摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
第一章 文献综述 | 第11-25页 |
1.1 蜡梅研究进展 | 第11-13页 |
1.1.1 形态与分布 | 第11页 |
1.1.2 种属关系与品种分类 | 第11-12页 |
1.1.3 蜡梅的开发和应用 | 第12-13页 |
1.1.4 分子生物学在蜡梅研究中的应用 | 第13页 |
1.2 小GTP结合蛋白概述 | 第13-16页 |
1.2.1 GTP结合蛋白 | 第13-14页 |
1.2.2 小GTP结合蛋白 | 第14页 |
1.2.3 小GTP结合蛋白的结构和作用机制 | 第14-15页 |
1.2.4 小GTP蛋白的分类和生物学功能 | 第15-16页 |
1.3 Rac/Rop蛋白概述 | 第16-25页 |
1.3.1 Rac/Rop蛋白的发现 | 第16-17页 |
1.3.2 Rac/Rop蛋白的结构特点和分类 | 第17-18页 |
1.3.3 Rac/Rop蛋白的作用机理 | 第18-19页 |
1.3.4 Rac/Rop蛋白的生物学功能 | 第19-25页 |
第二章 引言 | 第25-27页 |
2.1 研究背景 | 第25页 |
2.2 研究目的、内容及意义 | 第25-26页 |
2.3 研究技术路线 | 第26-27页 |
第三章 蜡梅小GTP结合蛋白基因CpRAC1的克隆和分子特征分析 | 第27-41页 |
3.1 实验材料 | 第27-28页 |
3.1.1 蜡梅cDNA文库及植物材料 | 第27页 |
3.1.2 菌株与载体 | 第27页 |
3.1.3 主要试剂及试剂盒 | 第27页 |
3.1.4 主要仪器设备 | 第27-28页 |
3.1.5 自配的主要试剂 | 第28页 |
3.2 实验方法 | 第28-32页 |
3.2.1 EST序列特征分析及目标克隆子的鉴定 | 第28-29页 |
3.2.2 蜡梅CpRAC1基因cDNA序列的获得 | 第29-32页 |
3.2.3 蜡梅CpRAC1基因的生物信息学分析 | 第32页 |
3.3 结果与分析 | 第32-39页 |
3.3.1 蜡梅CpRAC1基因cDNA的获得及其序列特征 | 第32-34页 |
3.3.2 蜡梅CpRAC1基因编码蛋白的基本特征预测分析 | 第34-35页 |
3.3.3 蜡梅CpRAC1基因编码蛋白的同源性分析 | 第35-36页 |
3.3.4 蜡梅CpRAC1基因编码蛋白的聚类分析 | 第36-38页 |
3.3.5 蜡梅CpRAC1蛋白与拟南芥RAC蛋白的聚类分析与多重序列比对 | 第38-39页 |
3.4 讨论 | 第39-41页 |
第四章 蜡梅CpRAC1基因的表达特性分析 | 第41-51页 |
4.1 实验材料 | 第41页 |
4.2 实验方法 | 第41-44页 |
4.2.1 蜡梅不同组织、不同时期及不同胁迫处理材料的采集 | 第41-42页 |
4.2.2 总RNA的提取及cDNA第一链的获得 | 第42页 |
4.2.3 CpRAC1基因表达特性的实时荧光定量分析 | 第42-44页 |
4.3 结果与分析 | 第44-50页 |
4.3.1 蜡梅总RNA提取 | 第44页 |
4.3.2 CpRAC1基因的表达特性分析 | 第44-50页 |
4.4 讨论 | 第50-51页 |
第五章 蜡梅CpRAC1基因表达载体的构建及拟南芥遗传转化研究 | 第51-73页 |
5.1 实验材料 | 第51-52页 |
5.1.1 植物材料 | 第51页 |
5.1.2 载体及菌株 | 第51页 |
5.1.3 试剂盒及主要试剂 | 第51页 |
5.1.4 自配的主要试剂 | 第51-52页 |
5.2 实验方法 | 第52-58页 |
5.2.1 蜡梅CpRAC1基因植物超表达载体的构建 | 第52-54页 |
5.2.2 农杆菌EHA105冻融法感受态的制备 | 第54页 |
5.2.3 冻融法转化农杆菌EHA105感受态细胞 | 第54页 |
5.2.4 农杆菌转化子的PCR鉴定及反转化大肠杆菌鉴定 | 第54-55页 |
5.2.5 花序侵染法转化拟南芥 | 第55-56页 |
5.2.6 转基因拟南芥的筛选鉴定 | 第56-57页 |
5.2.7 转基因拟南芥的表型观察 | 第57-58页 |
5.2.8 转基因拟南芥的花粉离体萌发 | 第58页 |
5.2.9 转基因拟南芥的激素胁迫处理 | 第58页 |
5.2.10 类黄酮和叶绿素含量测定 | 第58页 |
5.3 结果与分析 | 第58-69页 |
5.3.1 蜡梅CpRAC1基因植物表达载体的构建 | 第58-60页 |
5.3.2 转基因拟南芥的筛选鉴定 | 第60-62页 |
5.3.3 转基因拟南芥表型观察 | 第62-64页 |
5.3.4 过表达CpRAC1基因影响拟南芥生长发育原因初探 | 第64-69页 |
5.4 讨论 | 第69-73页 |
5.4.1 蜡梅CpRAC1基因参与拟南芥植株衰老的调控 | 第69-71页 |
5.4.2 蜡梅CpRAC1基因影响相关生物学性状 | 第71-73页 |
第六章 总结 | 第73-75页 |
6.1 主要结果 | 第73-74页 |
6.2 下一步计划 | 第74-75页 |
参考文献 | 第75-85页 |
缩略词表 | 第85-87页 |
致谢 | 第87-89页 |
在校期间发表文章和参研项目 | 第89页 |