| 中文摘要 | 第10-12页 |
| ABSTRACT | 第12-14页 |
| 符号说明 | 第15-17页 |
| 第一章 绪论 | 第17-25页 |
| 1.1 糖胺聚糖 | 第17-18页 |
| 1.2 透明质酸 | 第18-20页 |
| 1.2.1 透明质酸的生物学功能 | 第18-19页 |
| 1.2.2 透明质酸的生产 | 第19-20页 |
| 1.3 透明质酸合酶 | 第20-21页 |
| 1.4 糖核苷酸及其合成 | 第21-23页 |
| 1.4.1 糖核苷酸的种类与功能 | 第21-22页 |
| 1.4.2 糖核苷酸的化学合成 | 第22页 |
| 1.4.3 糖核苷酸的酶法合成 | 第22-23页 |
| 1.5 论文内容大纲 | 第23-25页 |
| 第二章 均一透明质酸的酶法合成策略 | 第25-46页 |
| 2.1 引言 | 第25-28页 |
| 2.2 实验材料 | 第28-29页 |
| 2.2.1 载体和菌株 | 第28页 |
| 2.2.2 酶、试剂和耗材 | 第28页 |
| 2.2.3 培养基和缓冲液 | 第28-29页 |
| 2.2.4 主要仪器 | 第29页 |
| 2.3 实验方法 | 第29-34页 |
| 2.3.1 PmHAS的表达与纯化 | 第29-30页 |
| 2.3.2 PmHAS的活性检测 | 第30页 |
| 2.3.3 透明质酸寡糖的合成及分离纯化 | 第30-31页 |
| 2.3.4 PmHAS体外聚合能力的探究 | 第31-32页 |
| 2.3.5 生物素标记的透明质酸的合成及生物学评价 | 第32-33页 |
| 2.3.6 千层纸素化的透明质酸的合成及生物学评价 | 第33-34页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第34-44页 |
| 2.4.1 PmHAS的表达与纯化 | 第34-35页 |
| 2.4.2 PmHAS的酶活检测 | 第35-36页 |
| 2.4.3 透明质酸寡糖的合成及分离纯化 | 第36页 |
| 2.4.4 PmHAS体外聚合能力的探究 | 第36-41页 |
| 2.4.5 生物素标记的透明质酸的合成及生物学评价 | 第41-43页 |
| 2.4.6 千层纸素化透明质酸的合成及生物学评价 | 第43-44页 |
| 2.5 本章小结 | 第44-46页 |
| 第三章 透明质酸-硫酸软骨素嵌合型糖胺聚糖酶法合成研究 | 第46-55页 |
| 3.1 引言 | 第46-48页 |
| 3.2 实验材料 | 第48页 |
| 3.2.1 载体和菌株 | 第48页 |
| 3.2.2 酶、试剂和耗材 | 第48页 |
| 3.2.3 培养基和缓冲液 | 第48页 |
| 3.2.4 主要仪器 | 第48页 |
| 3.3 实验方法 | 第48-51页 |
| 3.3.1 糖基转移酶GA-T与GN-T的表达与纯化 | 第48页 |
| 3.3.2 糖基转移酶GA-T与GN-T的酶活检测 | 第48-49页 |
| 3.3.3 HA-CS嵌合型糖胺聚糖的酶法合成 | 第49-51页 |
| 3.3.4 HA-CS嵌合型糖胺聚糖的分离纯化 | 第51页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第51-54页 |
| 3.4.1 GA-T与GN-T的表达纯化 | 第51-52页 |
| 3.4.2 GA-T与GN-T的酶活检测 | 第52-54页 |
| 3.4.3 HA-CS嵌合型糖胺聚糖的酶法合成 | 第54页 |
| 3.5 本章小结 | 第54-55页 |
| 第四章 一锅多酶体系合成透明质酸及其衍生物 | 第55-70页 |
| 4.1 引言 | 第55-56页 |
| 4.2 实验材料 | 第56-57页 |
| 4.2.1 载体和菌株 | 第56-57页 |
| 4.2.2 酶、试剂和耗材 | 第57页 |
| 4.2.3 培养基和缓冲液 | 第57页 |
| 4.2.4 主要仪器 | 第57页 |
| 4.3 实验方法 | 第57-62页 |
| 4.3.1 蛋白的表达与纯化 | 第57页 |
| 4.3.2 酶活检测 | 第57-58页 |
| 4.3.3 酶浓度比例优化 | 第58-60页 |
| 4.3.4 一锅酶法合成透明质酸 | 第60页 |
| 4.3.5 一锅酶法合成透明质酸的鉴定 | 第60页 |
| 4.3.6 透明质酸衍生物的合成与鉴定 | 第60-61页 |
| 4.3.7 交联透明质酸的合成与鉴定 | 第61-62页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第62-69页 |
| 4.4.1 蛋白的表达与纯化 | 第62页 |
| 4.4.2 酶活检测 | 第62-64页 |
| 4.4.3 酶浓度比例优化 | 第64-65页 |
| 4.4.4 透明质酸的一锅酶法合成及鉴定 | 第65-66页 |
| 4.4.5 透明质酸衍生物的合成与鉴定 | 第66-67页 |
| 4.4.6 交联透明质酸的合成与鉴定 | 第67-69页 |
| 4.5 本章小结 | 第69-70页 |
| 全文总结 | 第70-73页 |
| 本论文取得的创新性成果 | 第71-72页 |
| 本论文的不足之处 | 第72-73页 |
| 附录 | 第73-91页 |
| 参考文献 | 第91-97页 |
| 致谢 | 第97-98页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第98-99页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第99页 |
