| 摘要 | 第6-7页 |
| Absract | 第7页 |
| 1. 绪论 | 第11-19页 |
| 1.1 邻苯二甲酸二甲酯的性质及应用 | 第11页 |
| 1.2 环境中的邻苯二甲酸二甲酯 | 第11-12页 |
| 1.2.1 大气环境中 | 第11-12页 |
| 1.2.2 土壤环境中 | 第12页 |
| 1.2.3 水体环境中 | 第12页 |
| 1.3 邻苯二甲酸二甲酯的危害 | 第12-13页 |
| 1.4 PAEs的检测方法 | 第13-16页 |
| 1.4.1 色谱法(Chromatography) | 第13-15页 |
| 1.4.2 免疫分析法(IA) | 第15-16页 |
| 1.4.3 生物素-亲和素放大酶联免疫分析(BA-ELISA) | 第16页 |
| 1.5 小分子的酶联免疫分析技术(ELISA) | 第16-18页 |
| 1.5.1 人工抗原制备 | 第16-17页 |
| 1.5.2 单克隆抗体制备 | 第17-18页 |
| 1.6 研究目的及意义 | 第18-19页 |
| 2. 材料与方法 | 第19-32页 |
| 2.1 材料、试剂与仪器 | 第19-22页 |
| 2.1.1 材料 | 第19页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第19页 |
| 2.1.3 主要溶液 | 第19-22页 |
| 2.1.4 主要实验仪器 | 第22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-32页 |
| 2.2.1 人工抗原合成 | 第22-23页 |
| 2.2.2 人工抗原纯化 | 第23页 |
| 2.2.3 人工抗原蛋白含量测定 | 第23-24页 |
| 2.2.4 人工抗原结构鉴定 | 第24页 |
| 2.2.5 Balb/c小鼠的免疫 | 第24页 |
| 2.2.6 ELISA方阵滴定 | 第24-25页 |
| 2.2.7 抗血清效价测定 | 第25页 |
| 2.2.8 抗血清灵敏度测定 | 第25-26页 |
| 2.2.9 单克隆抗体制备 | 第26-29页 |
| 2.2.10 杂交瘤细胞染色体分析 | 第29页 |
| 2.2.11 单克隆抗体亚型分析 | 第29-30页 |
| 2.2.12 单克隆抗体纯化 | 第30页 |
| 2.2.13 优化ELISA检测条件 | 第30-32页 |
| 3. 结果与分析 | 第32-45页 |
| 3.1 人工抗原鉴定 | 第32-34页 |
| 3.1.1 UV扫谱鉴定 | 第32-33页 |
| 3.1.2 SDS-PAGE鉴定 | 第33-34页 |
| 3.2 人工抗原含量测定 | 第34页 |
| 3.3 ELISA法方阵滴定 | 第34-35页 |
| 3.4 测定抗血清效价 | 第35-36页 |
| 3.5 抗血清灵敏度测定 | 第36页 |
| 3.6 细胞融合实验 | 第36-37页 |
| 3.7 杂交瘤细胞克隆化 | 第37-38页 |
| 3.8 杂交瘤细胞株扩大培养 | 第38页 |
| 3.9 杂交瘤染色体分析 | 第38-39页 |
| 3.10 单克隆抗体亚型分析 | 第39页 |
| 3.11 单克隆抗体的纯化 | 第39-40页 |
| 3.12 人工抗原包被的间接竞争ELISA标准曲线的建立 | 第40-45页 |
| 3.12.1 间接竞争ELISA条件优化 | 第40-43页 |
| 3.12.2 建立人工抗原包被的间接竞争ELISA标准曲线 | 第43-45页 |
| 4. 讨论 | 第45-49页 |
| 4.1 邻苯二甲酸二甲酯人工抗原的合成 | 第45页 |
| 4.2 免疫方案的确定 | 第45-46页 |
| 4.3 单克隆抗体制备 | 第46-48页 |
| 4.3.1 细胞融合 | 第46页 |
| 4.3.2 杂交瘤细胞的培养 | 第46-47页 |
| 4.3.3 杂交瘤细胞的筛选 | 第47页 |
| 4.3.4 杂交瘤细胞克隆化 | 第47页 |
| 4.3.5 杂交瘤细胞冻存与复苏 | 第47页 |
| 4.3.6 单克隆抗体纯化 | 第47-48页 |
| 4.4 反应条件对人工抗原包被间接竞争ELISA的影响 | 第48页 |
| 4.5 间接ELISA检测注意事项 | 第48-49页 |
| 5. 结论与展望 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-55页 |
| 附录1 主要英文缩写词 | 第55-56页 |
| 附录2 攻读学位期间论文发表情况 | 第56-57页 |
| 致谢 | 第57页 |
