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PRRSV感染对细胞周期的影响及其机制研究

摘要第6-8页
Abstract第8-9页
文献综述第13-24页
    第一章 细胞周期研究概况第13-20页
        1.1 细胞周期简介第13页
        1.2 影响细胞周期的因素第13-16页
            1.2.1 细胞周期蛋白(Cyclin)第14页
            1.2.2 细胞周期蛋白依赖性激酶(CDKs)第14-15页
            1.2.3 细胞周期抑制蛋白(CKIs)第15页
            1.2.4 细胞周期检查点(cell cycle checkpoints)第15-16页
        1.3 细胞周期调控研究进展第16-20页
            1.3.1 对细胞增殖调控的探索第16-17页
            1.3.2 细胞周期停滞的分子机制第17-18页
            1.3.3 细胞周期与肿瘤的关系第18-19页
            1.3.4 癌症的治疗第19页
            1.3.5 细胞周期同步化的方法第19-20页
    第二章 病毒感染对细胞周期的影响第20-24页
        2.1 DNA病毒对细胞周期的影响第20-21页
        2.2 RNA病毒对细胞周期的调控第21页
        2.3 猪繁殖与呼吸综合征病毒感染对细胞周期的影响第21-23页
            2.3.1 猪繁殖与呼吸综合征及其病原体概述第21-22页
            2.3.2 PRRSV感染对细胞影响及细胞周期调控第22-23页
        2.4 目的及意义第23-24页
试验研究第24-49页
    第三章 PRRSV感染导致MARC-145 细胞周期阻滞在G2/M期第24-35页
        3.1 材料第24-25页
            3.1.1 细胞与毒株第24页
            3.1.2 主要试剂与耗材第24页
            3.1.3 主要仪器设备第24-25页
        3.2 方法第25-27页
            3.2.1 MARC-145 细胞的培养第25页
            3.2.2 PRRSV增殖与病毒滴度测定第25-26页
            3.2.3 间接免疫荧光检测(IFA)PRRSV N蛋白第26页
            3.2.4 细胞增殖和活力测定第26页
            3.2.5 Annexin V-PI染色测定细胞凋亡第26页
            3.2.6 细胞周期检测第26-27页
        3.3 结果与分析第27-33页
            3.3.1 PRRSV感染抑制MARC-145 细胞增殖第27-31页
            3.3.2 PRRSV感染诱导MARC-145 细胞凋亡第31-32页
            3.3.3 PRRSV感染导致MARC-145 细胞周期阻滞在G2/M期第32-33页
        3.4 讨论第33-34页
        3.5 小结第34-35页
    第四章 PRRSV感染引起的细胞周期G2/M期阻滞与p53/p21信号通路活化有关第35-43页
        4.1 材料第35-36页
            4.1.1 细胞与毒株第35页
            4.1.2 主要试剂与耗材第35-36页
            4.1.3 主要仪器设备第36页
        4.2 方法第36-38页
            4.2.1 细胞培养第36页
            4.2.2 细胞感染与样品收集第36页
            4.2.3 MARC-145 细胞的Nocodazole处理第36页
            4.2.4 Western blot检测第36-37页
            4.2.5 间接免疫荧光(IFA)检测第37页
            4.2.6 免疫共沉淀(CoIP)检测第37-38页
        4.3 结果与分析第38-41页
            4.3.1 PRRSV感染引起MARC-145 细胞CyclinB1表达升高第38页
            4.3.2 PRRSV感染上调磷酸化Cdc2(p-Cdc2)(Tyr15)的表达第38-39页
            4.3.3 PRRSV感染导致p53信号通路上细胞周期调节蛋白表达改变第39-41页
        4.4 讨论第41-42页
        4.5 小结第42-43页
    第五章 PRRSV感染导致的细胞周期G2/M期阻滞与Chk/Cdc25信号通路活化有关第43-49页
        5.1 材料第43-44页
            5.1.1 细胞与毒株第43页
            5.1.2 试剂与耗材第43页
            5.1.3 仪器设备第43-44页
        5.2 方法第44-45页
            5.2.1 细胞培养第44页
            5.2.2 细胞感染与样品收集第44页
            5.2.3 实时荧光定量PCR(qPCR)检测第44-45页
            5.2.4 Western Blot检测第45页
            5.2.5 IFA检测第45页
        5.3 结果与分析第45-47页
            5.3.1 Wee1、Myt1、Cdc25C与 1433σ mRNA转录水平检测结果第45-46页
            5.3.2 PRRSV感染对细胞周期调节蛋白Wee1、Myt1和Cdc25C的影响第46-47页
            5.3.3 PRRSV感染对Chk/Cdc25通路上检测点Chk1的影响第47页
        5.4 讨论第47-48页
        5.5 小结第48-49页
结论第49-50页
参考文献第50-56页
附录第56-59页
缩略词第59-60页
致谢第60-61页
作者简介第61页

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