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蜡梅小GTP结合蛋白基因CpRAC1的克隆及功能初步验证

摘要第6-8页
Abstract第8-10页
第一章 文献综述第11-25页
    1.1 蜡梅研究进展第11-13页
        1.1.1 形态与分布第11页
        1.1.2 种属关系与品种分类第11-12页
        1.1.3 蜡梅的开发和应用第12-13页
        1.1.4 分子生物学在蜡梅研究中的应用第13页
    1.2 小GTP结合蛋白概述第13-16页
        1.2.1 GTP结合蛋白第13-14页
        1.2.2 小GTP结合蛋白第14页
        1.2.3 小GTP结合蛋白的结构和作用机制第14-15页
        1.2.4 小GTP蛋白的分类和生物学功能第15-16页
    1.3 Rac/Rop蛋白概述第16-25页
        1.3.1 Rac/Rop蛋白的发现第16-17页
        1.3.2 Rac/Rop蛋白的结构特点和分类第17-18页
        1.3.3 Rac/Rop蛋白的作用机理第18-19页
        1.3.4 Rac/Rop蛋白的生物学功能第19-25页
第二章 引言第25-27页
    2.1 研究背景第25页
    2.2 研究目的、内容及意义第25-26页
    2.3 研究技术路线第26-27页
第三章 蜡梅小GTP结合蛋白基因CpRAC1的克隆和分子特征分析第27-41页
    3.1 实验材料第27-28页
        3.1.1 蜡梅cDNA文库及植物材料第27页
        3.1.2 菌株与载体第27页
        3.1.3 主要试剂及试剂盒第27页
        3.1.4 主要仪器设备第27-28页
        3.1.5 自配的主要试剂第28页
    3.2 实验方法第28-32页
        3.2.1 EST序列特征分析及目标克隆子的鉴定第28-29页
        3.2.2 蜡梅CpRAC1基因cDNA序列的获得第29-32页
        3.2.3 蜡梅CpRAC1基因的生物信息学分析第32页
    3.3 结果与分析第32-39页
        3.3.1 蜡梅CpRAC1基因cDNA的获得及其序列特征第32-34页
        3.3.2 蜡梅CpRAC1基因编码蛋白的基本特征预测分析第34-35页
        3.3.3 蜡梅CpRAC1基因编码蛋白的同源性分析第35-36页
        3.3.4 蜡梅CpRAC1基因编码蛋白的聚类分析第36-38页
        3.3.5 蜡梅CpRAC1蛋白与拟南芥RAC蛋白的聚类分析与多重序列比对第38-39页
    3.4 讨论第39-41页
第四章 蜡梅CpRAC1基因的表达特性分析第41-51页
    4.1 实验材料第41页
    4.2 实验方法第41-44页
        4.2.1 蜡梅不同组织、不同时期及不同胁迫处理材料的采集第41-42页
        4.2.2 总RNA的提取及cDNA第一链的获得第42页
        4.2.3 CpRAC1基因表达特性的实时荧光定量分析第42-44页
    4.3 结果与分析第44-50页
        4.3.1 蜡梅总RNA提取第44页
        4.3.2 CpRAC1基因的表达特性分析第44-50页
    4.4 讨论第50-51页
第五章 蜡梅CpRAC1基因表达载体的构建及拟南芥遗传转化研究第51-73页
    5.1 实验材料第51-52页
        5.1.1 植物材料第51页
        5.1.2 载体及菌株第51页
        5.1.3 试剂盒及主要试剂第51页
        5.1.4 自配的主要试剂第51-52页
    5.2 实验方法第52-58页
        5.2.1 蜡梅CpRAC1基因植物超表达载体的构建第52-54页
        5.2.2 农杆菌EHA105冻融法感受态的制备第54页
        5.2.3 冻融法转化农杆菌EHA105感受态细胞第54页
        5.2.4 农杆菌转化子的PCR鉴定及反转化大肠杆菌鉴定第54-55页
        5.2.5 花序侵染法转化拟南芥第55-56页
        5.2.6 转基因拟南芥的筛选鉴定第56-57页
        5.2.7 转基因拟南芥的表型观察第57-58页
        5.2.8 转基因拟南芥的花粉离体萌发第58页
        5.2.9 转基因拟南芥的激素胁迫处理第58页
        5.2.10 类黄酮和叶绿素含量测定第58页
    5.3 结果与分析第58-69页
        5.3.1 蜡梅CpRAC1基因植物表达载体的构建第58-60页
        5.3.2 转基因拟南芥的筛选鉴定第60-62页
        5.3.3 转基因拟南芥表型观察第62-64页
        5.3.4 过表达CpRAC1基因影响拟南芥生长发育原因初探第64-69页
    5.4 讨论第69-73页
        5.4.1 蜡梅CpRAC1基因参与拟南芥植株衰老的调控第69-71页
        5.4.2 蜡梅CpRAC1基因影响相关生物学性状第71-73页
第六章 总结第73-75页
    6.1 主要结果第73-74页
    6.2 下一步计划第74-75页
参考文献第75-85页
缩略词表第85-87页
致谢第87-89页
在校期间发表文章和参研项目第89页

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