| 摘要 | 第2-3页 |
| Abstract | 第3页 |
| 引言 | 第6-8页 |
| 第一章 材料与方法 | 第8-16页 |
| 1.1 材料、仪器、试剂和耗材 | 第8-9页 |
| 1.1.1 主要材料 | 第8页 |
| 1.1.2 主要仪器 | 第8-9页 |
| 1.1.3 主要试剂和耗材 | 第9页 |
| 1.2 免疫组织化学染色 | 第9-10页 |
| 1.2.1 免疫组织化学染色 | 第9-10页 |
| 1.2.2 免疫组织化学染色结果评分标准 | 第10页 |
| 1.2.3 数据分析 | 第10页 |
| 1.3 结肠癌组织mRNA表达检测 | 第10-12页 |
| 1.3.1 结肠癌组织总RNA抽提 | 第10-11页 |
| 1.3.2 总RNA的纯化 | 第11页 |
| 1.3.3 cDNA合成 | 第11页 |
| 1.3.4 PCR扩增DCN片段 | 第11-12页 |
| 1.3.5 琼脂糖凝胶电泳 | 第12页 |
| 1.4 细胞的处理 | 第12-13页 |
| 1.4.1 实验前准备 | 第12页 |
| 1.4.2 首次传代前细胞的复苏 | 第12-13页 |
| 1.4.3 培养液的更换 | 第13页 |
| 1.4.4 细胞传代 | 第13页 |
| 1.4.5 细胞冻存 | 第13页 |
| 1.4.6 细胞计数 | 第13页 |
| 1.5 Real time qPCR检测OTUB1与DCN的mRNA表达 | 第13-15页 |
| 1.5.1 结肠癌细胞总RNA的提取 | 第13-14页 |
| 1.5.2 结肠癌细胞总RNA的纯化 | 第14页 |
| 1.5.3 cDNA合成 | 第14页 |
| 1.5.4 PCR扩增DCN片段 | 第14页 |
| 1.5.5 实时定量PCR检测 | 第14-15页 |
| 1.6 Western-blot检测OTUB1与DCN表达 | 第15页 |
| 1.6.1 细胞总蛋白的抽提 | 第15页 |
| 1.7 Western-blot步骤 | 第15-16页 |
| 第二章 结果 | 第16-21页 |
| 2.1 OTUB1在结肠组织中的免疫组化 | 第16-18页 |
| 2.1.1 OTUB1在两种腺瘤组织及正常粘膜中的表达 | 第16页 |
| 2.1.2 OTUB1在60例结肠中的表达 | 第16-18页 |
| 2.2 DCN在结肠细胞中的表达变化 | 第18-19页 |
| 2.3 Real time qPCR分析比较OTUB1与DCN在结肠细胞中的表达 | 第19页 |
| 2.4 Western-blot分析比较OTUB1与DCN在结肠细胞中的表达 | 第19-21页 |
| 第三章 讨论 | 第21-23页 |
| 结论 | 第23-24页 |
| 问题展望 | 第24-25页 |
| 参考文献 | 第25-28页 |
| 综述 | 第28-38页 |
| 参考文献 | 第34-38页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第38-39页 |
| 英文缩略词表 | 第39-40页 |
| 致谢 | 第40-41页 |
