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水稻品种抗稻瘟病等位基因鉴定及抗瘟新基因的定位和克隆

摘要第10-12页
Abstract第12-13页
前言第14-16页
第一章 水稻抗瘟基因定位及抗病分子育种研究进展第16-27页
    1.1 水稻与稻瘟病菌互作机制研究进展第17-19页
        1.1.1 稻瘟病菌的侵染过程第18页
        1.1.2 植物与病原真菌互作的分子机制第18-19页
        1.1.3 植物与病原真菌互作中酶的作用第19页
    1.2 稻瘟病抗性鉴定研究进展第19-20页
    1.3 抗稻瘟病基因研究进展第20-24页
        1.3.1 稻瘟病抗性基因的功能第20-21页
        1.3.2 稻瘟病抗性基因的定位及克隆第21-22页
        1.3.3 抗稻瘟病基因定位的策略第22-24页
    1.4 抗稻瘟病分子标记辅助育种研究进展第24-26页
    1.5 本研究的意义第26-27页
第二章 辽宁省主栽水稻品种中高抗品种资源的筛选第27-33页
    2.1 材料与方法第27-29页
        2.1.1 供试品种及来源第27页
        2.1.2 稻瘟病抗性鉴定第27页
        2.1.3 病害调查方法第27-29页
    2.2 结果与分析第29-32页
        2.2.1 不同年度间辽宁省主栽水稻品种的抗性评价第29-32页
    2.3 结论与讨论第32-33页
第三章 辽宁省主栽水稻品种抗稻瘟病基因的鉴定及分析第33-48页
    3.1 材料和方法第34-38页
        3.1.1 供试水稻材料第34-35页
        3.1.2 水稻品种抗瘟性田间鉴定第35页
        3.1.3 水稻品种抗瘟性人工接种鉴定第35-36页
        3.1.4 水稻品种基因组提取第36页
        3.1.5 引物设计第36-38页
        3.1.6 PCR扩增第38页
        3.1.7 PCR扩增结果的电泳检测第38页
        3.1.8 PCR产物测序及序列比对第38页
    3.2 结果与分析第38-46页
        3.2.1 辽宁省水稻24个主栽品种抗瘟表型鉴定第38-39页
        3.2.2 抗病基因的序列扩增结果及分析第39-46页
    3.3 结论与讨论第46-48页
        3.3.1 稻瘟病不同抗性基因进化上的差异第46-47页
        3.3.2 稻瘟病抗性基因与稻瘟病菌无毒基因的共同进化第47-48页
第四章 港育129抗稻瘟病新基因Pi65(t)的精细定位第48-86页
    4.1 材料和方法第48-59页
        4.1.1 供试水稻材料第48页
        4.1.2 群体构建第48-49页
        4.1.3 样品DNA提取及抗、感基因池构建第49-50页
        4.1.4 PCR扩增和电泳检测第50-52页
        4.1.5 NGS(Next-generation sequencing)数据分析第52-55页
        4.1.6 利用SSR标记和Indel标记精细定位第55页
        4.1.7 候选基因的半定量表达第55-59页
    4.2 结果与分析第59-84页
        4.2.1 亲本和DH群体表型鉴定第59-65页
        4.2.2 候选区域的初步定位第65-75页
        4.2.3 候选区域的精细定位第75-84页
    4.3 讨论与结论第84-86页
第五章 Pi9和Pita的抗稻瘟病新等位基因及候选基因Os11g0691700的克隆和载体构建第86-103页
    5.1 试验材料第86-88页
        5.1.1 供试水稻材料、菌株和载体第86-87页
        5.1.2 供试培养基及溶液配方第87页
        5.1.3 供试试剂和酶第87-88页
        5.1.4 供试试验仪器第88页
    5.2 试验方法第88-95页
        5.2.1 水稻RNA提取第88页
        5.2.2 RNA逆转录合成第一链cDNA第88-89页
        5.2.3 cDNA用内参检验第89页
        5.2.4 目的片段扩增与纯化回收第89-91页
        5.2.5 回收DNA与T载体连接第91页
        5.2.6 细菌转化第91页
        5.2.7 重组质粒的PCR鉴定第91页
        5.2.8 重组质粒的双酶切鉴定第91-93页
        5.2.9 基因表达载体的构建第93-95页
    5.3 结果与分析第95-100页
        5.3.1 RNA及cDNA第95页
        5.3.2 目的基因的克隆第95-96页
        5.3.3 目的基因与T载体连接第96-97页
        5.3.4 重组质粒的双酶切鉴定第97-98页
        5.3.5 表达载体的构建第98-100页
        5.3.6 表达载体的农杆菌转化第100页
    5.4 结论与讨论第100-103页
参考文献第103-113页
附录第113-119页
    附录1第113-116页
    附录2第116-117页
    附录3第117-119页
致谢第119-120页
攻读学位期间论文发表情况第120页

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