| 缩略词表 | 第6-8页 |
| 摘要 | 第8-11页 |
| Abstract | 第11-14页 |
| 前言 | 第15-19页 |
| 1、贝氏柯克斯体的主要生物学特性 | 第16页 |
| 2、贝氏柯克斯体的粘附入侵机制 | 第16-17页 |
| 3、Q热疫苗研究 | 第17-18页 |
| 4、本课题研究目的及意义 | 第18-19页 |
| 第一部分 贝氏柯克斯体表面蛋白的分离与鉴定 | 第19-40页 |
| 引言 | 第19页 |
| 1 材料 | 第19-24页 |
| 1.1 鸡胚及菌株 | 第19页 |
| 1.2 主要试剂 | 第19-20页 |
| 1.3 主要仪器 | 第20页 |
| 1.4 主要试剂配制 | 第20-24页 |
| 2 方法 | 第24-30页 |
| 2.1 鸡胚大量培养贝氏柯克斯体 | 第24页 |
| 2.2 差速离心法联合密度梯度离心法纯化贝氏柯克斯体 | 第24-25页 |
| 2.3 乙醚萃取贝氏柯克斯体 | 第25页 |
| 2.4 Gimenez染色和间接免疫荧光（IFA）检查贝氏柯克斯体 | 第25-26页 |
| 2.5 分离纯化贝氏柯克斯体表面蛋白 | 第26-27页 |
| 2.6 双向电泳联合串联质谱鉴定贝氏柯克斯体表面蛋白 | 第27-29页 |
| 2.7 生物信息学分析贝氏柯克斯体表面蛋白 | 第29-30页 |
| 3 结果 | 第30-37页 |
| 3.1 贝氏柯克斯体纯化及染色观察 | 第30页 |
| 3.2 双向电泳联合串联质谱鉴定贝氏柯克斯体表面蛋白 | 第30-31页 |
| 3.3 贝氏柯克斯体表面蛋白生物信息学分析 | 第31-37页 |
| 4 讨论 | 第37-40页 |
| 第二部分 贝氏柯克斯体表面蛋白的血清学分析 | 第40-58页 |
| 引言 | 第40页 |
| 1 材料 | 第40-45页 |
| 1.1 菌株及质粒 | 第40-41页 |
| 1.2 主要试剂 | 第41页 |
| 1.3 主要仪器 | 第41页 |
| 1.4 主要试剂配制 | 第41-45页 |
| 2 方法 | 第45-51页 |
| 2.1 重组质粒的构建 | 第45页 |
| 2.2 重组蛋白的表达和纯化 | 第45-48页 |
| 2.3 蛋白芯片的制备 | 第48页 |
| 2.4 蛋白芯片与感染小鼠血清反应 | 第48-49页 |
| 2.5 蛋白芯片与患者血清反应 | 第49-50页 |
| 2.6 数据分析 | 第50-51页 |
| 3 结果 | 第51-57页 |
| 3.1 贝氏柯克斯体表面蛋白表达纯化 | 第51页 |
| 3.2 蛋白芯片与感染小鼠血清反应 | 第51-53页 |
| 3.3 蛋白芯片与感染患者血清反应 | 第53-57页 |
| 4 讨论 | 第57-58页 |
| 第三部分 贝氏柯克斯体T细胞表位的鉴定及免疫原性研究 | 第58-83页 |
| 引言 | 第58页 |
| 1 材料 | 第58-61页 |
| 1.1 实验动物及菌株 | 第58页 |
| 1.2 主要试剂 | 第58-59页 |
| 1.3 主要仪器 | 第59页 |
| 1.4 主要试剂配制 | 第59-61页 |
| 2 方法 | 第61-70页 |
| 2.1 CD4~+ T细胞表位肽的鉴定及免疫原性研究 | 第61-65页 |
| 2.1.1 CD4~+ T细胞表位肽的在线预测及其合成 | 第61页 |
| 2.1.2 CD4~+ T细胞表位肽的鉴定 | 第61-62页 |
| 2.1.3 CD4~+ T细胞表位肽的筛选 | 第62-63页 |
| 2.1.4 流式细胞术分析细胞因子分泌 | 第63-64页 |
| 2.1.5 CD4~+ T细胞表位肽免疫小鼠及其攻毒 | 第64-65页 |
| 2.1.6 荧光定量PCR分析脾脏DNA样本贝氏柯克斯体拷贝数 | 第65页 |
| 2.1.7 数据分析 | 第65页 |
| 2.2 CD8~+ T细胞表位肽的鉴定及免疫原性研究 | 第65-70页 |
| 2.2.1 CD8~+ T细胞表位肽的在线预测及其合成 | 第65-66页 |
| 2.2.2 CD8~+ T细胞表位肽的鉴定 | 第66页 |
| 2.2.3 流式细胞术分析CD8~+ T细胞的IFN-γ 表达 | 第66-67页 |
| 2.2.4 表达CD8~+ T细胞表位的李斯特杆菌克隆挑取及其计数 | 第67-68页 |
| 2.2.5 表达CD8~+ T细胞表位的李斯特杆菌体外刺激CD8~+ T细胞 | 第68-69页 |
| 2.2.6 表达CD8~+ T细胞表位的李斯特杆菌免疫保护效能评价 | 第69页 |
| 2.2.7 数据分析 | 第69-70页 |
| 3 结果 | 第70-80页 |
| 3.1 CD4~+ T细胞表位肽的鉴定及免疫原性研究 | 第70-74页 |
| 3.1.1 CD4~+ T细胞表位肽在线预测及合成 | 第70页 |
| 3.1.2 CD4~+ T细胞表位肽的鉴定 | 第70页 |
| 3.1.3 CD4~+ T细胞表位肽的筛选 | 第70-72页 |
| 3.1.4 流式细胞术分析CD4~+ T细胞的IFN-γ 和TNF-α 分泌 | 第72-73页 |
| 3.1.5 CD4~+ T细胞表位肽免疫保护性分析 | 第73-74页 |
| 3.2 CD8~+ T细胞表位肽的鉴定及免疫原性研究 | 第74-80页 |
| 3.2.1 CD8~+ T细胞表位肽在线预测及合成 | 第74-75页 |
| 3.2.2 CD8~+ T细胞表位肽的鉴定 | 第75-76页 |
| 3.2.3 流式细胞术分析CD8~+ T细胞的IFN-γ 表达 | 第76-77页 |
| 3.2.4 表达CD8~+ T细胞表位的李斯特杆菌体外激活CD8~+ T细胞 | 第77-79页 |
| 3.2.5 表达CD8~+ T细胞表位的李斯特杆菌免疫保护效能评价 | 第79-80页 |
| 4 讨论 | 第80-83页 |
| 结论 | 第83-84页 |
| 参考文献 | 第84-89页 |
| 附录 | 第89-101页 |
| 个人简历 | 第101-103页 |
| 致谢 | 第103页 |
