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拟南芥光系统Ⅱ中PSB27的晶体结构

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-8页
第一章 前言第12-20页
    1.1 光合作用概述第12-13页
    1.2 光抑制和光修复第13-15页
    1.3 状态转换第15-16页
    1.4 小分子蛋白PSB27的研究现状第16-18页
    1.5 本实验的研究意义及思路第18-20页
第二章 拟南芥PSB27蛋白的晶体结构第20-46页
    2.1 材料与试剂第20-22页
        2.1.1 实验材料第20页
        2.1.2 试剂第20-22页
    2.2 实验方法第22-36页
        2.2.1 表达载体的构建第22-29页
        2.2.2 蛋白质的表达纯化第29-35页
        2.2.3 晶体形成及结构解析第35-36页
    2.3 结果与分析第36-46页
        2.3.1 pGEX.4T-2-PSB27重组质粒的构建第36-37页
        2.3.2 菌液PCR及测序第37页
        2.3.3 目的蛋白的表达与纯化第37-39页
        2.3.4 PSB27晶体结构的形成及分析第39-45页
        2.3.5 小结第45-46页
第三章 核磁样品准备和记谱第46-56页
    3.1 材料与试剂第46-47页
        3.1.1 实验材料第46页
        3.1.2 相关试剂及酶第46-47页
    3.2 实验方法第47-50页
        3.2.1 同位素标记蛋白的表达第47-48页
        3.2.2 核磁样品记谱条件的探索第48-49页
        3.2.3 核磁样品的准备第49页
        3.2.4 核磁样品的冻干重溶第49页
        3.2.5 NMR谱及蛋白质共振峰的指认第49-50页
        3.2.6 CP43小肽片段滴定PSB27第50页
    3.3 结果与分析第50-56页
        3.3.1 CP43小肽片段滴定PSB27第50-51页
        3.3.2 核磁样品记谱条件的确定第51-54页
        3.3.3 小结第54-56页
第四章 突变体PSB27蛋白的表达纯化第56-69页
    4.1 材料与试剂第56-57页
        4.1.1 实验材料第56页
        4.1.2 相关试剂及酶第56-57页
    4.2 实验方法第57-66页
        4.2.1 PSB27单突变体基因的扩增第57-61页
        4.2.2 DpnI降解质粒模板第61-62页
        4.2.3 单突变体pGEX-4T.3-PSB27的转化实验第62页
        4.2.4 多突变体pGEX-4T.3-PSB27基因构建第62-63页
        4.2.5 突变体蛋白的提取第63-66页
    4.3 结果与分析第66-69页
        4.3.1 pGEX-4T. 3-PSB27重组质粒的构建第66页
        4.3.2 pGEX-4T.3-PSB27突变体重组质粒的测序结果第66-67页
        4.3.3 突变体蛋白的表达纯化第67-68页
        4.3.4 小结第68-69页
结论第69-71页
参考文献第71-79页
附录一: 英文缩写第79-81页
附录二: 所用仪器第81-83页
致谢第83页

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