| 英文缩略词表 | 第5-6页 |
| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 第一章 胶质肉瘤细胞核酸适配体的筛选及应用 | 第10-41页 |
| 1.1 引言 | 第10-12页 |
| 1.2 实验材料 | 第12-14页 |
| 1.2.1 DNA随机文库及引物 | 第12页 |
| 1.2.2 细胞及培养基 | 第12-13页 |
| 1.2.3 实验试剂与仪器设备 | 第13-14页 |
| 1.3 实验方法 | 第14-21页 |
| 1.3.1 随机文库及引物的合成及退火温度的优化 | 第14-15页 |
| 1.3.2 细胞培养 | 第15页 |
| 1.3.3 胶质肉瘤细胞k308核酸适配体的筛选过程 | 第15-18页 |
| 1.3.4 克隆测序及结果分析 | 第18页 |
| 1.3.5 流式细胞术分析DNA文库的富集 | 第18页 |
| 1.3.6 核酸适配体的解离常数K_d值的测定 | 第18-19页 |
| 1.3.7 核酸适配体的选择性实验 | 第19页 |
| 1.3.8 核酸适配体序列的优化与表征 | 第19页 |
| 1.3.9 温度及胰蛋白酶处理对核酸适配体结合力的影响 | 第19-20页 |
| 1.3.10 激光共聚焦显微镜核酸适配体与细胞及组织成像 | 第20-21页 |
| 1.4 结果 | 第21-35页 |
| 1.4.1 退火温度优化 | 第21页 |
| 1.4.2 筛选条件 | 第21-22页 |
| 1.4.3 筛选DNA文库的富集情况 | 第22-23页 |
| 1.4.4 富集文库的克隆测序分析 | 第23-24页 |
| 1.4.5 候选核酸适配体与k308细胞的结合力及K_d值比较 | 第24-26页 |
| 1.4.6 候选核酸适配体选择性比较 | 第26-27页 |
| 1.4.7 激光共聚焦扫描核酸适配体WQY-9 与细胞成像 | 第27-28页 |
| 1.4.8 核酸适配体WQY-9 序列优化及其结合力考察 | 第28-29页 |
| 1.4.9 温度对核酸适配体WQY9B的影响 | 第29-32页 |
| 1.4.10 胰蛋白酶处理对核酸适配体WQY9B的影响 | 第32页 |
| 1.4.11 核酸适配体WQY9B用于识别临床病理组织 | 第32-35页 |
| 1.5 讨论 | 第35-39页 |
| 1.6 结论 | 第39-41页 |
| 第二章 胶质瘤干细胞核酸适配体筛选及初步应用 | 第41-78页 |
| 2.1 引言 | 第41-44页 |
| 2.2 实验材料 | 第44-47页 |
| 2.2.1 DNA随机文库及引物 | 第44页 |
| 2.2.2 细胞及培养基 | 第44页 |
| 2.2.3 实验动物 | 第44-45页 |
| 2.2.4 实验试剂与仪器设备 | 第45-47页 |
| 2.3 实验方法 | 第47-56页 |
| 2.3.1 细胞培养 | 第47页 |
| 2.3.2 磁珠分选（MACS）纯化CD133~+的胶质瘤干细胞 | 第47-48页 |
| 2.3.3 胶质瘤干细胞的分化 | 第48页 |
| 2.3.4 免疫细胞化学染色 | 第48页 |
| 2.3.5 BALB/C裸鼠皮下移植成瘤实验 | 第48-49页 |
| 2.3.6 Western-Blot检测 | 第49页 |
| 2.3.7 RT-PCR检测 | 第49-51页 |
| 2.3.8 筛选过程及克隆测序 | 第51-54页 |
| 2.3.9 流式细胞术分析DNA文库的富集 | 第54页 |
| 2.3.10 核酸适配体的解离常数K_d值的测定 | 第54页 |
| 2.3.11 核酸适配体的选择性实验 | 第54-55页 |
| 2.3.12 核酸适配体序列的优化与表征 | 第55页 |
| 2.3.13 温度及胰蛋白酶处理对核酸适配体结合力的影响 | 第55页 |
| 2.3.14 激光共聚焦显微镜核酸适配体与细胞成像 | 第55-56页 |
| 2.3.15 数据统计学方法 | 第56页 |
| 2.4 结果 | 第56-73页 |
| 2.4.1 CD133-PE抗体检测胶质瘤干细胞分选后的流式结果 | 第56-57页 |
| 2.4.2 胶质瘤干细胞分化及标志物表达情况 | 第57-59页 |
| 2.4.3 裸鼠皮下移植成瘤 | 第59-60页 |
| 2.4.4 筛选条件 | 第60-61页 |
| 2.4.5 筛选DNA文库的富集情况 | 第61-62页 |
| 2.4.6 富集文库的克隆测序分析 | 第62-64页 |
| 2.4.7 候选核酸适配体与胶质瘤干细胞的结合力 | 第64页 |
| 2.4.8 核酸适配体W5的K_d值及序列优化 | 第64-66页 |
| 2.4.9 核酸适配体W5-7 的K_d值及选择性 | 第66-68页 |
| 2.4.10 激光共聚焦扫描核酸适配体W5-7 与细胞成像 | 第68-69页 |
| 2.4.11 胰酶处理及温度对核酸适配体W5-7 的影响 | 第69-70页 |
| 2.4.12 核酸适配体W5-7 在血清中的稳定性 | 第70-71页 |
| 2.4.13 W5-7 与CD133抗体在胶质瘤干细胞上的结合位点无竞争关系 | 第71-73页 |
| 2.5 讨论 | 第73-77页 |
| 2.6 结论 | 第77-78页 |
| 参考文献 | 第78-88页 |
| 综述 | 第88-121页 |
| 参考文献 | 第108-121页 |
| 致谢 | 第121页 |
