| 摘要 | 第8-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 第一章 绪论 | 第14-42页 |
| 1.1 阳离子聚合物基因载体简介 | 第14-16页 |
| 1.2 影响阳离子聚合物基因载体的转染效率的因素 | 第16-26页 |
| 1.2.1 阳离子聚合物与DNA的结合能力 | 第16-18页 |
| 1.2.2 Polyplex的稳定性 | 第18页 |
| 1.2.3 Polyplex的粒径和zeta-电势 | 第18-20页 |
| 1.2.4 细胞毒性 | 第20-21页 |
| 1.2.5 细胞内吞通路 | 第21-24页 |
| 1.2.6 细胞内转运途径 | 第24-26页 |
| 1.2.7 其他因素 | 第26页 |
| 1.3 阳离子聚合物基因载体的设计策略 | 第26-29页 |
| 1.3.1 降低细胞毒性 | 第26-27页 |
| 1.3.2 提高稳定性 | 第27页 |
| 1.3.3 提高利用率 | 第27-28页 |
| 1.3.4 提高细胞内转运能力 | 第28页 |
| 1.3.5 阳离子聚合物自由链 | 第28-29页 |
| 1.3.6 其他 | 第29页 |
| 1.4 课题的提出 | 第29-31页 |
| 参考文献 | 第31-42页 |
| 第二章 O-未甲基化N,N,N-三甲基壳聚糖作为基因载体：阳离子聚合物链长度和转染率之间关系的研究 | 第42-76页 |
| 2.1 引言 | 第42-43页 |
| 2.2 实验部分 | 第43-48页 |
| 2.2.1 材料和试剂 | 第43-44页 |
| 2.2.2 O-未甲基化TMC的合成和表征 | 第44-45页 |
| 2.2.3 Polyplex的制备 | 第45页 |
| 2.2.4 凝胶电泳迁移实验 | 第45页 |
| 2.2.5 粒径和zeta-电势的测定 | 第45页 |
| 2.2.6 细胞培养 | 第45-46页 |
| 2.2.7 荧光素酶的表达 | 第46页 |
| 2.2.8 绿色荧光蛋白的表达 | 第46-47页 |
| 2.2.9 细胞毒性的测定 | 第47页 |
| 2.2.10 细胞内吞率的测定 | 第47页 |
| 2.2.11 在不同抑制剂存在时的转染率 | 第47-48页 |
| 2.2.12 Polyplex与细胞器的共定位 | 第48页 |
| 2.2.13 缓冲pH的能力 | 第48页 |
| 2.2.14 数据分析 | 第48页 |
| 2.3 结果 | 第48-66页 |
| 2.3.1 O-未甲基化TMCs的合成与表征 | 第48-50页 |
| 2.3.2 Polyplex的表征 | 第50-53页 |
| 2.3.3 细胞毒性和转染效率 | 第53-58页 |
| 2.3.4 Polyplex的稳定性对转染率的影响 | 第58-59页 |
| 2.3.5 阳离子聚合物的自由链对转染效率的影响 | 第59-60页 |
| 2.3.6 复合物的细胞内吞率对转染率的影响 | 第60-62页 |
| 2.3.7 TMC polylex的细胞内吞通路和细胞内转运的探讨 | 第62-66页 |
| 2.4 讨论 | 第66-70页 |
| 2.4.1 阳离子聚合物链长度与转染率之间的结构/功能关系 | 第66页 |
| 2.4.2 影响上述结构/功能关系的因素 | 第66-70页 |
| 2.5 本章小结 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-76页 |
| 第三章 PEI及其衍生物作为基因载体：对介导最优N/P比的探讨 | 第76-100页 |
| 3.1 引言 | 第76-77页 |
| 3.2 实验部分 | 第77-83页 |
| 3.2.1 材料和试剂 | 第77页 |
| 3.2.2 甲基化PEI和季胺化PEI的合成与表征 | 第77-78页 |
| 3.2.3 乙酰化PEI的合成与表征 | 第78页 |
| 3.2.4 氨基酸改性的PEI的合成与表征 | 第78-81页 |
| 3.2.5 胍基改性的PEI的合成与表征 | 第81页 |
| 3.2.6 PEG化PEI的合成与表征 | 第81页 |
| 3.2.7 咪唑基团改性的PEI的合成与表征 | 第81页 |
| 3.2.8 Polyplex的制备 | 第81-82页 |
| 3.2.9 凝胶电泳迁移实验 | 第82页 |
| 3.2.10 细胞培养 | 第82页 |
| 3.2.11 报告基因的表达 | 第82页 |
| 3.2.12 粒径和zeta-电势 | 第82-83页 |
| 3.2.13 细胞毒性的测定 | 第83页 |
| 3.3 结果 | 第83-93页 |
| 3.3.1 有血清和无血清条件下最优N/P比的确定 | 第83-84页 |
| 3.3.2 影响最优N/P比的其它因素 | 第84-86页 |
| 3.3.3 PEI及其衍生物与DNA的结合能力 | 第86-87页 |
| 3.3.4 最优N/P比时的转染率 | 第87-89页 |
| 3.3.5 最优N/P比时的粒径和zeta-电势 | 第89-92页 |
| 3.3.6 最优N/P比时的细胞毒性 | 第92-93页 |
| 3.4 讨论 | 第93-95页 |
| 3.5 本章小结 | 第95-96页 |
| 参考文献 | 第96-100页 |
| 第四章 N,N,N-三甲基壳聚糖/pDNA复合物及PEI自由链联合用于基因转染：对自由链功能的探讨 | 第100-120页 |
| 4.1 引言 | 第100-101页 |
| 4.2 实验部分 | 第101-104页 |
| 4.2.1 材料和试剂 | 第101页 |
| 4.2.2 O-未甲基化N,N,N-三甲基壳聚糖的合成与表征 | 第101页 |
| 4.2.3 制备FITC标记的PEI | 第101页 |
| 4.2.4 Polyplex的制备 | 第101-102页 |
| 4.2.5 荧光淬灭实验 | 第102页 |
| 4.2.6 Polyplex的稳定性 | 第102页 |
| 4.2.7 细胞培养 | 第102页 |
| 4.2.8 荧光素酶的表达 | 第102-103页 |
| 4.2.9 细胞内吞率 | 第103页 |
| 4.2.10 荧光素酶在细胞抑制剂存在时的表达 | 第103页 |
| 4.2.11 PEI自由链与polyplex的共定位 | 第103-104页 |
| 4.2.12 Polyplex与细胞器的共定位 | 第104页 |
| 4.3 结果 | 第104-114页 |
| 4.3.1 TMC-P/PEI-F的稳定性 | 第104-107页 |
| 4.3.2 TMC-P/PEI-F的基因表达 | 第107-110页 |
| 4.3.3 细胞内吞率 | 第110-111页 |
| 4.3.4 在细胞内吞通路和胞内转运抑制剂存在时的基因表达 | 第111-112页 |
| 4.3.5 Polyplex在细胞内的定位 | 第112-114页 |
| 4.4 讨论 | 第114-115页 |
| 4.5 本章小结 | 第115-117页 |
| 参考文献 | 第117-120页 |
| 第五章 全文总结 | 第120-121页 |
| 缩略词 | 第121-123页 |
| 博士期间论文发表情况 | 第123-124页 |
| 后记 | 第124-129页 |
| 致谢 | 第129-130页 |
