| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 1 研究背景 | 第12-24页 |
| ·植物耐旱性的研究概况 | 第12-19页 |
| ·干旱的状况及其对植物的影响 | 第12-13页 |
| ·耐旱性转基因玉米的研究概况 | 第13-14页 |
| ·植物耐旱性机制 | 第14-15页 |
| ·植物耐旱性鉴定指标 | 第15-17页 |
| ·形态和产量指标 | 第15页 |
| ·生理指标 | 第15-16页 |
| ·生化指标 | 第16-17页 |
| ·PEG模拟干旱胁迫的研究进展 | 第17-19页 |
| ·PEG简介 | 第17-18页 |
| ·PEG模拟干旱胁迫的研究进展 | 第18-19页 |
| ·同源异型域-亮氨酸拉链蛋白(Homedomain-leucine Zipper,HD-ZIP)基因家族的研究现状 | 第19-21页 |
| ·HD-ZIP蛋白的结构与分类 | 第19页 |
| ·HD-Zip Ⅳ类转录因子的功能研究 | 第19-21页 |
| ·AtEDT1基因的研究进展 | 第21-23页 |
| ·AtEDT1基因的来源及结构功能研究 | 第21-22页 |
| ·AtEDT1基因的应用 | 第22-23页 |
| ·转基因玉米的转化受体及技术 | 第23-24页 |
| ·转基因玉米的转化受体系统 | 第23-24页 |
| ·转基因玉米的转化技术 | 第24页 |
| 2 本研究的目的意义 | 第24-25页 |
| 3 材料与方法 | 第25-41页 |
| ·实验材料 | 第25-28页 |
| ·植物材料 | 第25页 |
| ·菌株及载体 | 第25页 |
| ·主要试剂及试剂盒 | 第25-26页 |
| ·常用基本溶液 | 第26页 |
| ·培养基 | 第26-27页 |
| ·实验仪器 | 第27-28页 |
| ·技术路线 | 第28页 |
| ·实验方法 | 第28-31页 |
| ·扩繁表达载体质粒pCB2004-EDT1 | 第28-29页 |
| ·质粒提取 | 第29-30页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备 | 第30-31页 |
| ·表达载体质粒转化农杆菌 | 第31页 |
| ·玉米的遗传转化 | 第31-35页 |
| ·农杆菌介导的玉米愈伤组织遗传转化 | 第31-33页 |
| ·玉米愈伤组织的培养 | 第31-32页 |
| ·玉米愈伤组织侵染及共培养 | 第32页 |
| ·清洗侵染的玉米愈伤组织 | 第32页 |
| ·玉米愈伤组织的恢复及筛选培养 | 第32页 |
| ·玉米愈伤组织的分化培养 | 第32-33页 |
| ·再生苗的炼苗、移栽及定植 | 第33页 |
| ·农杆菌介导的玉米茎尖组织遗传转化 | 第33-35页 |
| ·玉米种子的灭菌 | 第33-34页 |
| ·玉米茎尖组织的侵染 | 第34页 |
| ·再生苗的移栽 | 第34页 |
| ·再生苗的筛选与定植 | 第34-35页 |
| ·T_0转基因植株的检测 | 第35-36页 |
| ·T_0代植株总DNA的提取 | 第35页 |
| ·T_0代转化植株DNA的PCR检测 | 第35-36页 |
| ·高代转基因植株的检测 | 第36页 |
| ·转化茎尖组织的T_3代阳性转化植株基因的表达量分析 | 第36-39页 |
| ·模板cDNA制备 | 第36-39页 |
| ·总RNA的提取 | 第36-37页 |
| ·总RNA的反转录 | 第37-38页 |
| ·cDNA的效果检测 | 第38-39页 |
| ·T_3代植株目的基因AtEDT1的表达量分析 | 第39页 |
| ·转化茎尖组织的T_3代转基因植株农艺性状的测定 | 第39页 |
| ·T_3代茎尖组织转基因植株的PEG-6000模拟干旱胁迫实验 | 第39-41页 |
| ·材料 | 第39-40页 |
| ·实验方法 | 第40-41页 |
| ·实验材料的培养 | 第40页 |
| ·阳性转化植株的确定 | 第40-41页 |
| ·15%PEG-6000模拟干旱胁迫处理 | 第41页 |
| 4 结果与分析 | 第41-56页 |
| ·扩繁表达载体pCB2004-EDT1 | 第41-42页 |
| ·表达载体质粒pCB2004-EDT1转化农杆菌菌液 | 第42-43页 |
| ·AtEDT1基因的遗传转化 | 第43-49页 |
| ·农杆菌介导的玉米愈伤组织遗传转化 | 第43-45页 |
| ·农杆菌介导的玉米茎尖组织遗传转化 | 第45-49页 |
| ·T_3代茎尖组织阳性转化植株AtEDT1基因的表达量分析 | 第49-51页 |
| ·cDNA的制备 | 第49-50页 |
| ·目的基因AtEDT1的表达量分析 | 第50-51页 |
| ·T_3代茎尖组织转基因植株农艺性状的测定 | 第51-52页 |
| ·T_3代茎尖组织转基因植株的PEG-6000模拟干旱胁迫实验 | 第52-56页 |
| ·阳性植株的确定 | 第52-53页 |
| ·叶绿素含量 | 第53-54页 |
| ·生物量 | 第54-56页 |
| ·根系扫描 | 第56页 |
| 5 讨论 | 第56-60页 |
| 6 进一步研究计划 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
