谱芯片初步筛选PLCE1对食管鳞癌下游分子表达的调控 | 第73-84页 |
| 讨论 | 第84-88页 |
| 结论 | 第88-89页 |
| 参考文献 | 第89-93页 |
| 第二部分 食管鳞癌中PLCE1基因相关miRNA互相调控机制初步研究 | 第93-140页 |
| 材料与方法 | 第94-103页 |
| 1. 材料 | 第94-96页 |
| 1.1 研究对象 | 第94页 |
| 1.2 主要仪器设备 | 第94-95页 |
| 1.3 主要试剂 | 第95-96页 |
| 2. 主要试剂的配置 | 第96页 |
| 3. 方法 | 第96-103页 |
| 结果 | 第103-130页 |
| 1. 应用miRNA靶基因预测软件预测可能调控PLCE1基因的miRNAs | 第103-104页 |
| 2. PLCE1基因为miR-145的靶基因 | 第104-106页 |
| 3. miR-145对食管鳞癌细胞生物学功能的影响 | 第106-109页 |
| 4. 增强miR-145或/和沉默PLCE1可显著抑制食管鳞癌细胞的增殖和侵袭 | 第109-111页 |
| 5. 食管鳞癌组织中miR-145和PLCE1表达的相关性 | 第111-113页 |
| 6. PLCE1基因靶向调控miRNAs分子的筛选和验证 | 第113-121页 |
| 7. miRNA-106b-5p在食管鳞癌中的生物学功能研究 | 第121-123页 |
| 8. miRNA-106b-5p与RBL1和RBL2的靶向调控关系 | 第123-125页 |
| 9. miR-106b-5p参与PLCE1基因对食管鳞癌细胞生物学功能的影响 | 第125-128页 |
| 10. miRNA-106b-5p和RBL2在食管鳞癌中的表达及与PLCE1蛋白的相关性 | 第128-130页 |
| 讨论 | 第130-135页 |
| 结论 | 第135-136页 |
| 参考文献 | 第136-140页 |
| 本研究总结及不足之处和展望 | 第140-142页 |
| 综述 | 第142-153页 |
| 参考文献 | 第150-153页 |
| 缩略词一览表 | 第153-154页 |
| 博士在读期间的研究成果 | 第154-158页 |
| 致谢 | 第158-159页 |
