| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-24页 |
| 1.1 植物脂氧合酶的基本特征 | 第13-15页 |
| 1.1.1 植物脂氧合酶的结构特点 | 第13-14页 |
| 1.1.2 植物脂氧合酶的分布 | 第14页 |
| 1.1.3 植物脂氧合酶的催化特性及分类 | 第14-15页 |
| 1.2 植物脂氧合酶途径 | 第15-18页 |
| 1.2.1 AOS途径 | 第17-18页 |
| 1.2.2 HPL途径 | 第18页 |
| 1.3 植物脂氧合酶的生理功能 | 第18-23页 |
| 1.3.1 植物脂氧合酶与果实成熟软化 | 第18-20页 |
| 1.3.2 植物脂氧合酶与逆境胁迫 | 第20-22页 |
| 1.3.3 植物脂氧合酶与信号分子 | 第22-23页 |
| 1.4 本论文的研究目的与意义 | 第23-24页 |
| 第二章 柿脂氧合酶LOX基因克隆及融合蛋白酶活测定 | 第24-41页 |
| 2.1 试验材料与方法 | 第24-29页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第24页 |
| 2.1.2 质粒载体与菌株 | 第24页 |
| 2.1.3 引物 | 第24页 |
| 2.1.4 培养基与试剂配制 | 第24-25页 |
| 2.1.5 柿果实总RNA的提取及反转录 | 第25-26页 |
| 2.1.6 柿脂氧合酶LOX基因的克隆 | 第26-27页 |
| 2.1.7 原核表达载体构建 | 第27页 |
| 2.1.8 原核表达蛋白与纯化 | 第27-28页 |
| 2.1.9 Western blotting | 第28页 |
| 2.1.10 融合蛋白LOX酶活分析 | 第28页 |
| 2.1.11 生物信息学分析 | 第28-29页 |
| 2.2 结果与分析 | 第29-39页 |
| 2.2.1 柿脂氧合酶LOX基因的克隆 | 第29-30页 |
| 2.2.2 柿脂氧合酶LOX基因的序列分析 | 第30页 |
| 2.2.3 柿脂氧合酶LOX的结构预测 | 第30-36页 |
| 2.2.4 柿脂氧合酶LOX基因的原核表达 | 第36-37页 |
| 2.2.5 柿脂氧合酶LOX基因的融合蛋白酶活性分析 | 第37-39页 |
| 2.3 讨论 | 第39-41页 |
| 第三章 柿脂氧合酶LOX基因与乙烯的关系 | 第41-52页 |
| 3.1 试验材料与方法 | 第41-42页 |
| 3.1.1 植物材料与处理方法 | 第41页 |
| 3.1.2 生理指标测定 | 第41-42页 |
| 3.1.3 柿果实总RNA的提取及反转录 | 第42页 |
| 3.1.4 实时荧光定量PCR (qRT-PCR) | 第42页 |
| 3.2 结果与分析 | 第42-49页 |
| 3.2.1 不同柿品种果实采后贮藏期间的生理变化特性 | 第42-44页 |
| 3.2.2 柿脂氧合酶LOX基因在不同品种中的表达特征 | 第44-46页 |
| 3.2.3 乙烯对两个柿品种果实采后贮藏期间生理特性的影响 | 第46-49页 |
| 3.2.4 两个柿品种脂氧合酶LOX基因对乙烯的响应 | 第49页 |
| 3.3 讨论 | 第49-52页 |
| 第四章 柿果实果皮结构观察和脂氧合酶DKLOX3/4 的免疫定位 | 第52-61页 |
| 4.1 试验材料与方法 | 第52-53页 |
| 4.1.1 电镜样品的取材及前固定 | 第52页 |
| 4.1.2 柿果实扫描电镜的观察 | 第52页 |
| 4.1.3 柿果实超微结构的观察 | 第52-53页 |
