摘要 | 第10-12页 |
Abstract | 第12-13页 |
前言 | 第14-16页 |
第一章 水稻抗瘟基因定位及抗病分子育种研究进展 | 第16-27页 |
1.1 水稻与稻瘟病菌互作机制研究进展 | 第17-19页 |
1.1.1 稻瘟病菌的侵染过程 | 第18页 |
1.1.2 植物与病原真菌互作的分子机制 | 第18-19页 |
1.1.3 植物与病原真菌互作中酶的作用 | 第19页 |
1.2 稻瘟病抗性鉴定研究进展 | 第19-20页 |
1.3 抗稻瘟病基因研究进展 | 第20-24页 |
1.3.1 稻瘟病抗性基因的功能 | 第20-21页 |
1.3.2 稻瘟病抗性基因的定位及克隆 | 第21-22页 |
1.3.3 抗稻瘟病基因定位的策略 | 第22-24页 |
1.4 抗稻瘟病分子标记辅助育种研究进展 | 第24-26页 |
1.5 本研究的意义 | 第26-27页 |
第二章 辽宁省主栽水稻品种中高抗品种资源的筛选 | 第27-33页 |
2.1 材料与方法 | 第27-29页 |
2.1.1 供试品种及来源 | 第27页 |
2.1.2 稻瘟病抗性鉴定 | 第27页 |
2.1.3 病害调查方法 | 第27-29页 |
2.2 结果与分析 | 第29-32页 |
2.2.1 不同年度间辽宁省主栽水稻品种的抗性评价 | 第29-32页 |
2.3 结论与讨论 | 第32-33页 |
第三章 辽宁省主栽水稻品种抗稻瘟病基因的鉴定及分析 | 第33-48页 |
3.1 材料和方法 | 第34-38页 |
3.1.1 供试水稻材料 | 第34-35页 |
3.1.2 水稻品种抗瘟性田间鉴定 | 第35页 |
3.1.3 水稻品种抗瘟性人工接种鉴定 | 第35-36页 |
3.1.4 水稻品种基因组提取 | 第36页 |
3.1.5 引物设计 | 第36-38页 |
3.1.6 PCR扩增 | 第38页 |
3.1.7 PCR扩增结果的电泳检测 | 第38页 |
3.1.8 PCR产物测序及序列比对 | 第38页 |
3.2 结果与分析 | 第38-46页 |
3.2.1 辽宁省水稻24个主栽品种抗瘟表型鉴定 | 第38-39页 |
3.2.2 抗病基因的序列扩增结果及分析 | 第39-46页 |
3.3 结论与讨论 | 第46-48页 |
3.3.1 稻瘟病不同抗性基因进化上的差异 | 第46-47页 |
3.3.2 稻瘟病抗性基因与稻瘟病菌无毒基因的共同进化 | 第47-48页 |
第四章 港育129抗稻瘟病新基因Pi65(t)的精细定位 | 第48-86页 |
4.1 材料和方法 | 第48-59页 |
4.1.1 供试水稻材料 | 第48页 |
4.1.2 群体构建 | 第48-49页 |
4.1.3 样品DNA提取及抗、感基因池构建 | 第49-50页 |
4.1.4 PCR扩增和电泳检测 | 第50-52页 |
4.1.5 NGS(Next-generation sequencing)数据分析 | 第52-55页 |
4.1.6 利用SSR标记和Indel标记精细定位 | 第55页 |
4.1.7 候选基因的半定量表达 | 第55-59页 |
4.2 结果与分析 | 第59-84页 |
4.2.1 亲本和DH群体表型鉴定 | 第59-65页 |
4.2.2 候选区域的初步定位 | 第65-75页 |
4.2.3 候选区域的精细定位 | 第75-84页 |
4.3 讨论与结论 | 第84-86页 |
第五章 Pi9和Pita的抗稻瘟病新等位基因及候选基因Os11g0691700的克隆和载体构建 | 第86-103页 |
5.1 试验材料 | 第86-88页 |
5.1.1 供试水稻材料、菌株和载体 | 第86-87页 |
5.1.2 供试培养基及溶液配方 | 第87页 |
5.1.3 供试试剂和酶 | 第87-88页 |
5.1.4 供试试验仪器 | 第88页 |
5.2 试验方法 | 第88-95页 |
5.2.1 水稻RNA提取 | 第88页 |
5.2.2 RNA逆转录合成第一链cDNA | 第88-89页 |
5.2.3 cDNA用内参检验 | 第89页 |
5.2.4 目的片段扩增与纯化回收 | 第89-91页 |
5.2.5 回收DNA与T载体连接 | 第91页 |
5.2.6 细菌转化 | 第91页 |
5.2.7 重组质粒的PCR鉴定 | 第91页 |
5.2.8 重组质粒的双酶切鉴定 | 第91-93页 |
5.2.9 基因表达载体的构建 | 第93-95页 |
5.3 结果与分析 | 第95-100页 |
5.3.1 RNA及cDNA | 第95页 |
5.3.2 目的基因的克隆 | 第95-96页 |
5.3.3 目的基因与T载体连接 | 第96-97页 |
5.3.4 重组质粒的双酶切鉴定 | 第97-98页 |
5.3.5 表达载体的构建 | 第98-100页 |
5.3.6 表达载体的农杆菌转化 | 第100页 |
5.4 结论与讨论 | 第100-103页 |
参考文献 | 第103-113页 |
附录 | 第113-119页 |
附录1 | 第113-116页 |
附录2 | 第116-117页 |
附录3 | 第117-119页 |
致谢 | 第119-120页 |
攻读学位期间论文发表情况 | 第120页 |