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百合GPAT基因的定位及功能研究

摘要第1-11页
Abstract第11-13页
前言第13-15页
第一章 综述第15-22页
   ·低温对植物的影响第15-16页
   ·GPAT作用机理及其在植物抗寒方面的概述第16-17页
   ·GPAT基因家族的研究进展第17-19页
   ·实时荧光定量技术及应用第19-20页
     ·实时荧光定量技术的介绍第19-20页
     ·实时荧光定量技术的应用第20页
   ·本论文研究的内容和意义第20-22页
第二章 岷江百合GPAT的亚细胞定位第22-39页
   ·试验材料第22-24页
     ·植物材料第22页
     ·试验材料的处理第22页
     ·药品和仪器第22-24页
     ·菌株和质粒第24页
     ·引物设计第24页
   ·试验方法第24-33页
     ·百合组培苗RNA的提取第24-25页
     ·反转录合成第一链cDNA第25页
     ·LiGPAT基因的扩增及重组克隆载体pGMT-LiGPAT的构建第25-29页
     ·pEGAD-GFP-LiGPAT融合表达载体的构建第29-32页
     ·LiGPAT的亚细胞定位第32-33页
   ·结果与分析第33-37页
     ·岷江百合总RNA的提取第33页
     ·LiGPAT基因的克隆第33页
     ·重组克隆载体pGMT-LiGPAT的PCR鉴定与双酶切鉴定第33-35页
     ·融合表达载体pEGAD-LiGPAT的PCR鉴定与双酶切鉴定第35-36页
     ·岷江百合GPAT亚细胞定位在线预测第36页
     ·拟南芥原生质体中LiGPAT的亚细胞定位第36-37页
   ·讨论第37-39页
第三章 低温处理下百合GPAT基因在拟南芥中表达的分析第39-54页
   ·试验材料及用品第39页
     ·试验材料第39页
     ·药品和仪器第39页
   ·试验方法第39-41页
     ·试验材料的处理第39页
     ·各组织总RNA提取第39-40页
     ·反转录第40页
     ·引物合成第40页
     ·引物的检测第40-41页
     ·qRT-PCR检测GPAT基因在拟南芥不同组织表达量第41页
   ·结果与分析第41-52页
     ·RNA质量检测第41-44页
     ·荧光定量引物的检测第44-47页
     ·实时荧光定量PCR数据分析第47-52页
   ·结论与讨论第52-54页
第四章 百合GPAT基因在拟南芥各组织中的表达分析第54-67页
   ·试验材料第54-56页
     ·植物材料第54页
     ·试验材料的处理第54页
     ·药品和仪器第54-56页
   ·试验方法第56-59页
     ·拟南芥各组织蛋白的提取第56-57页
     ·BCA法测定蛋白浓度第57页
     ·SDS-PAGE凝胶电泳第57-58页
     ·转膜第58页
     ·封闭第58页
     ·抗体孵育第58-59页
     ·化学发光、显影、定影第59页
   ·结果与分析第59-65页
     ·蛋白浓度的测定第59-62页
     ·转百合GPAT基因拟南芥各组织蛋白SDS-PAGE检测第62-64页
     ·拟南芥各组织蛋白western blot杂交第64-65页
   ·讨论第65-67页
参考文献第67-72页
附录第72-74页
致谢第74-75页
攻读学位期间发表的学术文章第75页

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