中文摘要 | 第4-5页 |
abstract | 第5-6页 |
第一章 绪论 | 第10-25页 |
1.1 齐墩果酸(Oleanolic acid)简介 | 第10-13页 |
1.1.1 生物来源 | 第10页 |
1.1.2 基本结构和性质 | 第10页 |
1.1.3 生物学活性 | 第10-13页 |
1.2 线虫(Caenorkabditis elegans)简介 | 第13-18页 |
1.2.1 自然史 | 第13页 |
1.2.2 生命周期 | 第13-14页 |
1.2.3 线虫作为模式生物的优势 | 第14-15页 |
1.2.4 线虫与衰老的相关调节 | 第15-18页 |
1.3 DAF-16 | 第18-23页 |
1.3.1 DAF-16/FOXO的上游信号通路 | 第19-21页 |
1.3.2 DAF-16 的活性调节 | 第21-22页 |
1.3.3 DAF-16 对不同信号的应答 | 第22-23页 |
1.3.4 DAF-16 的下游基因 | 第23页 |
1.4 目的、意义及试验方案 | 第23-25页 |
第二章 秀丽隐杆线虫的一般培养 | 第25-33页 |
2.1 实验材料、试剂和仪器 | 第25-26页 |
2.1.1 线虫、菌株 | 第25页 |
2.1.2 实验试剂 | 第25-26页 |
2.1.3 实验仪器 | 第26页 |
2.2 培养基及所用缓冲液配方 | 第26-29页 |
2.2.1 线虫生长固体培养基(Nematode Growth Medium,NGM) | 第26-27页 |
2.2.2 线虫生长液体培养基(S-Medium) | 第27-28页 |
2.2.3 LB液体培养基 | 第28页 |
2.2.4 LB固体培养基 | 第28页 |
2.2.5 缓冲液 | 第28-29页 |
2.3 秀丽隐杆线虫的一般培养方法 | 第29-32页 |
2.3.1 E.coli OP50的培养和接种 | 第29页 |
2.3.2 线虫的转移方法 | 第29-30页 |
2.3.3 线虫的传代培养 | 第30页 |
2.3.4 线虫的同期化 | 第30-31页 |
2.3.5 线虫的冻存与复苏 | 第31页 |
2.3.6 线虫培养过程中的杂菌去除方法 | 第31-32页 |
2.4 小结 | 第32-33页 |
第三章 齐墩果酸对秀丽隐杆线虫寿命的延长作用 | 第33-46页 |
3.1 实验材料、试剂和仪器 | 第33页 |
3.1.1 线虫、菌株 | 第33页 |
3.1.2 实验试剂 | 第33页 |
3.1.3 实验仪器 | 第33页 |
3.2 实验方法 | 第33-38页 |
3.2.1 齐墩果酸贮液的配制和保存 | 第33页 |
3.2.2 线虫食物E.coli OP50的灭活 | 第33-34页 |
3.2.3 给药组线虫培养基(NGM)的配制 | 第34页 |
3.2.4 给药组E.coli OP50菌液的配制 | 第34页 |
3.2.5 线虫寿命实验 | 第34-35页 |
3.2.6 线虫压力应激实验 | 第35-36页 |
3.2.7 线虫体内活性氧簇(ROS)检测 | 第36-37页 |
3.2.8 线虫生殖能力检测 | 第37页 |
3.2.9 线虫咽泵实验 | 第37页 |
3.2.10 统计学方法 | 第37-38页 |
3.3 实验结果 | 第38-45页 |
3.3.1 线虫寿命实验结果 | 第38-40页 |
3.3.2 线虫压力应激实验结果 | 第40-42页 |
3.3.3 线虫体内ROS检测实验结果 | 第42-43页 |
3.3.4 线虫产卵实验结果 | 第43页 |
3.3.5 线虫限食途径实验结果 | 第43-45页 |
3.4 小结 | 第45-46页 |
第四章 齐墩果酸对线虫延寿作用的分子机制研究 | 第46-55页 |
4.1 实验材料、试剂和仪器 | 第46页 |
4.1.1 线虫、菌株 | 第46页 |
4.1.2 实验试剂 | 第46页 |
4.1.3 实验仪器 | 第46页 |
4.2 实验方法 | 第46-50页 |
4.2.1 daf-16 (mgDf50)突变株寿命实验 | 第46-47页 |
4.2.2 DAF-16 的亚细胞定位实验 | 第47-48页 |
4.2.3 实时定量RT-PCR实验 | 第48-49页 |
4.2.4 统计学方法 | 第49-50页 |
4.3 实验结果 | 第50-54页 |
4.3.1 daf-16 (mgDf50)突变株寿命实验结果 | 第50-51页 |
4.3.2 DAF-16 的亚细胞定位实验结果 | 第51-53页 |
4.3.3 齐墩果酸对DAF-16 下游基因的影响 | 第53-54页 |
4.4 小结 | 第54-55页 |
第五章 讨论与展望 | 第55-59页 |
5.1 讨论与结论 | 第55-58页 |
5.1.1 讨论 | 第55-58页 |
5.1.2 结论 | 第58页 |
5.2 展望 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-68页 |
发表论文和科研情况说明 | 第68-69页 |
致谢 | 第69-70页 |