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扩张性角膜疾病的力学生物学研究

摘要第3-6页
ABSTRACT第6-9页
第一章 绪论第12-30页
    1.1 研究背景与研究意义第12-14页
    1.2 眼球与角膜的结构和功能第14-18页
        1.2.1 眼球的结构与功能第14-15页
        1.2.2 角膜的结构与功能第15-18页
    1.3 医源性角膜膨隆第18-23页
        1.3.1 医源性角膜膨隆介绍第18-19页
        1.3.2 基质金属蛋白酶及其抑制剂第19-20页
        1.3.3 医源性角膜膨隆发生的可能机制第20-22页
        1.3.4 角膜屈光手术后的伤口愈合第22-23页
    1.4 圆锥角膜第23-25页
        1.4.1 圆锥角膜及其可能的发生机制第23-24页
        1.4.2 圆锥角膜患者泪液中炎性因子的变化第24-25页
    1.5 干眼症、异常用力揉眼与角膜膨隆第25-28页
    1.6 力学刺激对细胞外基质重塑的影响第28-29页
    1.7 本文的主要工作第29-30页
第二章 力学刺激与炎性因子共同作用对角膜成纤维细胞外基质代谢的影响第30-64页
    2.1 引言第30-31页
    2.2 实验材料和方法第31-45页
        2.2.1 实验材料及角膜成纤维细胞的提取第31-33页
        2.2.2 角膜成纤维细胞的力学加载第33-34页
        2.2.3 角膜成纤维细胞总RNA的提取第34-35页
        2.2.4 RNA纯度的检测、反转录第35-36页
        2.2.5 实时荧光定量PCR第36-39页
        2.2.6 蛋白定量第39-40页
        2.2.7 明胶酶谱法第40-42页
        2.2.8 western blot第42-44页
        2.2.9 细胞染色第44-45页
    2.3 实验结果第45-61页
        2.3.1 力学牵拉与IL-1β 共同作用对CollagenⅠα1 基因表达的影响第45-47页
        2.3.2 力学牵拉与IL-1β 共同作用对CollagenⅠα2 基因表达的影响第47-50页
        2.3.3 力学牵拉与IL-1β 共同作用对Lumican基因表达的影响第50-53页
        2.3.4 力学牵拉与IL-1β 共同作用对MMP2蛋白表达的影响第53-56页
        2.3.5 力学牵拉与IL-1β 共同作用对MMP9蛋白表达的影响第56-59页
        2.3.6 力学牵拉对细胞形态的影响第59-61页
    2.4 讨论第61-63页
    2.5 本章小结第63-64页
第三章 TNF-α 对圆锥角膜成纤维细胞基质金属蛋白酶及其抑制剂表达的影响第64-76页
    3.1 引言第64页
    3.2 实验材料与方法第64-67页
        3.2.1 实验材料第64-65页
        3.2.2 角膜成纤维细胞的提取第65页
        3.2.3 TNF-α 处理角膜成纤维细胞第65-66页
        3.2.4 蛋白定量第66页
        3.2.5 总RNA的提取与反转录第66页
        3.2.6 western blot检测MMPs的蛋白表达第66页
        3.2.7 RT-PCR检测TIMPs的基因表达第66-67页
        3.2.8 数据分析第67页
    3.3 实验结果第67-73页
        3.3.1 TNF-α 对角膜成纤维细胞MMPs蛋白表达的影响第67-71页
        3.3.2 TNF-α 对角膜成纤维细胞TIMPs基因表达的影响第71-73页
    3.4 讨论第73-74页
    3.5 本章小结第74-76页
第四章 TNF-α 与力学牵拉共同作用对圆锥角膜成纤维细胞增殖与凋亡的影响第76-88页
    4.1 引言第76-77页
    4.2 实验材料与方法第77-80页
        4.2.1 实验材料第77页
        4.2.2 角膜成纤维细胞的力学加载第77-78页
        4.2.3 流式细胞术第78页
        4.2.4 力学加载后细胞增殖的检测第78-79页
        4.2.5 力学加载后细胞凋亡的检测第79-80页
        4.2.6 数据分析第80页
    4.3 实验结果第80-85页
        4.3.1 TNF-α和力学牵拉共同作用对角膜成纤维细胞增殖的影响第80-83页
        4.3.2 TNF-α和力学牵拉共同作用对角膜成纤维细胞凋亡的影响第83-85页
    4.4 讨论第85-86页
    4.5 本章小结第86-88页
第五章 全文总结及展望第88-90页
    5.1 全文总结第88-89页
    5.2 后续工作展望第89-90页
参考文献第90-110页
致谢第110-112页
攻读学位期间发表的学术论文及参与的基金项目第112-114页
独创性声明第114页

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