摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6页 |
缩略语表 | 第7-11页 |
第一章 绪论 | 第11-22页 |
1.1. 研究背景 | 第11页 |
1.2. 癌症与免疫逃逸 | 第11-14页 |
1.2.1. 免疫逃逸与瘤形成共同进化 | 第11-13页 |
1.2.2. 免疫逃逸是癌症发展的调节器 | 第13-14页 |
1.3. IDO与免疫耐受 | 第14-16页 |
1.4. T细胞与免疫 | 第16-18页 |
1.5. 肺积方治疗作用的研究基础 | 第18-20页 |
1.6. 研究目标、内容、创新点和意义 | 第20-22页 |
第二章 实验材料与方法 | 第22-31页 |
2.1. 实验材料 | 第22-23页 |
2.1.1. 细胞株及质粒 | 第22页 |
2.1.2. 实验试剂 | 第22-23页 |
2.2 仪器与设备 | 第23-24页 |
2.3 常用试剂配制 | 第24-26页 |
2.4 实验方法 | 第26-31页 |
2.4.1 灭菌 | 第26页 |
2.4.2 细胞的换液和传代 | 第26-27页 |
2.4.3 细胞的复苏 | 第27页 |
2.4.4 细胞的冻存 | 第27页 |
2.4.5 细胞总蛋白的提取 | 第27-28页 |
2.4.6 蛋白定量及变性 | 第28页 |
2.4.7 Western blot | 第28-29页 |
2.4.8 细胞总RNA的提取——Trizol法 | 第29-31页 |
第三章 表达IDO基因的小鼠Lewis肺癌细胞的构建研究 | 第31-36页 |
3.1. 引言 | 第31页 |
3.2. 材料与方法 | 第31-33页 |
3.2.1. 建立表达pEGFP-IDO的3LL-luc细胞株 | 第31页 |
3.2.2. 3LL-luc-IDO稳株的IDO基因水平表达的观察 | 第31-33页 |
3.2.3. 3LL-luc-IDO稳株的IDO蛋白水平表达的观察 | 第33页 |
3.3. 实验结果 | 第33-34页 |
3.3.1.3 LL-luc-IDO稳株的IDO基因水平表达 | 第33-34页 |
3.3.2.3 LL-luc-IDO稳株的IDO蛋白水平表达 | 第34页 |
3.4. 讨论 | 第34-36页 |
第四章 肺积方和黄芪甲苷对Lewis肺癌小鼠肿瘤生长的作用研究 | 第36-44页 |
4.1. 引言 | 第36页 |
4.2. 实验材料 | 第36-37页 |
4.2.1. 肺积方含药血清的制备 | 第36页 |
4.2.2. 实验动物 | 第36页 |
4.2.3. 药品和试剂 | 第36-37页 |
4.2.4. 试剂配制 | 第37页 |
4.3. 实验方法 | 第37-39页 |
4.3.1. 肺积方血清对肿瘤细胞增殖抑制的研究 | 第37-38页 |
4.3.2. Lewis肺癌小鼠移植瘤模型的建立 | 第38页 |
4.3.3. 肺积方和黄庚甲苷对小鼠肿瘤生长的作用研究 | 第38-39页 |
4.3.4. 统计分析 | 第39页 |
4.4. 实验结果 | 第39-42页 |
4.4.1. 肺积方对小鼠Lewis肺癌细胞株的增殖抑制作用 | 第39-40页 |
4.4.2. 小鼠肺癌原位模型的建立 | 第40页 |
4.4.3. 肺积方和黄芪甲苷对肿瘤生长的作用 | 第40-41页 |
4.4.4. 肺积方和黄芪甲苷对肺癌小鼠生存期的影响 | 第41-42页 |
4.5. 讨论 | 第42-44页 |
第五章 肺积方和黄芪甲苷干预IDO介导的免疫逃逸的研究 | 第44-53页 |
5.1. 引言 | 第44页 |
5.2. 材料和方法 | 第44-46页 |
5.2.1. 主要试剂 | 第44-45页 |
5.2.2. 小鼠脾脏T淋巴细胞的提取 | 第45页 |
5.2.3. T细胞与肿瘤细胞共培养 | 第45页 |
5.2.4.流式细胞术检测T淋巴细胞CD4、CD25、CD8、CD28表达 | 第45页 |
5.2.5. 流式细胞术检测T淋巴细胞Foxp3表达 | 第45页 |
5.2.6. 统计分析 | 第45-46页 |
5.3. 实验结果 | 第46-52页 |
5.3.1. 肺积方和黄芪甲苷对肺癌小鼠Treg细胞的调节作用研究 | 第46-48页 |
5.3.2. 肺积方和黄芪甲苷对肺癌小鼠CTL细胞的调节作用研究 | 第48-50页 |
5.3.3. 黄芪甲苷在体外对Treg细胞调控作用研究 | 第50-52页 |
5.4. 讨论 | 第52-53页 |
第六章 肺积方和黄芪甲苷干预IDO表达的研究 | 第53-59页 |
6.1. 引言 | 第53页 |
6.2. 材料与方法 | 第53-54页 |
6.2.1. 荷瘤小鼠肺癌组织总RNA的提取 | 第53页 |
6.2.2. IDO mRNA表达的研究 | 第53-54页 |
6.2.3. IDO蛋白表达的研究 | 第54页 |
6.2.4. 统计学分析 | 第54页 |
6.3. 实验结果 | 第54-57页 |
6.3.1. 肺积方和黄芪甲苷对荷瘤小鼠肿瘤组织IDO mRNA表达的影响 | 第54-56页 |
6.3.2. 肺积方和黄芪甲苷对荷瘤小鼠肿瘤组织IDO蛋白表达的影响 | 第56页 |
6.3.3. 黄芪甲苷体外对IDO表达的影响研究 | 第56-57页 |
6.4. 讨论 | 第57-59页 |
第七章 结论 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-68页 |
致谢 | 第68-69页 |
在读期间发表论文情况 | 第69页 |