羊地方性鼻内腺瘤细胞癌变相关基因启动子区甲基化程度和转录水平的研究
| 中文摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-9页 |
| 简写词表 | 第9-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-22页 |
| 1. DNA甲基化原因 | 第12-13页 |
| 2. DNA甲基化与CpG岛 | 第13-14页 |
| 3. DNA甲基化和肿瘤的关系 | 第14-17页 |
| ·肿瘤细胞的低甲基化 | 第14-15页 |
| ·肿瘤细胞的高甲基化 | 第15-17页 |
| ·DNA修复基因的高甲基化 | 第15-16页 |
| ·抑癌基因高甲基化 | 第16-17页 |
| 4. DNA甲基化的生物学作用 | 第17-18页 |
| ·甲基化导致基因沉默 | 第17-18页 |
| ·去甲基化为基因的表达创造了适宜的环境 | 第17页 |
| ·直接作用 | 第17页 |
| ·间接作用 | 第17-18页 |
| ·影响基因错配修复 | 第18页 |
| ·基因胞嘧啶到胸腺嘧啶的突变 | 第18页 |
| 5. DNA甲基化在肿瘤研究中的应用 | 第18-20页 |
| ·DNA甲基化在鼻咽癌研究中的应用 | 第19页 |
| ·DNA甲基化在地方性鼻内腺瘤研究中的作用 | 第19-20页 |
| 6. 小结与展望 | 第20页 |
| 7. 研究目的及意义 | 第20-22页 |
| 第二章 细胞癌变相关基因启动子甲基化状态检测 | 第22-36页 |
| 1. 试验材料 | 第22-25页 |
| ·材料 | 第22页 |
| ·主要仪器 | 第22页 |
| ·主要试剂 | 第22-23页 |
| ·甲基化引物的设计与合成 | 第23-25页 |
| 2. 试验方法 | 第25-27页 |
| ·对照组健康羊检疫 | 第25-26页 |
| ·细胞癌变相关基因启动子甲基化状态检测 | 第26-27页 |
| ·DNA样本抽提 | 第26页 |
| ·外周血DNA的CpG甲基化酶修饰 | 第26页 |
| ·DNA的亚硫酸氢盐修饰 | 第26-27页 |
| ·甲基化特异性PCR检测 | 第27页 |
| 3. 结果 | 第27-32页 |
| ·对照组健康羊检疫 | 第27-28页 |
| ·细胞癌变相关基因启动子甲基化状态结果 | 第28-32页 |
| 4. 分析与讨论 | 第32-36页 |
| 第三章 细胞癌变相关基因转录水平差异的检测 | 第36-56页 |
| 1. 试验材料 | 第36-38页 |
| ·材料 | 第36页 |
| ·主要仪器 | 第36页 |
| ·主要试剂 | 第36-37页 |
| ·荧光定量PCR引物的设计与合成 | 第37-38页 |
| 2. 试验方法 | 第38-43页 |
| ·RT-PCR方法的建立 | 第38-42页 |
| ·阳性标准品的制备 | 第38-40页 |
| ·荧光定量PCR反应及条件优化 | 第40-41页 |
| ·特异性检测 | 第41-42页 |
| ·熔解曲线和标准曲线的建立 | 第42页 |
| ·可重复性和再现性评估 | 第42页 |
| ·临床样品的检测 | 第42-43页 |
| 3. 结果 | 第43-51页 |
| ·RT-PCR方法的建立结果 | 第43-49页 |
| ·细胞癌变相关基因PCR扩增 | 第43-44页 |
| ·荧光定量PCR条件的优化 | 第44页 |
| ·敏感性 | 第44页 |
| ·特异性 | 第44-45页 |
| ·重复性与再现性 | 第45-47页 |
| ·标准曲线的绘制 | 第47-49页 |
| ·细胞癌变相关基因基因临床样品的检测 | 第49-51页 |
| 4. 分析与讨论 | 第51-56页 |
| 结论与创新 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第68页 |
