| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-21页 |
| ·猪繁殖与呼吸系统综合征概述 | 第10-11页 |
| ·PRRSV的分类 | 第10页 |
| ·PRRSV的形态及理化特征 | 第10-11页 |
| ·PRRSV的细胞培养特性 | 第11页 |
| ·PRRSV的感染 | 第11页 |
| ·PRRSV的分子生物学研究进展 | 第11-17页 |
| ·PRRSV的基因组结构 | 第11-12页 |
| ·PRRSV的非结构蛋白 | 第12-14页 |
| ·PRRSV的结构蛋白 | 第14-17页 |
| ·蛋白质相互作用研究方法 | 第17-19页 |
| ·酵母双杂交系统 | 第17-18页 |
| ·其他蛋白质相互作用方法 | 第18-19页 |
| ·研究内容及意义 | 第19-21页 |
| 第二章 NSP9与N蛋白互作的关键区域的鉴定 | 第21-30页 |
| ·材料与试剂 | 第21-22页 |
| ·菌株与质粒 | 第21页 |
| ·主要试剂盒及试剂 | 第21页 |
| ·主要溶液的配方 | 第21-22页 |
| ·主要仪器 | 第22页 |
| ·方法 | 第22-26页 |
| ·重组质粒pGBKT7-NSP9X的构建 | 第22-25页 |
| ·大肠杆菌DH5α 感受态的制备及转化 | 第25页 |
| ·阳性克隆的筛选及酶切鉴定 | 第25页 |
| ·酵母感受态细胞的制备 | 第25-26页 |
| ·质粒DNA的转化 | 第26页 |
| ·结果与分析 | 第26-30页 |
| ·重组质粒pGBKT7-NSP9X的构建及鉴定 | 第26-28页 |
| ·酵母双杂交相互作用结果 | 第28-30页 |
| 第三章 酵母双杂交技术检测不同PRRSV毒株NSP9与N的互作 | 第30-34页 |
| ·材料与试剂 | 第30页 |
| ·方法 | 第30-31页 |
| ·重组质粒的构建 | 第30-31页 |
| ·其他方法 | 第31页 |
| ·结果与分析 | 第31-34页 |
| ·重组质粒的构建及鉴定 | 第31-32页 |
| ·酵母双杂交相互作用结果 | 第32-34页 |
| 第四章 Pull-down检测TA-12毒株NSP9与N蛋白的互作 | 第34-42页 |
| ·材料与试剂 | 第34-35页 |
| ·菌株与质粒 | 第34页 |
| ·主要溶液的配方 | 第34-35页 |
| ·主要仪器 | 第35页 |
| ·方法 | 第35-38页 |
| ·重组质粒的构建 | 第35-36页 |
| ·大肠杆菌DH5α 感受态的制备及转化 | 第36页 |
| ·阳性克隆的筛选及酶切鉴定 | 第36页 |
| ·融合蛋白的表达 | 第36-37页 |
| ·融合蛋白HIS-NSP9的纯化 | 第37页 |
| ·融合蛋白GST-N的纯化 | 第37-38页 |
| ·Pull-down实验 | 第38页 |
| ·结果与分析 | 第38-42页 |
| ·重组质粒的构建及鉴定 | 第38-39页 |
| ·重组蛋白的表达及纯化 | 第39-41页 |
| ·Pull-down实验 | 第41-42页 |
| 第五章 抑制剂对PRRSV复制的影响 | 第42-46页 |
| ·材料与试剂 | 第42页 |
| ·动物细胞和PRRSV毒株 | 第42页 |
| ·主要试剂 | 第42页 |
| ·主要仪器 | 第42页 |
| ·方法 | 第42-44页 |
| ·测定抑制剂对病毒滴度的影响 | 第42页 |
| ·测定抑制剂对病毒RNA水平的影响 | 第42-44页 |
| ·结果与分析 | 第44-46页 |
| ·抑制剂对病毒滴度的影响 | 第44页 |
| ·抑制剂对病毒mRNA水平的影响 | 第44-46页 |
| 第六章 讨论 | 第46-48页 |
| 参考文献 | 第48-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 作者简介 | 第56页 |