摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
第1章 绪论 | 第8-20页 |
1.1 课题背景及研究的目的和意义 | 第8-9页 |
1.2 Nrf2/ARE信号通路研究概述 | 第9-15页 |
1.2.1 Nrf2/ARE信号通路简介 | 第9-13页 |
1.2.2 Nrf2/ARE信号通路的活化 | 第13-15页 |
1.3 表观遗传学的研究进展 | 第15-17页 |
1.3.1 DNA甲基化的调控机制 | 第15-16页 |
1.3.2 DNA甲基转移酶简介 | 第16-17页 |
1.4 DNA甲基化调控与疾病 | 第17-18页 |
1.5 甲基化与斑马鱼Nrf2/ARE信号通路 | 第18-19页 |
1.6 主要研究内容 | 第19页 |
1.7 技术路线 | 第19-20页 |
第2章 实验材料与方法 | 第20-30页 |
2.1 实验材料 | 第20-22页 |
2.1.1 实验对象 | 第20页 |
2.1.2 实验试剂 | 第20-21页 |
2.1.3 实验仪器 | 第21-22页 |
2.1.4 实验网站及分析软件 | 第22页 |
2.2 实验方法 | 第22-30页 |
2.2.1 实验样品准备及处理 | 第22-23页 |
2.2.2 总RNA的提取 | 第23页 |
2.2.3 逆转录 | 第23-24页 |
2.2.4 半定量及定量PCR | 第24-25页 |
2.2.5 基因组DNA的提取 | 第25-26页 |
2.2.6 基因组DNA甲基化 | 第26-27页 |
2.2.7 甲基化PCR及产物回收 | 第27-28页 |
2.2.8 连接、转化及阳性克隆的筛选 | 第28-29页 |
2.2.9 结果统计及分析 | 第29-30页 |
第3章 斑马鱼Nrf2/ARE信号通路相关基因表达谱的分析 | 第30-37页 |
3.1 引言 | 第30-31页 |
3.2 H_2O_2和DEM处理下Nrf2/ARE信号通路相关基因的表达 | 第31-32页 |
3.3 H_2O_2和DEM处理下结合因子small maf基因家族的表达 | 第32-33页 |
3.4 H_2O_2和DEM处理下抗氧化靶基因的表达 | 第33-34页 |
3.5 H_2O_2和DEM处理下甲基转移酶的表达谱研究 | 第34-35页 |
3.6 讨论 | 第35-36页 |
3.7 本章小结 | 第36-37页 |
第4章 Nrf2/ARE信号通路基因启动子区域CpG岛预测及甲基化分析 | 第37-51页 |
4.1 引言 | 第37-38页 |
4.2 负调控因子keap1甲基化的分析 | 第38-39页 |
4.2.1 keap1b甲基化的分析 | 第38-39页 |
4.3 转录因子nrf2甲基化的分析 | 第39-42页 |
4.3.1 nrf2a甲基化的分析 | 第39-40页 |
4.3.2 nrf2b甲基化的分析 | 第40-42页 |
4.4 结合因子small maf基因家族甲基化的分析 | 第42-48页 |
4.4.1 mafg2甲基化的分析 | 第42-44页 |
4.4.2 mafk甲基化的分析 | 第44-45页 |
4.4.3 maft甲基化的分析 | 第45-46页 |
4.4.4 不同时期maft的表达 | 第46-47页 |
4.4.5 maft在 8 hpf时期不同处理下的表达 | 第47页 |
4.4.6 maft在 8 hpf时期甲基化的分析 | 第47-48页 |
4.5 讨论 | 第48-50页 |
4.6 本章小结 | 第50-51页 |
结论 | 第51-52页 |
展望 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-63页 |
附录一 | 第63-66页 |
攻读硕士学位期间发表的论文及其他成果 | 第66-68页 |
致谢 | 第68页 |