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白木香倍半萜诱导子的筛选与萜类合成酶基因的克隆表达分析

中文摘要第7-9页
Abstract第9-10页
第一章 前言第11-26页
    1.1 白木香结香机制及人工造香方法研究第12-14页
        1.1.1 沉香形成机制第12-13页
        1.1.2 人工造香方法研究进展第13-14页
    1.2 植物内生真菌研究第14-17页
        1.2.1 植物内生真菌及多样性第14-15页
        1.2.2 植物内生真菌潜在应用价值第15-16页
        1.2.3 白木香内生真菌的研究第16-17页
    1.3 白木香离体模型的建立第17页
    1.4 沉香化学成分研究第17-20页
        1.4.1 倍半萜类化合物第17-18页
        1.4.2 色酮类化合物第18-19页
        1.4.3 芳香族类化合物第19-20页
    1.5 沉香质量评价研究第20-21页
    1.6 倍半萜类物质生物合成研究第21-24页
        1.6.1 植物萜类合成途径第21-23页
        1.6.2 沉香倍半萜类物质基因表达与代谢调控第23-24页
    1.7 研究技术路线及意义第24-26页
        1.7.1 技术路线第24页
        1.7.2 研究目的及意义第24-26页
第二章 白木香倍半萜诱导子筛选与萜类合成酶基因表达水平分析第26-41页
    2.1 材料和仪器第26-28页
        2.1.1 样品及样品采集第26-27页
        2.1.2 试剂第27页
        2.1.3 仪器第27页
        2.1.4 引物第27-28页
    2.2 方法第28-33页
        2.2.1 菌种活化及发酵第28页
        2.2.2 白木香诱导子的筛选第28-31页
        2.2.3 白木香萜类合成酶基因HMGR和DXS的表达水平研究第31-33页
    2.3 结果与分析第33-39页
        2.3.1 白木香离体枝条GC-MS检测结果第33-37页
        2.3.2 不同诱导子诱导后白木香HMGR、DXS基因的表达水平第37-39页
    2.4 讨论第39-41页
第三章 白木香萜类合成酶基因HMGR的克隆第41-51页
    3.1 材料和仪器第41-42页
        3.1.1 样品及样品采集第41页
        3.1.2 耗材试剂第41-42页
        3.1.3 仪器第42页
    3.2 方法第42-45页
        3.2.1 沉香样品总RNA的提取与cDNA的合成第42页
        3.2.2 HMGR基因的扩增与纯化第42-43页
        3.2.3 HMGR基因的克隆第43-45页
    3.3 结果与分析第45-50页
        3.3.1 RNA的纯度与完整性检测第45页
        3.3.2 白木香HMGR基因扩增与菌液PCR验证第45-46页
        3.3.3 白木香HMGR基因生物信息学分析第46-50页
    3.4 讨论第50-51页
第四章 白木香萜类合成酶基因HMGR的表达与纯化第51-62页
    4.1 材料和仪器第51-53页
        4.1.1 试剂第51-52页
        4.1.2 仪器第52页
        4.1.3 主要溶液的配置第52-53页
    4.2 方法第53-58页
        4.2.1 HMGR表达载体的构建第53-55页
        4.2.2 HMGR蛋白的表达第55-56页
        4.2.3 HMGR蛋白的纯化第56页
        4.2.4 HMGR的Western-blot鉴定第56-57页
        4.2.5 HMGR蛋白包涵体的复性第57页
        4.2.6 蛋白浓度测定第57-58页
    4.3 结果与分析第58-61页
        4.3.1 HMGR重组表达构建第58-59页
        4.3.2 HMGR蛋白表达第59页
        4.3.3 HMGR蛋白纯化与Western-blot鉴定第59-60页
        4.3.4 HMGR蛋白浓度第60-61页
    4.4 讨论第61-62页
第五章 HMGR蛋白的酶学性质分析第62-68页
    5.1 试剂和仪器第62-63页
        5.1.1 试剂第62页
        5.1.2 仪器第62-63页
    5.2 方法第63-64页
        5.2.1 酶促反应体系第63页
        5.2.2 最佳酶促反应时间的测定第63页
        5.2.3 最佳酶促反应温度的测定第63页
        5.2.4 最佳酶促反应pH的测定第63页
        5.2.5 最佳酶促反应底物浓度的测定第63-64页
        5.2.6 酶活性计算方法第64页
    5.3 结果与分析第64-67页
        5.3.1 最佳酶促反应时间第64-65页
        5.3.2 最佳酶促反应温度第65-66页
        5.3.3 最佳酶促反应pH第66页
        5.3.4 最佳酶促反应底物浓度第66-67页
    5.4 讨论第67-68页
第六章 总结与展望第68-70页
    6.1 总结第68-69页
    6.2 展望第69-70页
参考文献第70-81页
硕士期间发表(或待发表)论文第81-82页
致谢第82页

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