| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 第一章 引言 | 第9-20页 |
| ·水产疫苗的概述 | 第9-13页 |
| ·疫苗的种类 | 第9-12页 |
| ·疫苗的接种途径 | 第12-13页 |
| ·蛋白转导结构域(PTD)的研究现状 | 第13-16页 |
| ·PTD-TAT的认识过程 | 第13-14页 |
| ·PTD-TAT的透膜机制 | 第14-15页 |
| ·PTD-TAT的应用研究 | 第15页 |
| ·PTD-TAT于水产疫苗开发中的研究 | 第15-16页 |
| ·副溶血弧菌及其致病因子 | 第16-19页 |
| ·副溶血弧菌 | 第16-17页 |
| ·副溶血弧菌的致病因子 | 第17-19页 |
| ·本课题主要研究内容及创新之处 | 第19-20页 |
| ·本课题主要研究内容 | 第19页 |
| ·本课题的创新之处 | 第19-20页 |
| 第二章 TAT跨膜转运能力的研究 | 第20-42页 |
| ·实验材料与仪器 | 第20-24页 |
| ·实验菌株与质粒 | 第20页 |
| ·实验动物与细胞 | 第20页 |
| ·实验试剂与试剂盒 | 第20-21页 |
| ·仪器设备 | 第21-22页 |
| ·主要溶液和缓冲液配制 | 第22-24页 |
| ·实验方法 | 第24-31页 |
| ·带有GFP基因的pQBI63质粒的提取 | 第24页 |
| ·重组质粒pET28a(+)-GFP-TAT的构建 | 第24-26页 |
| ·感受态细胞的制备和转化 | 第26-27页 |
| ·重组质粒pET28a(+)-GFP-TAT的验证 | 第27页 |
| ·重组蛋白的诱导表达 | 第27页 |
| ·重组蛋白存在形态的鉴定 | 第27-28页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第28页 |
| ·TAT介导蛋白的跨膜转导作用 | 第28-29页 |
| ·TAT介导蛋白在水产免疫中的应用可能 | 第29-31页 |
| ·结果与讨论 | 第31-40页 |
| ·目的基因的扩增 | 第31页 |
| ·重组质粒的验证 | 第31-33页 |
| ·重组蛋白GFP-TAT的表达与纯化 | 第33-35页 |
| ·重组蛋白GFP-TAT的体外活性研究 | 第35-36页 |
| ·GFP-TAT的免疫作用 | 第36-40页 |
| ·本章小结 | 第40-42页 |
| 第三章 重组蛋白OmpK-TAT原核表达载体的构建与表达 | 第42-53页 |
| ·实验材料与仪器 | 第42-43页 |
| ·实验菌株与质粒 | 第42页 |
| ·实验试剂与试剂盒 | 第42页 |
| ·仪器设备 | 第42页 |
| ·主要溶液和缓冲液配制 | 第42-43页 |
| ·实验方法 | 第43-46页 |
| ·副溶血弧菌基因组总DNA的获得 | 第43页 |
| ·重组质粒pET28a(+)-OmpK和pET28a(+)-OmpK-TAT的构建 | 第43-45页 |
| ·感受态细胞的制备和转化 | 第45页 |
| ·重组质粒pET28a(+)-OmpK和pET28a(+)-OmpK-TAT的验证 | 第45页 |
| ·重组蛋白的诱导表达 | 第45页 |
| ·重组蛋白存在形态的鉴定 | 第45页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第45-46页 |
| ·结果与讨论 | 第46-51页 |
| ·目的基因的扩增 | 第46页 |
| ·重组质粒的验证 | 第46-49页 |
| ·重组蛋白OmpK和OmpK-TAT的表达与纯化 | 第49-51页 |
| ·本章小结 | 第51-53页 |
| 第四章 重组蛋白OmpK-TAT的免疫学特性及免疫保护性作用 | 第53-58页 |
| ·实验材料与仪器 | 第53页 |
| ·实验动物 | 第53页 |
| ·实验菌株与试剂 | 第53页 |
| ·仪器设备 | 第53页 |
| ·实验方法 | 第53-55页 |
| ·BCA蛋白定量 | 第53-54页 |
| ·小鼠抗OmpK血清的制备 | 第54页 |
| ·小鼠抗OmpK血清抗体效价的测定 | 第54-55页 |
| ·欧洲鳗鲡的浸泡免疫 | 第55页 |
| ·抗体效价的测定 | 第55页 |
| ·重组蛋白Ompk-TAT和OmpK免疫保护性研究 | 第55页 |
| ·结果与讨论 | 第55-57页 |
| ·小鼠抗OmpK血清的抗体效价 | 第55-56页 |
| ·欧洲鳗鲡免疫后血清抗体效价的比较 | 第56页 |
| ·两种疫苗对欧洲鳗鲡的免疫保护 | 第56-57页 |
| ·本章小结 | 第57-58页 |
| 结论与展望 | 第58-60页 |
| 结论 | 第58-59页 |
| 展望与建议 | 第59-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-65页 |
| 附录 | 第65-71页 |
| 个人简历 | 第71页 |
