摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
符号说明 | 第8-12页 |
前言 | 第12-13页 |
1 文献综述 | 第13-26页 |
1.1 鱼类糖代谢概况 | 第14-18页 |
1.1.1 糖代谢主要途径 | 第14-15页 |
1.1.2 糖代谢主要场所 | 第15-16页 |
1.1.3 糖代谢能力 | 第16-17页 |
1.1.4 糖代谢关键酶 | 第17-18页 |
1.2 鱼类GK基因的研究进展 | 第18-24页 |
1.2.1 GK的发现与基因克隆 | 第18-19页 |
1.2.2 GK基因的分布 | 第19-20页 |
1.2.3 生物学功能与调控 | 第20-22页 |
1.2.4 糖类对鱼类GK、PEPCK的影响 | 第22-24页 |
1.2.5 小结 | 第24页 |
1.3 本研究的目的意义及研究内容 | 第24-26页 |
1.3.1 目的意义 | 第24-25页 |
1.3.2 研究内容 | 第25-26页 |
2 齐口裂腹鱼GK基因cDNA全长序列的克隆 | 第26-44页 |
2.1 试验材料 | 第26-27页 |
2.1.1 试验鱼 | 第26页 |
2.1.2 主要试剂 | 第26页 |
2.1.3 主要仪器 | 第26-27页 |
2.1.4 主要试剂配制 | 第27页 |
2.2 试验方法 | 第27-35页 |
2.2.1 组织采样 | 第27-28页 |
2.2.2 总RNA的提取及检测 | 第28-29页 |
2.2.3 制备cDNA | 第29页 |
2.2.4 核心序列的克隆 | 第29-32页 |
2.2.5 RACE扩增 | 第32-34页 |
2.2.6 全长序列的拼接 | 第34页 |
2.2.7 生物信息学分析 | 第34-35页 |
2.3 试验结果 | 第35-43页 |
2.3.1 组织总RNA质量检测 | 第35页 |
2.3.2 GK基因的cDNA全序列 | 第35-36页 |
2.3.3 氨基酸序列分析 | 第36-38页 |
2.3.4 同源性和系统进化分析 | 第38-43页 |
2.4 讨论 | 第43-44页 |
3 齐口裂腹鱼GK基因的时空表达 | 第44-58页 |
3.1 试验材料 | 第44-45页 |
3.1.1 成鱼和产后亲鱼 | 第44页 |
3.1.2 胚胎 | 第44页 |
3.1.3 主要试剂 | 第44页 |
3.1.4 主要仪器 | 第44-45页 |
3.2 试验方法 | 第45-50页 |
3.2.1 组织取样 | 第45页 |
3.2.2 不同发育时期胚胎及仔鱼取样 | 第45-48页 |
3.2.3 总RNA提取及检测 | 第48页 |
3.2.4 制备cDNA模板 | 第48页 |
3.2.5 实时荧光定量PCR | 第48-49页 |
3.2.6 数据分析 | 第49-50页 |
3.3 试验结果 | 第50-55页 |
3.3.1 引物质量检测结果 | 第50-51页 |
3.3.2 GK基因在齐口裂腹鱼成鱼、产后亲鱼中的组织分布 | 第51-53页 |
3.3.3 GK基因在齐口裂腹鱼胚胎及胚后发育过程中的表达情况 | 第53-55页 |
3.4 讨论 | 第55-58页 |
3.4.1 GK基因在齐口裂腹鱼成鱼、产后亲鱼中的组织特异性 | 第55-57页 |
3.4.2 GK基因在齐口裂腹鱼胚胎及胚后发育过程中的表达分析 | 第57-58页 |
4 不同开口饵料对齐口裂腹鱼GK酶活力及基因表达量的影响 | 第58-66页 |
4.1 试验材料 | 第58-59页 |
4.1.1 试验鱼 | 第58页 |
4.1.2 开口饵料 | 第58页 |
4.1.3 主要试剂 | 第58页 |
4.1.4 主要仪器 | 第58-59页 |
4.2 试验方法 | 第59-60页 |
4.2.1 饲养管理 | 第59页 |
4.2.2 试验分组及取样 | 第59页 |
4.2.3 指标测定 | 第59-60页 |
4.2.4 数据分析 | 第60页 |
4.3 试验结果 | 第60-62页 |
4.3.1 GK酶活力 | 第60-61页 |
4.3.2 GK基因表达量 | 第61-62页 |
4.4 讨论 | 第62-66页 |
4.4.1 不同开口饵料对仔鱼GK酶活力的影响 | 第62-64页 |
4.4.2 不同开口饵料对仔鱼GK基因表达量的影响 | 第64-66页 |
5 灌服葡萄糖和可溶性淀粉对GK、PEPCK酶活力及基因表达量的影响 | 第66-83页 |
5.1 试验材料 | 第66页 |
5.1.1 试验鱼 | 第66页 |
5.1.2 主要试剂 | 第66页 |
5.1.3 主要仪器 | 第66页 |
5.1.4 主要试剂配制 | 第66页 |
5.2 试验方法 | 第66-68页 |
5.2.1 饲养管理 | 第66-67页 |
5.2.2 试验分组及取样 | 第67页 |
5.2.3 指标测定 | 第67-68页 |
5.2.4 数据分析 | 第68页 |
5.3 试验结果 | 第68-78页 |
5.3.1 肝糖原 | 第68-69页 |
5.3.2 GK酶活力 | 第69-70页 |
5.3.3 PEPCK酶活力 | 第70-71页 |
5.3.4 GK基因表达量 | 第71-73页 |
5.3.5 PEPCK基因表达量 | 第73-78页 |
5.4 讨论 | 第78-83页 |
5.4.1 不同糖对齐口裂腹鱼肝糖原的影响 | 第78-79页 |
5.4.2 不同糖对齐口裂腹鱼GK、PEPCK酶活力的影响 | 第79-80页 |
5.4.3 不同糖对齐口裂腹鱼GK、PEPCK基因表达量的影响 | 第80-83页 |
6 主要结论 | 第83-84页 |
参考文献 | 第84-93页 |
致谢 | 第93-94页 |
攻读学位期间完成的学术成果目录 | 第94页 |