| 摘要 | 第6-7页 |
| abstract | 第7页 |
| 英文缩略表 | 第14-15页 |
| 第一章 引言 | 第15-25页 |
| 1.1 毕赤酵母表达系统研究进展 | 第15-17页 |
| 1.1.1 毕赤酵母表达系统简介 | 第15页 |
| 1.1.2 毕赤酵母组成型表达系统的研究进展 | 第15-16页 |
| 1.1.3 毕赤酵母表达系统中组成型启动子简介 | 第16-17页 |
| 1.2 类胡萝卜素的研究进展 | 第17-20页 |
| 1.2.1 常见的几种类胡萝卜素简介 | 第17-18页 |
| 1.2.2 类胡萝卜素的提取方式 | 第18-20页 |
| 1.3 红发夫酵母的简介 | 第20-24页 |
| 1.3.1 红发夫酵母中类胡萝卜素的合成途径简介 | 第20-22页 |
| 1.3.2 红发夫酵母中类胡萝卜素合成的相关基因简介 | 第22-24页 |
| 1.4 本研究的技术路线 | 第24页 |
| 1.5 本研究的目的与意义 | 第24-25页 |
| 第二章 β-胡萝卜素合成途径关键酶基因的克隆、表达 | 第25-45页 |
| 2.1 实验材料 | 第25-26页 |
| 2.1.1 菌种及质粒 | 第25页 |
| 2.1.2 引物合成及测序 | 第25页 |
| 2.1.3 试剂及试剂盒 | 第25页 |
| 2.1.4 培养基及试剂的配制 | 第25-26页 |
| 2.1.5 主要仪器 | 第26页 |
| 2.2 实验方法 | 第26-39页 |
| 2.2.1 红发夫酵母培养方法 | 第26页 |
| 2.2.2 红发夫酵母cDNA的获得 | 第26-27页 |
| 2.2.3 毕赤酵母GS115基因组DNA的提取 | 第27页 |
| 2.2.4 引物设计 | 第27-28页 |
| 2.2.5 来源于X.dendrorhous β-胡萝卜素合成相关基因的克隆 | 第28-29页 |
| 2.2.6 真核表达载体pPICZαA-idi-crt E-crtYB-crtI的构建 | 第29-37页 |
| 2.2.7 β-胡萝卜素相关合成酶在毕赤酵母中的表达 | 第37-38页 |
| 2.2.8 菌体的处理与色素的提取 | 第38-39页 |
| 2.3 实验结果与分析 | 第39-43页 |
| 2.3.1 RNA的提取及cDNA的获取 | 第39页 |
| 2.3.2 来源于X.dendrorhous β-胡萝卜素合成相关基因的获得 | 第39-40页 |
| 2.3.3 胡萝卜素合成表达载体pPICZαA-idi-crtE-crtYB-crtI的构建 | 第40-41页 |
| 2.3.4 β-胡萝卜素合成相关酶在毕赤酵母中的表达 | 第41-42页 |
| 2.3.5 菌体的处理与色素的提取 | 第42-43页 |
| 2.3.6 β-胡萝卜素的测定 | 第43页 |
| 2.4 讨论 | 第43-44页 |
| 2.5 本章小结 | 第44-45页 |
| 第三章 虾青素合成途径关键酶基因的克隆、表达 | 第45-55页 |
| 3.1 实验材料 | 第45页 |
| 3.1.1 菌株与载体 | 第45页 |
| 3.1.2 试剂、工具酶与试剂盒 | 第45页 |
| 3.1.3 培养基 | 第45页 |
| 3.1.4 引物序列合成与DNA测序 | 第45页 |
| 3.1.5 仪器 | 第45页 |
| 3.2 实验方法 | 第45-49页 |
| 3.2.1 引物设计 | 第45-46页 |
| 3.2.2 虾青素合成代谢途径中相关酶基因序列的获得 | 第46页 |
| 3.2.3 真核表达载体pPICZαA-idi-crtE-crtYB-crtI-crtS-crtR的构建 | 第46-48页 |
| 3.2.4 虾青素合成相关酶在GS115中的表达 | 第48-49页 |
| 3.2.5 菌体的处理与虾青素的提取 | 第49页 |
| 3.2.6 虾青素的测定 | 第49页 |
| 3.3 实验结果与分析 | 第49-53页 |
| 3.3.1 虾青素相关合成酶编码基因的获得 | 第49-50页 |
| 3.3.2 真核表达载体pPICZαA-idi-crtE-crtYB-crtI-crtS-crtR的构建 | 第50-51页 |
| 3.3.3 虾青素合成相关酶在GS115中的表达 | 第51-52页 |
| 3.3.4 菌体的处理与色素的提取 | 第52-53页 |
| 3.3.5 虾青素的测定结果 | 第53页 |
| 3.4 讨论 | 第53-54页 |
| 3.5 本章小结 | 第54-55页 |
| 第四章 甘露聚糖酶Man5T在GS115-CARO中的表达 | 第55-64页 |
| 4.1 实验材料 | 第55-56页 |
| 4.1.1 菌株与载体 | 第55页 |
| 4.1.2 试剂 | 第55页 |
| 4.1.3 引物的合成及DNA测序 | 第55页 |
| 4.1.4 培养基及试剂的配置 | 第55页 |
| 4.1.5 主要仪器 | 第55-56页 |
| 4.2 实验方法 | 第56-59页 |
| 4.2.1 引物设计 | 第56页 |
| 4.2.2 真核表达载体pPIC9-man5T的构建 | 第56-58页 |
| 4.2.3 重组甘露聚糖酶Man5T在GS115中的表达 | 第58-59页 |
| 4.3 实验结果 | 第59-62页 |
| 4.3.1 man5T DNA序列的获得 | 第59-60页 |
| 4.3.2 甘露聚糖酶Man5T在GS115和GS115-CARO中的表达 | 第60-61页 |
| 4.3.3 重组工程菌GS115-CARO-M5T甘露聚糖酶活性分析 | 第61-62页 |
| 4.3.4 重组工程菌GS115-CARO-M5T胞内 β-胡萝卜素产量分析 | 第62页 |
| 4.4 讨论 | 第62-63页 |
| 4.5 本章小结 | 第63-64页 |
| 第五章 全文结论 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 作者简历 | 第71页 |
