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NO在硝酸盐胁迫下番茄中的作用及SlGSNOR的功能分析

摘要第6-8页
Abstract第8-9页
缩略词第13-14页
第一章 绪论第14-22页
    1.1 植物细胞中的NO第14-16页
    1.2 植物细胞中的S-亚硝基谷胱甘肽还原酶(GSNOR)第16-18页
    1.3 土壤次生盐渍化第18-20页
        1.3.1 现状第18-19页
        1.3.2 产生原因第19-20页
        1.3.3 防治措施第20页
    1.4 本研究的目的和意义第20-22页
第二章 外源施加NO供体对硝酸盐胁迫下番茄幼苗根系抗氧化系统和NO代谢的影响第22-36页
    2.1 材料与处理第22-23页
        2.1.1 植物材料第22页
        2.1.2 试剂第22-23页
        2.1.3 植物材料处理第23页
    2.2 测定指标及方法第23-28页
        2.2.1 H_2O_2和MDA含量的测定第23-24页
        2.2.2 抗氧化物含量测定(AsA和GSH)第24-25页
        2.2.3 清除活性氧系统相关酶活性测定第25-26页
        2.2.4 ROS和NO含量的显微镜观察第26-27页
        2.2.5 测定SNO含量第27页
        2.2.6 数据处理第27-28页
    2.3 结果分析第28-34页
        2.3.1 外源施加NO对硝酸盐胁迫下番茄幼苗根中MDA和H_2O_2含量的影响第28-29页
        2.3.2 外源施加NO对硝酸盐胁迫下番茄幼苗根中AsA和GSH含量的影响第29-30页
        2.3.3 外源施加NO供体对硝酸盐胁迫下番番幼苗根中抗氧化酶活性的影响第30-32页
        2.3.4 外源施加NO对硝酸盐胁迫下番茄幼苗根中ROS的影响第32-33页
        2.3.5 外源施加NO对硝酸盐胁迫下番茄幼苗根中NO荧光含量的影响第33-34页
        2.3.6 外源施加NO对硝酸盐胁迫下番茄幼苗根中NO和SNO含量的影响第34页
    2.4 讨论第34-36页
第三章 硝酸盐胁迫下番茄幼苗GSNOR功能分析第36-56页
    3.1 实验材料与方法第36-37页
        3.1.1 农杆菌介导法转化番茄第36-37页
        3.1.2 过表达SlGSNOR转基因烟草第37页
    3.2 测定指标及方法第37-42页
        3.2.1 基因组DNA的提取第37-38页
        3.2.2 RNA提取及反转录第38-39页
        3.2.3 qPT-PCR分析第39-40页
        3.2.4 提取烟草幼苗蛋白,做western blot检测第40-41页
        3.2.5 烟草种子发芽试验第41页
        3.2.6 番茄/烟草材料处理第41页
        3.2.7 硝酸盐胁迫下番茄/烟草幼苗根系MDA和H_2O_2含量的测定第41页
        3.2.8 硝酸盐胁迫下番茄/烟草幼苗根系抗氧化物活性的测定第41页
        3.2.9 硝酸盐胁迫下番茄/烟草幼苗根系抗氧化物含量的测定第41-42页
        3.2.10 硝酸盐胁迫下番茄/烟草幼苗根系NO和SNO含量的测定第42页
        3.2.11 硝酸盐胁迫下番茄/烟草幼苗根系GSNOR活性的测定第42页
        3.2.12 数据处理第42页
    3.3 结果分析第42-55页
        3.3.1 GSNOR表达量分析第42-43页
        3.3.2 转SlGSNOR基因番茄的检测第43-44页
        3.3.3 NO_3~-/NaCl胁迫对过表达SlGSNOR基因番茄幼苗根中MDA和HH_2O_2含量的影响第44-45页
        3.3.4 NO_3~-/NaCl胁迫对过表达SlGSNOR基因番茄幼苗根中抗氧化酶活性的影响第45-47页
        3.3.5 NO_3~-/NaCl胁迫对过表达转SlGSNOR基因番茄幼苗根中抗氧化物含量的影响第47-48页
        3.3.6 NO_3~-/NaCl胁迫对过表达转SlGSNOR基因番茄幼苗根中SNO含量和GSNOR活性的影响第48-49页
        3.3.7 NO_3~-/NaCl胁迫对过表达转SlGSNOR基因番茄幼苗根中NO含量的影响第49-50页
        3.3.8 基因组PCR,PT-PCR和Western blot检测过表达SlGSNOR转基因烟草第50-51页
        3.3.9 硝酸盐胁迫对转SlGSNOR基因烟草种子发芽率的影响第51-52页
        3.3.10 硝酸盐胁迫对转SlGSNOR基因烟草幼苗根中MDA和H_2O_2含量的影响第52-53页
        3.3.11 硝酸盐胁迫对转SlGSNOR基因烟草幼苗根中抗氧化酶活性的影响第53-54页
        3.3.12 硝酸盐胁迫对转SlGSNOR基因烟草幼苗根中抗氧化物(GSH/AsA)含量的影响第54页
        3.3.13 硝酸盐胁迫对转SlGSNOR基因烟草幼苗根中SNO含量和GSNOR活性的影响第54-55页
    3.4 讨论第55-56页
第四章 总结与展望第56-58页
致谢第58-60页
参考文献第60-66页
附录A 攻读硕士期间发表的论文第66页

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