| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 第一章 绪论 | 第7-15页 |
| 1.1 磷酸酶与激酶 | 第7页 |
| 1.1.1 磷酸酶 | 第7页 |
| 1.1.2 激酶 | 第7页 |
| 1.1.3 磷酸酶与激酶的关系 | 第7页 |
| 1.2 pH值与微生物生命活动的关系 | 第7-8页 |
| 1.2.1 pH值影响微生物生命活动 | 第7-8页 |
| 1.2.2 微生物代谢影响环境pH | 第8页 |
| 1.2.3 微生物生长pH值范围 | 第8页 |
| 1.3 酵母细胞调控碱性pH途径 | 第8-11页 |
| 1.3.1 Rim101途径 | 第8-11页 |
| 1.3.2 钙调磷酸酯酶（CaN）/Crzl信号途径 | 第11页 |
| 1.3.3 Snf1途径 | 第11页 |
| 1.4 ENA1调控基因表达 | 第11-13页 |
| 1.4.1 离子压力条件下ENA1调控基因表达 | 第11-12页 |
| 1.4.2 碱压力条件下ENA1基因的表达调控 | 第12-13页 |
| 1.5 本课题研究的内容和意义 | 第13-15页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第15-29页 |
| 2.1 实验材料 | 第15-23页 |
| 2.1.1 菌株 | 第15-17页 |
| 2.1.2 质粒 | 第17页 |
| 2.1.3 引物 | 第17-19页 |
| 2.1.4 实验仪器 | 第19-20页 |
| 2.1.5 主要实验试剂及来源 | 第20-21页 |
| 2.1.6 实验所用培养基及配制 | 第21页 |
| 2.1.7 实验所用试剂及配制 | 第21-23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-29页 |
| 2.2.1 菌株的培养与保存 | 第23页 |
| 2.2.2 引物的设计 | 第23页 |
| 2.2.3 PCR扩增目的DNA片段 | 第23页 |
| 2.2.4 酿酒酵母片段DNA的转化 | 第23-24页 |
| 2.2.5 荧光显微镜观察细胞 | 第24页 |
| 2.2.6 玻璃珠法提取酿酒酵母基因组DNA | 第24页 |
| 2.2.7 碱裂解法质粒的小量提取 | 第24-25页 |
| 2.2.8 质粒的构建 | 第25页 |
| 2.2.9 酿酒酵母质粒的转化 | 第25页 |
| 2.2.10 倍比稀释 | 第25-26页 |
| 2.2.11 β-半乳糖苷酶（LacZ）活性的测定 | 第26页 |
| 2.2.12 水母发光蛋白的测定 | 第26-27页 |
| 2.2.13 HIS3MX6-PADH1-HA片段的获得 | 第27页 |
| 2.2.14 Western Blot | 第27-29页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第29-47页 |
| 3.1 编码磷酸酶或激酶的基因缺失对Rim101亚细胞定位的影响 | 第29-35页 |
| 3.1.1 HIS3MX6-PADH1-GFP片段的获得 | 第29页 |
| 3.1.2 将HIS3MX6-PADH1-GFP片段整合到RIM101的 5′端 | 第29-31页 |
| 3.1.3 GFP-Rim101在细胞中的荧光定位观察 | 第31页 |
| 3.1.4 pHAC111-PHO85，pHAC111-SAC1质粒的构建 | 第31-33页 |
| 3.1.5 荧光表型恢复 | 第33-35页 |
| 3.2 SAC1基因的缺失导致ENA1的激活和胞浆中钙离子水平的升高 | 第35-38页 |
| 3.2.1 SAC1基因的缺失导致ENA1的激活 | 第35-36页 |
| 3.2.2 SAC1基因的缺失导致胞浆中钙离子水平的升高 | 第36-38页 |
| 3.3 基因缺失株sac1中Rim101剪切情况的研究 | 第38-42页 |
| 3.3.1 表型验证基因缺失株sac1中Rim101是否有功能 | 第38-39页 |
| 3.3.2 Western Blot检测基因缺失株sac1中Rim101剪切情况 | 第39-40页 |
| 3.3.3 Western Blot检测基因缺失株sac1中Nrg1的表达 | 第40-42页 |
| 3.4 磷酸酶或激酶和Rim101信号途径之间的遗传相互作用 | 第42-47页 |
| 3.4.1 锂离子敏感性基因缺失株的筛选 | 第42-43页 |
| 3.4.2 导入质粒pHAC111-RIM101-531后的表型恢复 | 第43-45页 |
| 3.4.3 ENA1-LacZ检测基因调控Rim101途径的机制 | 第45-47页 |
| 主要结论与展望 | 第47-49页 |
| 主要结论 | 第47页 |
| 展望 | 第47-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-54页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第54页 |