| 4.1.4 免疫亚细胞定位分析(免疫金单标记) | 第53页 |
| 4.2 结果与分析 | 第53-59页 |
| 4.2.1 两个品种果实贮藏期间果皮结构的变化 | 第53-55页 |
| 4.2.2 两个品种果实贮藏期间DkLOX3/4 的免疫亚细胞定位分析 | 第55-59页 |
| 4.3 讨论 | 第59-61页 |
| 第五章 柿脂氧合酶DKLOX3/4 基因及其启动子对非生物胁迫的响应 | 第61-83页 |
| 5.1 试验材料与方法 | 第61-66页 |
| 5.1.1 植物材料与处理方法 | 第61页 |
| 5.1.2 质粒载体与菌株 | 第61-62页 |
| 5.1.3 启动子活性研究相关试剂配制 | 第62页 |
| 5.1.4 核酸的提取 | 第62页 |
| 5.1.5 实时荧光定量PCR(qRT-PCR) | 第62页 |
| 5.1.6 染色体步移技术(Genome Walking) | 第62-63页 |
| 5.1.7 植物瞬时表达载体构建 | 第63-65页 |
| 5.1.8 农杆菌介导的遗传转化 | 第65页 |
| 5.1.9 农杆菌介导启动子融合表达载体在烟草和番茄中的瞬时表达 | 第65页 |
| 5.1.10 启动子活性检测试验 | 第65-66页 |
| 5.2 结果与分析 | 第66-80页 |
| 5.2.1 柿脂氧合酶DkLOX3/4 基因对物理胁迫的响应 | 第66-68页 |
| 5.2.2 柿脂氧合酶DkLOX3/4 基因对不同外源激素的响应 | 第68-70页 |
| 5.2.3 柿脂氧合酶DkLOX3/4 基因启动子的克隆与序列分析 | 第70-72页 |
| 5.2.4 柿脂氧合酶DkLOX3/4 基因启动子的活性分析 | 第72-75页 |
| 5.2.5 柿脂氧合酶DkLOX3/4 基因启动子对非生物胁迫的响应 | 第75-80页 |
| 5.3 讨论 | 第80-83页 |
| 第六章 柿果实丙烯和 1-MCP处理的转录组分析 | 第83-89页 |
| 6.1 试验材料与方法 | 第83-84页 |
| 6.1.1 样品采集及RNA提取 | 第83页 |
| 6.1.2 文库构建及测序 | 第83页 |
| 6.1.3 序列组装及数据分析 | 第83-84页 |
| 6.2 结果与分析 | 第84-87页 |
| 6.2.1 转录组装配及差异表达基因的检测 | 第84页 |
| 6.2.2 基因功能注释及GO分析 | 第84-86页 |
| 6.2.3 差异基因KEGG富集分析 | 第86-87页 |
| 6.3 讨论 | 第87-89页 |
| 第七章 柿脂氧合酶 13-LOX途径与果实成熟软化 | 第89-100页 |
| 7.1 试验材料与方法 | 第89页 |
| 7.2 结果与分析 | 第89-96页 |
| 7.2.1 柿果实脂氧合酶LOX代谢相关基因的筛选 | 第89-91页 |
| 7.2.2 柿果实脂氧合酶LOX代谢相关基因的克隆、序列分析及qRT-PCR验证 | 第91-94页 |
| 7.2.3 柿果实脂氧合酶LOX代谢相关基因对物理胁迫的响应 | 第94-95页 |
| 7.2.4 柿果实脂氧合酶LOX代谢相关基因对不同外源激素的响应 | 第95-96页 |
| 7.3 讨论 | 第96-100页 |
| 第八章 结论与创新点 | 第100-102页 |
| 8.1 结论 | 第100-101页 |
| 8.2 主要创新点 | 第101-102页 |
| 参考文献 | 第102-116页 |
| 附录 | 第116-120页 |
| 缩略词 | 第120-121页 |
| 致谢 | 第121-122页 |
| 作者简介 | 第122-123页 |
