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八门湾红树林土壤微生物多样性分析及放线菌的分离与鉴定

摘要第4-7页
Abstract第7-10页
1 前言第15-35页
    1.1 红树林第15-16页
        1.1.1 红树林简介第15页
        1.1.2 海南省红树林资源第15-16页
    1.2 红树林微生物第16-23页
        1.2.1 红树林微生物及其多样性第16-21页
            1.2.1.1 红树林古细菌第17-18页
            1.2.1.2 红树林细菌第18-19页
            1.2.1.3 红树林放线菌第19-20页
            1.2.1.4 红树林真菌第20-21页
        1.2.2 红树林微生物资源的应用第21-23页
            1.2.2.1 红树林微生物在医学方面的应用第21-22页
            1.2.2.2 红树林微生物在农业方面的应用第22页
            1.2.2.3 红树林微生物在其它方面的应用第22-23页
    1.3 微生物多样性研究方法及相关技术第23-27页
        1.3.1 依赖培养的群落分析方法第23-24页
            1.3.1.1 稀释平板法第23-24页
            1.3.1.2 Biolog微平板分析系统第24页
        1.3.2 非依赖培养的群落分析方法第24-27页
            1.3.2.1 磷脂脂肪酸分析法第24-25页
            1.3.2.2 分子标记技术第25页
            1.3.2.3 变性梯度凝胶电泳第25-26页
            1.3.2.4 宏基因组学技术第26-27页
    1.4 海洋放线菌研究进展第27-29页
        1.4.1 海洋放线菌多样性第27-28页
        1.4.2 海洋放线菌新资源第28页
        1.4.3 海洋放线菌代谢产物第28-29页
    1.5 放线菌鉴定技术第29-33页
        1.5.1 经典分类第29页
        1.5.2 化学分类第29-30页
        1.5.3 分子分类第30-33页
            1.5.3.1 16S rRNA基因序列分析第31页
            1.5.3.2 DNA(G+C)mol%测定第31页
            1.5.3.3 DNA同源性分析第31-33页
            1.5.3.4 DNA指纹技术第33页
    1.6 本论文的研究目的与意义第33-35页
2 材料与方法第35-52页
    2.1 实验材料第35-40页
        2.1.1 样品来源第35页
        2.1.2 主要仪器设备第35-36页
        2.1.3 主要试剂第36-37页
        2.1.4 主要杂交溶液第37-38页
        2.1.5 培养基第38-39页
            2.1.5.1 放线菌分离培养基第38页
            2.1.5.2 放线菌鉴定培养基第38-39页
        2.1.6 PCR引物第39-40页
            2.1.6.1 微生物多样性分析引物第39-40页
            2.1.6.2 放线菌16S rRNA基因扩增引物第40页
        2.1.7 模式菌株第40页
    2.2 实验方法第40-52页
        2.2.1 土壤样品环境因子测定第40页
        2.2.2 土壤微生物高通量测序与数据分析第40-43页
            2.2.2.1 基因组DNA样品制备第40-41页
            2.2.2.2 高通量测序流程第41-42页
            2.2.2.3 数据分析流程第42-43页
        2.2.3 红树林土壤放线菌分离和保藏第43页
            2.2.3.1 样品预处理第43页
            2.2.3.2 菌株的分离和纯化第43页
            2.2.3.3 菌株的保藏第43页
        2.2.4 放线菌的分类鉴定第43-52页
            2.2.4.1 培养与形态特征第43-44页
            2.2.4.2 生理生化特征第44-45页
            2.2.4.3 化学指征分析第45-48页
            2.2.4.4 分子指征分析第48-52页
3 结果与分析第52-83页
    3.1 土壤样品的理化指标第52页
    3.2 高通量测序与数据分析第52-62页
        3.2.1 测序数据统计分析第52-53页
        3.2.2 生物信息学分析第53-62页
            3.2.2.1 OTU聚类和多样性分析第53-56页
            3.2.2.2 稀释度曲线第56-57页
            3.2.2.3 分类学分析第57-62页
                3.2.2.3.1 细菌群落组成第57-58页
                3.2.2.3.2 真菌群落组成第58-60页
                3.2.2.3.3 古菌群落组成第60-61页
                3.2.2.3.4 放线菌纲群落组成第61-62页
    3.3 放线菌的分离第62-64页
    3.4 放线菌的多相分类鉴定第64-83页
        3.4.1 菌株HA12301~T的分类鉴定第64-72页
            3.4.1.1 培养与形态特征第64-65页
            3.4.1.2 生理生化特征第65-66页
            3.4.1.3 化学特征分析第66-68页
            3.4.1.4 分子特征分析第68-71页
            3.4.1.5 鉴定结果第71-72页
        3.4.2 菌株HA12415~T的分类鉴定第72-77页
            3.4.2.1 培养与形态特征第72页
            3.4.2.2 生理生化特征第72-73页
            3.4.2.3 化学特征分析第73-75页
            3.4.2.4 分子特征分析第75-77页
            3.4.2.5 鉴定结果第77页
        3.4.3 菌株HA12420~T的分类鉴定第77-83页
            3.4.3.1 培养与形态特征第77-78页
            3.4.3.2 生理生化特征第78-79页
            3.4.3.3 化学特征分析第79-80页
            3.4.3.4 分子特征分析第80-82页
            3.4.3.5 鉴定结果第82-83页
4 讨论第83-92页
    4.1 微生物群落多样性研究第83-87页
    4.2 红树林放线菌的分离第87-89页
    4.3 分子分类在放线菌多相分类中的应用第89-92页
5 结论第92-95页
参考文献第95-110页
附录第110-113页
致谢第113页

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