摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
第一章 前言 | 第12-20页 |
1.1 光合作用概述 | 第12-13页 |
1.2 光抑制和光修复 | 第13-15页 |
1.3 状态转换 | 第15-16页 |
1.4 小分子蛋白PSB27的研究现状 | 第16-18页 |
1.5 本实验的研究意义及思路 | 第18-20页 |
第二章 拟南芥PSB27蛋白的晶体结构 | 第20-46页 |
2.1 材料与试剂 | 第20-22页 |
2.1.1 实验材料 | 第20页 |
2.1.2 试剂 | 第20-22页 |
2.2 实验方法 | 第22-36页 |
2.2.1 表达载体的构建 | 第22-29页 |
2.2.2 蛋白质的表达纯化 | 第29-35页 |
2.2.3 晶体形成及结构解析 | 第35-36页 |
2.3 结果与分析 | 第36-46页 |
2.3.1 pGEX.4T-2-PSB27重组质粒的构建 | 第36-37页 |
2.3.2 菌液PCR及测序 | 第37页 |
2.3.3 目的蛋白的表达与纯化 | 第37-39页 |
2.3.4 PSB27晶体结构的形成及分析 | 第39-45页 |
2.3.5 小结 | 第45-46页 |
第三章 核磁样品准备和记谱 | 第46-56页 |
3.1 材料与试剂 | 第46-47页 |
3.1.1 实验材料 | 第46页 |
3.1.2 相关试剂及酶 | 第46-47页 |
3.2 实验方法 | 第47-50页 |
3.2.1 同位素标记蛋白的表达 | 第47-48页 |
3.2.2 核磁样品记谱条件的探索 | 第48-49页 |
3.2.3 核磁样品的准备 | 第49页 |
3.2.4 核磁样品的冻干重溶 | 第49页 |
3.2.5 NMR谱及蛋白质共振峰的指认 | 第49-50页 |
3.2.6 CP43小肽片段滴定PSB27 | 第50页 |
3.3 结果与分析 | 第50-56页 |
3.3.1 CP43小肽片段滴定PSB27 | 第50-51页 |
3.3.2 核磁样品记谱条件的确定 | 第51-54页 |
3.3.3 小结 | 第54-56页 |
第四章 突变体PSB27蛋白的表达纯化 | 第56-69页 |
4.1 材料与试剂 | 第56-57页 |
4.1.1 实验材料 | 第56页 |
4.1.2 相关试剂及酶 | 第56-57页 |
4.2 实验方法 | 第57-66页 |
4.2.1 PSB27单突变体基因的扩增 | 第57-61页 |
4.2.2 DpnI降解质粒模板 | 第61-62页 |
4.2.3 单突变体pGEX-4T.3-PSB27的转化实验 | 第62页 |
4.2.4 多突变体pGEX-4T.3-PSB27基因构建 | 第62-63页 |
4.2.5 突变体蛋白的提取 | 第63-66页 |
4.3 结果与分析 | 第66-69页 |
4.3.1 pGEX-4T. 3-PSB27重组质粒的构建 | 第66页 |
4.3.2 pGEX-4T.3-PSB27突变体重组质粒的测序结果 | 第66-67页 |
4.3.3 突变体蛋白的表达纯化 | 第67-68页 |
4.3.4 小结 | 第68-69页 |
结论 | 第69-71页 |
参考文献 | 第71-79页 |
附录一: 英文缩写 | 第79-81页 |
附录二: 所用仪器 | 第81-83页 |
致谢 | 第83页 |