中英文缩略词对照 | 第7-9页 |
中文摘要 | 第9-12页 |
Abstract | 第12-14页 |
1. 前言 | 第15-17页 |
2. 实验材料 | 第17-21页 |
2.1 药品与试剂 | 第17-18页 |
2.2 仪器与设备 | 第18-19页 |
2.3 溶液和试剂的配制 | 第19-21页 |
3. 实验方法 | 第21-31页 |
3.1 细胞培养 | 第21-22页 |
3.1.1 细胞复苏 | 第21页 |
3.1.2 细胞培养 | 第21页 |
3.1.3 细胞传代 | 第21-22页 |
3.1.4 细胞计数 | 第22页 |
3.1.5 细胞冻存 | 第22页 |
3.2 细胞转染 | 第22-23页 |
3.3 实时荧光定量PCR(qRT-PCR) | 第23-26页 |
3.3.1 HSC-T6细胞总RNA的提取 | 第23-24页 |
3.3.2 cDNA的合成 | 第24-25页 |
3.3.3 提取的细胞cDNA用于qRT-PCR | 第25-26页 |
3.4 MTT比色法测细胞增殖 | 第26页 |
3.5 吖啶橙染色检测细胞自噬 | 第26-27页 |
3.6 流式细胞术检测细胞细胞凋亡 | 第27页 |
3.7 Western Blot | 第27-30页 |
3.7.1 细胞总蛋白制备和定量 | 第27页 |
3.7.2 蛋白质电泳 | 第27-29页 |
3.7.3 半干转 | 第29页 |
3.7.4 电转移(湿转) | 第29页 |
3.7.5 抗原抗体反应及显色 | 第29-30页 |
3.7.6 结果分析 | 第30页 |
3.8 统计学分析 | 第30-31页 |
4. 实验结果 | 第31-53页 |
4.1 TRPV4在TGF-β1诱导的HSC-T6细胞中的表达变化 | 第31-32页 |
4.2 TRPV4对HSC-T6凋亡蛋白表达的影响 | 第32-40页 |
4.2.1 转染si-TRPV4后对HSC-T6凋亡蛋白表达的作用 | 第32-36页 |
4.2.2 促进TRPV4表达对HSC-T6凋亡蛋白表达的影响 | 第36-40页 |
4.3 自噬水平在TGF-β1诱导的HSC-T6细胞中的变化 | 第40-41页 |
4.4 TRPV4对HSC-T6细胞自噬的作用 | 第41-46页 |
4.4.1 转染TRPV4 siRNA后对HSC-T6自噬水平的作用 | 第41-44页 |
4.4.2 刺激TRPV4后对HSC-T6自噬的影响 | 第44-46页 |
4.5 自噬对HSC-T6细胞凋亡蛋白表达的影响 | 第46-50页 |
4.6 TRPV4通过调节自噬进而抑制凋亡的表达 | 第50-51页 |
4.7 沉默TRPV4对HSC-T6细胞中p-AKT表达的影响 | 第51-53页 |
5. 讨论 | 第53-56页 |
结论 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-62页 |
附录 | 第62-64页 |
致谢 | 第64-65页 |
综述 | 第65-86页 |
References | 第76-86页 |