中文摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
第一章 前言 | 第11-26页 |
1.1 白木香结香机制及人工造香方法研究 | 第12-14页 |
1.1.1 沉香形成机制 | 第12-13页 |
1.1.2 人工造香方法研究进展 | 第13-14页 |
1.2 植物内生真菌研究 | 第14-17页 |
1.2.1 植物内生真菌及多样性 | 第14-15页 |
1.2.2 植物内生真菌潜在应用价值 | 第15-16页 |
1.2.3 白木香内生真菌的研究 | 第16-17页 |
1.3 白木香离体模型的建立 | 第17页 |
1.4 沉香化学成分研究 | 第17-20页 |
1.4.1 倍半萜类化合物 | 第17-18页 |
1.4.2 色酮类化合物 | 第18-19页 |
1.4.3 芳香族类化合物 | 第19-20页 |
1.5 沉香质量评价研究 | 第20-21页 |
1.6 倍半萜类物质生物合成研究 | 第21-24页 |
1.6.1 植物萜类合成途径 | 第21-23页 |
1.6.2 沉香倍半萜类物质基因表达与代谢调控 | 第23-24页 |
1.7 研究技术路线及意义 | 第24-26页 |
1.7.1 技术路线 | 第24页 |
1.7.2 研究目的及意义 | 第24-26页 |
第二章 白木香倍半萜诱导子筛选与萜类合成酶基因表达水平分析 | 第26-41页 |
2.1 材料和仪器 | 第26-28页 |
2.1.1 样品及样品采集 | 第26-27页 |
2.1.2 试剂 | 第27页 |
2.1.3 仪器 | 第27页 |
2.1.4 引物 | 第27-28页 |
2.2 方法 | 第28-33页 |
2.2.1 菌种活化及发酵 | 第28页 |
2.2.2 白木香诱导子的筛选 | 第28-31页 |
2.2.3 白木香萜类合成酶基因HMGR和DXS的表达水平研究 | 第31-33页 |
2.3 结果与分析 | 第33-39页 |
2.3.1 白木香离体枝条GC-MS检测结果 | 第33-37页 |
2.3.2 不同诱导子诱导后白木香HMGR、DXS基因的表达水平 | 第37-39页 |
2.4 讨论 | 第39-41页 |
第三章 白木香萜类合成酶基因HMGR的克隆 | 第41-51页 |
3.1 材料和仪器 | 第41-42页 |
3.1.1 样品及样品采集 | 第41页 |
3.1.2 耗材试剂 | 第41-42页 |
3.1.3 仪器 | 第42页 |
3.2 方法 | 第42-45页 |
3.2.1 沉香样品总RNA的提取与cDNA的合成 | 第42页 |
3.2.2 HMGR基因的扩增与纯化 | 第42-43页 |
3.2.3 HMGR基因的克隆 | 第43-45页 |
3.3 结果与分析 | 第45-50页 |
3.3.1 RNA的纯度与完整性检测 | 第45页 |
3.3.2 白木香HMGR基因扩增与菌液PCR验证 | 第45-46页 |
3.3.3 白木香HMGR基因生物信息学分析 | 第46-50页 |
3.4 讨论 | 第50-51页 |
第四章 白木香萜类合成酶基因HMGR的表达与纯化 | 第51-62页 |
4.1 材料和仪器 | 第51-53页 |
4.1.1 试剂 | 第51-52页 |
4.1.2 仪器 | 第52页 |
4.1.3 主要溶液的配置 | 第52-53页 |
4.2 方法 | 第53-58页 |
4.2.1 HMGR表达载体的构建 | 第53-55页 |
4.2.2 HMGR蛋白的表达 | 第55-56页 |
4.2.3 HMGR蛋白的纯化 | 第56页 |
4.2.4 HMGR的Western-blot鉴定 | 第56-57页 |
4.2.5 HMGR蛋白包涵体的复性 | 第57页 |
4.2.6 蛋白浓度测定 | 第57-58页 |
4.3 结果与分析 | 第58-61页 |
4.3.1 HMGR重组表达构建 | 第58-59页 |
4.3.2 HMGR蛋白表达 | 第59页 |
4.3.3 HMGR蛋白纯化与Western-blot鉴定 | 第59-60页 |
4.3.4 HMGR蛋白浓度 | 第60-61页 |
4.4 讨论 | 第61-62页 |
第五章 HMGR蛋白的酶学性质分析 | 第62-68页 |
5.1 试剂和仪器 | 第62-63页 |
5.1.1 试剂 | 第62页 |
5.1.2 仪器 | 第62-63页 |
5.2 方法 | 第63-64页 |
5.2.1 酶促反应体系 | 第63页 |
5.2.2 最佳酶促反应时间的测定 | 第63页 |
5.2.3 最佳酶促反应温度的测定 | 第63页 |
5.2.4 最佳酶促反应pH的测定 | 第63页 |
5.2.5 最佳酶促反应底物浓度的测定 | 第63-64页 |
5.2.6 酶活性计算方法 | 第64页 |
5.3 结果与分析 | 第64-67页 |
5.3.1 最佳酶促反应时间 | 第64-65页 |
5.3.2 最佳酶促反应温度 | 第65-66页 |
5.3.3 最佳酶促反应pH | 第66页 |
5.3.4 最佳酶促反应底物浓度 | 第66-67页 |
5.4 讨论 | 第67-68页 |
第六章 总结与展望 | 第68-70页 |
6.1 总结 | 第68-69页 |
6.2 展望 | 第69-70页 |
参考文献 | 第70-81页 |
硕士期间发表(或待发表)论文 | 第81-82页 |
致谢 | 第82页 |