| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 英文缩略表 | 第14-16页 |
| 第一章 引言 | 第16-31页 |
| 1.1 突变体构建策略 | 第18-19页 |
| 1.2 随机突变 | 第19-23页 |
| 1.2.1 物理和化学诱变 | 第19-20页 |
| 1.2.2 插入突变 | 第20-23页 |
| 1.3 异位表达 | 第23-24页 |
| 1.3.1 时空特异表达 | 第23-24页 |
| 1.3.2 全长cDNA过量表达系统 | 第24页 |
| 1.4 靶向突变 | 第24-25页 |
| 1.5 侧翼序列扩增方法 | 第25-27页 |
| 1.5.1 TAIL PCR | 第25-26页 |
| 1.5.2 FPNI-PCR | 第26-27页 |
| 1.5.3 IPCR | 第27页 |
| 1.5.4 Plasmid Rescue | 第27页 |
| 1.6 烟草基因组计划与进展 | 第27-30页 |
| 1.6.1 烟草基因组测序 | 第28页 |
| 1.6.2 EST测序 | 第28-29页 |
| 1.6.3 转录因子数据库 | 第29页 |
| 1.6.4 遗传图谱构建 | 第29-30页 |
| 1.6.5 烟草基因功能研究 | 第30页 |
| 1.7 本研究的目的、意义 | 第30-31页 |
| 第二章 烟草激活标签突变体库的构建 | 第31-43页 |
| 2.1 材料 | 第31-32页 |
| 2.1.1 烟草供体 | 第31页 |
| 2.1.2 载体和菌种 | 第31-32页 |
| 2.1.3 试剂 | 第32页 |
| 2.2 方法 | 第32-39页 |
| 2.2.1 农杆菌转化及菌种的保存 | 第32-33页 |
| 2.2.2 烟草遗传转化培养基 | 第33页 |
| 2.2.3 烟草无菌苗的获得 | 第33-34页 |
| 2.2.4 农杆菌介导的遗传转化 | 第34-35页 |
| 2.2.6 转基因阳性检测 | 第35-36页 |
| 2.2.7 Southern blot检测T-DNA拷贝数 | 第36-39页 |
| 2.3 结果与分析 | 第39-41页 |
| 2.3.1 激活标签突变体的构建 | 第39-40页 |
| 2.3.2 转基因植株的阳性检测 | 第40-41页 |
| 2.3.3 转基因植株的southern检测 | 第41页 |
| 2.4 讨论 | 第41-43页 |
| 第三章 烟草激活标签突变系的表型鉴定 | 第43-52页 |
| 3.1 材料和方法 | 第43-44页 |
| 3.2 结果与分析 | 第44-50页 |
| 3.2.1 2011年大T1代株系主要突变表型调查 | 第44-47页 |
| 3.2.2 2012年大T1代株系主要突变表型调查 | 第47-48页 |
| 3.2.3 2013年大田T2代株系主要突变表型调查 | 第48-50页 |
| 3.3 讨论 | 第50-52页 |
| 第四章 突变体侧翼序列分析与基因表达分析 | 第52-67页 |
| 4.1 材料和方法 | 第52-56页 |
| 4.1.1 侧翼序列扩增 | 第52-54页 |
| 4.1.2 侧翼序列分析 | 第54-55页 |
| 4.1.3 基因表达分析 | 第55-56页 |
| 4.2 结果与分析 | 第56-63页 |
| 4.2.1 T-DNA插入位点侧翼序列分析 | 第56-58页 |
| 4.2.2 T-DNA插入位点在基因组上的分布 | 第58-59页 |
| 4.2.3 T-DNA插入位点在基因区和基因间区的分布 | 第59-61页 |
| 4.2.4 T-DNA插入位点旁侧基因表达分析 | 第61-63页 |
| 4.3 讨论 | 第63-67页 |
| 4.3.1 侧翼序列扩增 | 第63-64页 |
| 4.3.2 插入位点分布 | 第64-65页 |
| 4.3.3 插入位点旁侧基因的表达 | 第65-67页 |
| 第五章 全文结论 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-81页 |
| 附录 | 第81-95页 |
| 致谢 | 第95-96页 |
| 作者简历 | 第96页 |
