摘要 | 第3-6页 |
ABSTRACT | 第6-9页 |
第一章 绪论 | 第12-30页 |
1.1 研究背景与研究意义 | 第12-14页 |
1.2 眼球与角膜的结构和功能 | 第14-18页 |
1.2.1 眼球的结构与功能 | 第14-15页 |
1.2.2 角膜的结构与功能 | 第15-18页 |
1.3 医源性角膜膨隆 | 第18-23页 |
1.3.1 医源性角膜膨隆介绍 | 第18-19页 |
1.3.2 基质金属蛋白酶及其抑制剂 | 第19-20页 |
1.3.3 医源性角膜膨隆发生的可能机制 | 第20-22页 |
1.3.4 角膜屈光手术后的伤口愈合 | 第22-23页 |
1.4 圆锥角膜 | 第23-25页 |
1.4.1 圆锥角膜及其可能的发生机制 | 第23-24页 |
1.4.2 圆锥角膜患者泪液中炎性因子的变化 | 第24-25页 |
1.5 干眼症、异常用力揉眼与角膜膨隆 | 第25-28页 |
1.6 力学刺激对细胞外基质重塑的影响 | 第28-29页 |
1.7 本文的主要工作 | 第29-30页 |
第二章 力学刺激与炎性因子共同作用对角膜成纤维细胞外基质代谢的影响 | 第30-64页 |
2.1 引言 | 第30-31页 |
2.2 实验材料和方法 | 第31-45页 |
2.2.1 实验材料及角膜成纤维细胞的提取 | 第31-33页 |
2.2.2 角膜成纤维细胞的力学加载 | 第33-34页 |
2.2.3 角膜成纤维细胞总RNA的提取 | 第34-35页 |
2.2.4 RNA纯度的检测、反转录 | 第35-36页 |
2.2.5 实时荧光定量PCR | 第36-39页 |
2.2.6 蛋白定量 | 第39-40页 |
2.2.7 明胶酶谱法 | 第40-42页 |
2.2.8 western blot | 第42-44页 |
2.2.9 细胞染色 | 第44-45页 |
2.3 实验结果 | 第45-61页 |
2.3.1 力学牵拉与IL-1β 共同作用对CollagenⅠα1 基因表达的影响 | 第45-47页 |
2.3.2 力学牵拉与IL-1β 共同作用对CollagenⅠα2 基因表达的影响 | 第47-50页 |
2.3.3 力学牵拉与IL-1β 共同作用对Lumican基因表达的影响 | 第50-53页 |
2.3.4 力学牵拉与IL-1β 共同作用对MMP2蛋白表达的影响 | 第53-56页 |
2.3.5 力学牵拉与IL-1β 共同作用对MMP9蛋白表达的影响 | 第56-59页 |
2.3.6 力学牵拉对细胞形态的影响 | 第59-61页 |
2.4 讨论 | 第61-63页 |
2.5 本章小结 | 第63-64页 |
第三章 TNF-α 对圆锥角膜成纤维细胞基质金属蛋白酶及其抑制剂表达的影响 | 第64-76页 |
3.1 引言 | 第64页 |
3.2 实验材料与方法 | 第64-67页 |
3.2.1 实验材料 | 第64-65页 |
3.2.2 角膜成纤维细胞的提取 | 第65页 |
3.2.3 TNF-α 处理角膜成纤维细胞 | 第65-66页 |
3.2.4 蛋白定量 | 第66页 |
3.2.5 总RNA的提取与反转录 | 第66页 |
3.2.6 western blot检测MMPs的蛋白表达 | 第66页 |
3.2.7 RT-PCR检测TIMPs的基因表达 | 第66-67页 |
3.2.8 数据分析 | 第67页 |
3.3 实验结果 | 第67-73页 |
3.3.1 TNF-α 对角膜成纤维细胞MMPs蛋白表达的影响 | 第67-71页 |
3.3.2 TNF-α 对角膜成纤维细胞TIMPs基因表达的影响 | 第71-73页 |
3.4 讨论 | 第73-74页 |
3.5 本章小结 | 第74-76页 |
第四章 TNF-α 与力学牵拉共同作用对圆锥角膜成纤维细胞增殖与凋亡的影响 | 第76-88页 |
4.1 引言 | 第76-77页 |
4.2 实验材料与方法 | 第77-80页 |
4.2.1 实验材料 | 第77页 |
4.2.2 角膜成纤维细胞的力学加载 | 第77-78页 |
4.2.3 流式细胞术 | 第78页 |
4.2.4 力学加载后细胞增殖的检测 | 第78-79页 |
4.2.5 力学加载后细胞凋亡的检测 | 第79-80页 |
4.2.6 数据分析 | 第80页 |
4.3 实验结果 | 第80-85页 |
4.3.1 TNF-α和力学牵拉共同作用对角膜成纤维细胞增殖的影响 | 第80-83页 |
4.3.2 TNF-α和力学牵拉共同作用对角膜成纤维细胞凋亡的影响 | 第83-85页 |
4.4 讨论 | 第85-86页 |
4.5 本章小结 | 第86-88页 |
第五章 全文总结及展望 | 第88-90页 |
5.1 全文总结 | 第88-89页 |
5.2 后续工作展望 | 第89-90页 |
参考文献 | 第90-110页 |
致谢 | 第110-112页 |
攻读学位期间发表的学术论文及参与的基金项目 | 第112-114页 |
独创性声明 | 第114页 |