摘要 | 第1-10页 |
ABSTRACT | 第10-13页 |
第一篇 文献综述 | 第13-43页 |
第一章 2'-5'-寡腺苷酸合成酶的研究进展 | 第13-23页 |
1 2'-5'-寡腺苷酸合成酶的生物学特征 | 第13-15页 |
·2'-5'-寡腺苷酸合成酶家族基因组成 | 第13-15页 |
·2'-5'-寡腺苷酸合成酶蛋白质结构 | 第15页 |
2 2'-5'-寡腺苷酸合成酶的活化机制 | 第15-17页 |
3 2'-5'-寡腺苷酸合成酶家族的起源 | 第17页 |
4 2'-5'寡腺苷酸合成酶家族抗病毒的分子机制研究进展 | 第17-20页 |
·依赖于OAS/RNase L途径的抗病毒作用 | 第18-19页 |
·不依赖于RNase L途径的抗病毒作用 | 第19-20页 |
5 2'-5'寡腺苷酸系统的生物学功能 | 第20页 |
6 2'-5'寡腺苷酸合成酶家族的单核苷酸多态性分析 | 第20-23页 |
第二章 日本脑炎病毒及其疫苗的研究进展 | 第23-35页 |
1 日本脑炎病毒流行病学特征 | 第23-25页 |
·生态学和流行病学 | 第23页 |
·遗传和抗原多样性 | 第23-24页 |
·传播特征 | 第24-25页 |
·临诊症状 | 第25页 |
2 日本脑炎病毒的分子生物学特性 | 第25-28页 |
·基因组结构特征 | 第26页 |
·蛋白结构特征及功能 | 第26-27页 |
·乙型脑炎病毒的复制过程 | 第27-28页 |
3 日本脑炎病毒疫苗的研究进展 | 第28-31页 |
·鼠脑纯化灭活疫苗 | 第28-29页 |
·细胞培养减毒活疫苗 | 第29页 |
·细胞培养灭活疫苗 | 第29-30页 |
·基因工程嵌合减毒活疫苗 | 第30页 |
·痘病毒载体重组疫苗 | 第30页 |
·DNA疫苗 | 第30-31页 |
4 日本脑炎病毒的诊断方法 | 第31-35页 |
·临床综合诊断 | 第31页 |
·病毒分离与鉴定 | 第31页 |
·血清学诊断 | 第31-32页 |
·分子生物学检测技术 | 第32-35页 |
参考文献 | 第35-43页 |
第二篇 实验部分 | 第43-101页 |
第三章 猪源OAS2基因的表达及抗血清的制备 | 第43-59页 |
摘要 | 第43页 |
1 实验材料 | 第43-45页 |
·细胞株 | 第43-44页 |
·菌种、质粒 | 第44页 |
·实验动物 | 第44页 |
·主要试剂 | 第44页 |
·主要仪器 | 第44页 |
·引物设计与合成 | 第44-45页 |
·主要溶液的配制 | 第45页 |
2 实验方法 | 第45-52页 |
·猪源OAS2基因的扩增 | 第45-47页 |
·猪源OAS2原核表达载体的构建 | 第47-50页 |
·重组猪源OAS2蛋白的表达 | 第50-51页 |
·猪源OAS2多克隆抗体的制备 | 第51-52页 |
·猪源OAS2多克隆抗体的鉴定 | 第52页 |
3 实验结果 | 第52-55页 |
·猪源OAS2基因的PCR扩增 | 第52页 |
·重组猪源OAS2原核表达质粒的鉴定 | 第52-53页 |
·重组质粒pET-OAS2的表达及鉴定 | 第53-54页 |
·pOAS2抗血清的鉴定 | 第54-55页 |
4 讨论 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-57页 |
ABSTRACT | 第57-59页 |
第四章 猪源OAS基因家族抗JEV感染的初步研究 | 第59-85页 |
摘要 | 第59-60页 |
1 实验材料 | 第60-62页 |
·细胞和毒株 | 第60页 |
·质粒载体 | 第60页 |
·主要试剂 | 第60-61页 |
·主要仪器 | 第61页 |
·引物设计与合成 | 第61-62页 |
2 实验方法 | 第62-68页 |
·猪源OAS基因家族真核表达载体的构建 | 第62-64页 |
·去内毒素小提pFlag-pOAS1b和pcDNA-pOAS2质粒 | 第64页 |
·噬斑形成试验测JEV滴度 | 第64-65页 |
·Real-Time PCR检测PK-15细胞内OAS基因家族的表达量 | 第65-66页 |
·Real-Time PCR检测PK-15细胞中JEV滴度变化量 | 第66-67页 |
·猪源OAS基因家族对JEV增殖影响的间接免疫荧光试验 | 第67页 |
·Western Blot试验检测猪源OAS基因家族对JEV增殖的影响 | 第67-68页 |
·Western Blot试验检测PK-15细胞转染OAS2 siRNA后OAS2蛋白表达量的变化 | 第68页 |
·PK-15细胞RNAi OAS2对JEV增殖的影响 | 第68页 |
3 实验结果 | 第68-78页 |
·猪源OAS基因家族真核表达载体的构建 | 第68-70页 |
·重组PFlag-pOASlb真核表达载体的鉴定 | 第68-69页 |
·重组pcDNA-pOAS2真核表达载体的鉴定 | 第69-70页 |
·猪干扰素对JEV增殖的抑制作用 | 第70-71页 |
·猪干扰素诱导猪源OAS基因家族的表达 | 第71-72页 |
·猪干扰素和JEV强毒株共同作用PK细胞OAS表达量变化特征 | 第72-73页 |
·PK-15细胞过表达pOAS蛋白对JEV增殖的影响 | 第73-78页 |
4 讨论 | 第78-81页 |
参考文献 | 第81-83页 |
ABSTRACT | 第83-85页 |
第五章 猪源OAS1编码区SNP特征 | 第85-101页 |
摘要 | 第85-86页 |
1 实验材料 | 第86-87页 |
·组织样品 | 第86页 |
·主要试剂 | 第86页 |
·主要仪器 | 第86页 |
·溶液的配置 | 第86页 |
·引物设计与合成 | 第86-87页 |
2 实验方法 | 第87-89页 |
·猪基因组DNA的提取 | 第87页 |
·猪OAS1编码区外显子的获得 | 第87-88页 |
·PCR产物的回收纯化 | 第88页 |
·试验数据的统计和处理 | 第88-89页 |
3 实验结果 | 第89-96页 |
·PCR扩增结果 | 第89-90页 |
·pOAS1a和pOAS1b基因外显子1-6的比较分析 | 第90-92页 |
·pOAS1a基因编码区外显子的SNP检测 | 第92-93页 |
·pOAS1b基因编码区外显子的SNP检测 | 第93-94页 |
·健康猪及乙脑发病猪OAS1编码区SNP特征 | 第94-96页 |
4 讨论 | 第96-98页 |
参考文献 | 第98-99页 |
ABSTRACT | 第99-101页 |
全文总结 | 第101-103页 |
致谢 | 第103页 |