摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第一章 绪论 | 第14-21页 |
1.1 前言 | 第14-17页 |
1.2 研究目的、方法、实验方案和意义 | 第17-21页 |
1.2.1 研究目的 | 第17-18页 |
1.2.2 研究主要内容和方法 | 第18-19页 |
1.2.3 实验方案和路径 | 第19-20页 |
1.2.4 研究意义 | 第20-21页 |
第二章 蛋白印迹法验证转染效率,FANCM和USP1基因沉默对DDP诱导SK-MES-1 细胞凋亡率的影响 | 第21-34页 |
2.1 实验对象与实验器材 | 第21-24页 |
2.1.1 细胞株 | 第21页 |
2.1.2 主要仪器 | 第21-22页 |
2.1.3 常用试剂 | 第22-23页 |
2.1.4 常用试剂制备方法 | 第23-24页 |
2.2 实验方法与技术 | 第24-30页 |
2.2.1 细胞复苏、培养、传代、计数 | 第24-25页 |
2.2.2 蛋白印迹法检测SK-MES-1 细胞株FANCM和USP1沉默后蛋白的表达 | 第25-28页 |
2.2.3 Annexin V/PI流式细胞术分别检测SK-MES-1 细胞株FANCM和USP1基因沉默,及两个基因共沉默后的细胞凋亡率 | 第28-29页 |
2.2.4 统计学分析 | 第29-30页 |
2.3 实验数据与结果 | 第30-33页 |
2.3.1 沉默FANCM和USP1基因后SK-MES-1 细胞FANCM和USP1蛋白表达 | 第30-31页 |
2.3.2 沉默FANCM和USP1基因及两个基因共沉默后SK-MES-1 细胞早期凋亡率的变化 | 第31-33页 |
2.4 数据与结果分析 | 第33-34页 |
第三章 FANCM和USP1基因沉默对DDP诱导的SK-MES-1 细胞生存率的影响 | 第34-41页 |
3.1 实验对象与实验材料 | 第34-35页 |
3.1.1 细胞株 | 第34页 |
3.1.2 主要仪器 | 第34页 |
3.1.3 常用试剂 | 第34-35页 |
3.2 实验方法与技术 | 第35-37页 |
3.2.1 处理实验细胞 | 第35-36页 |
3.2.2 CCK-8 法测定SK-MES-1 细胞FANCM和USP1基因沉默,及两个基因共沉默后的细胞生存率 | 第36页 |
3.2.3 统计学分析 | 第36-37页 |
3.3 实验数据与结果 | 第37-40页 |
3.3.1 分别沉默FANCM和USP1基因及两个基因共沉默前后顺铂抑制SK-MES-1 细胞生存率的变化 | 第37-39页 |
3.3.2 分别沉默FANCM和USP1基因及两个基因共沉默后SK-MES-1 细胞株半数抑制浓度的变化 | 第39-40页 |
3.4 数据与结果分析 | 第40-41页 |
第四章 FANCM和USP1基因沉默对DDP诱导SK-MES-1 细胞FANCD2单泛素化和核聚小体表达的影响 | 第41-52页 |
4.1 实验对象与实验材料 | 第41-42页 |
4.1.1 细胞株 | 第41页 |
4.1.2 主要仪器 | 第41页 |
4.1.3 常用试剂 | 第41-42页 |
4.1.4 常用试剂制备方法 | 第42页 |
4.2 实验方法与技术 | 第42-47页 |
4.2.1 蛋白质印记法检测SK-MES-1 细胞株FANCM和USP1基因沉默,及两个基因共沉默后FANCD2蛋白表达和单泛素化水平 | 第42-45页 |
4.2.2 免疫荧光法观察SK-MES-1 细胞株FANCM和USP1基因沉默,及两个基因共沉默后核聚小体的表达 | 第45-47页 |
4.3 实验数据与结果 | 第47-50页 |
4.3.1 沉默FANCM和USP1基因及两个基因共沉默后SK-MES-1 细胞FANCD2蛋白表达和单泛素化水平 | 第47-50页 |
4.3.2 沉默FANCM和USP1基因及两个基因共沉默后SK-MES-1 细胞核聚小体的表达变化 | 第50页 |
4.4 数据与结果分析 | 第50-52页 |
讨论 | 第52-58页 |
结论与展望 | 第58-60页 |
参考文献 | 第60-66页 |
泛素化/去泛素化与肿瘤发生发展的研究进展(综述) | 第66-74页 |
参考文献 | 第70-74页 |
致谢 | 第74-75页 |
攻读硕士期间发表的论文 | 第75页 |