| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-10页 |
| 文献综述 | 第10-17页 |
| 第一章 牛传染性鼻气管炎诊断方法研究进展 | 第10-17页 |
| ·牛传染性鼻气管炎概述 | 第10-13页 |
| ·IBR 诊断方法研究进展 | 第13-15页 |
| ·病原诊断 | 第13页 |
| ·血清学诊断 | 第13-15页 |
| ·分子生物学方法 | 第15页 |
| ·gD 蛋白的研究 | 第15-16页 |
| ·研究目的和意义 | 第16-17页 |
| 试验研究 | 第17-40页 |
| 第二章 牛传染性鼻气管炎病毒 gD 基因原核表达 | 第17-31页 |
| ·材料 | 第17-21页 |
| ·细胞、病毒和质粒 | 第17页 |
| ·血清与抗体 | 第17页 |
| ·主要试剂与酶 | 第17页 |
| ·主要仪器 | 第17-18页 |
| ·主要试剂的配制 | 第18-21页 |
| ·方法 | 第21-26页 |
| ·牛传染性鼻气管炎病毒 gD 基因的克隆 | 第21-23页 |
| ·原核表达载体的构建及鉴定 | 第23-24页 |
| ·重组 gD 蛋白的诱导表达 | 第24-25页 |
| ·重组蛋白的 SDS-PAGE 检测 | 第25页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第25页 |
| ·纯化 gD 蛋白的 SDS-PAGE 检测 | 第25-26页 |
| ·纯化蛋白的 Western blot 检测 | 第26页 |
| ·结果 | 第26-29页 |
| ·gD 基因的 PCR 扩增结果 | 第26页 |
| ·重组克隆质粒的双酶切鉴定结果 | 第26-27页 |
| ·基因序列测定和分析 | 第27页 |
| ·重组原核表达质粒的双酶切鉴定 | 第27-28页 |
| ·重组质粒测序分析 | 第28页 |
| ·表达产物的鉴定 | 第28-29页 |
| ·讨论 | 第29-30页 |
| ·小结 | 第30-31页 |
| 第三章 牛传染性鼻气管炎病毒 gD 蛋白间接 ELISA 检测方法的建立及初步应用 | 第31-40页 |
| ·材料 | 第31-32页 |
| ·主要仪器、血清和试剂 | 第31页 |
| ·主要工作液的配制 | 第31-32页 |
| ·临床样品来源 | 第32页 |
| ·方法 | 第32-34页 |
| ·ELISA 最佳工作条件的确定 | 第32-34页 |
| ·间接 ELISA 方法阴阳性临界值的确定 | 第34页 |
| ·特异性实验 | 第34页 |
| ·敏感性实验 | 第34页 |
| ·重复性实验 | 第34页 |
| ·临床样品的初步检测及对比性试验 | 第34页 |
| ·结果 | 第34-39页 |
| ·棋盘滴定法选择抗原和血清的工作浓度 | 第34-35页 |
| ·抗原最佳包被条件的确定结果 | 第35-36页 |
| ·酶标二抗最佳工作浓度的确定结果 | 第36页 |
| ·最佳封闭液的确定 | 第36页 |
| ·血清最佳反应时间的确定 | 第36页 |
| ·底物反应最佳时间的确定 | 第36-37页 |
| ·ELISA 阴阳性临界值的确定结果 | 第37页 |
| ·特异性试验结果 | 第37-38页 |
| ·敏感性试验结果 | 第38页 |
| ·重复性试验结果 | 第38页 |
| ·临床样品检测结果 | 第38-39页 |
| ·讨论 | 第39页 |
| ·小结 | 第39-40页 |
| 结论 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-45页 |
| 致谢 | 第45-46页 |
| 作者简介 | 第46页 |