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适度干旱胁迫调控甘草次级代谢分子机制的初步研究

目录第1-6页
中文摘要第6-8页
Abstract第8-10页
第一章 引言第10-18页
 1 甘草的资源现状第10-11页
 2 甘草的化学成分与药理作用第11-14页
 3 甘草对干旱胁迫的适应性第14-15页
   ·植物对干旱胁迫的响应模式第14页
   ·干旱胁迫对甘草的影响第14-15页
 4 转录组测序技术在植物学研究中的应用第15-16页
   ·转录组测序技术简介第15页
   ·转录组测序在药用植物次级代谢研究中的应用第15-16页
 5 本研究的目的及意义第16-18页
   ·研究目的第16页
   ·研究意义第16-18页
第二章 适度干旱胁迫对甘草有效成分积累的调控第18-32页
 1 材料与仪器第18-19页
   ·材料第18页
   ·仪器第18页
   ·主要试剂第18-19页
 2 方法第19-22页
   ·甘草栽培与干旱胁迫第19-21页
   ·甘草中甘草酸和甘草苷的含量测定第21-22页
 3 方法学考察第22-23页
   ·线性关系第22页
   ·精密度试验第22页
   ·重现性试验第22页
   ·稳定性试验第22页
   ·加样回收试验第22-23页
 4 结果第23-30页
   ·干旱胁迫实验第23-24页
   ·HPLC 色谱条件的建立与方法学考察第24-30页
   ·甘草酸及甘草苷含量测定结果第30页
 5 分析与讨论第30-32页
第三章 基于转录组测序技术分析干旱胁迫调控甘草有效成分积累的分子机制第32-42页
 1 材料第32页
 2 方法第32-35页
   ·甘草根总 RNA 的提取、片段化与 cDNA 合成和测序第32-33页
   ·测序结果分析第33-35页
 3 结果与分析第35-40页
   ·测序数据产量第35页
   ·Unigene 的功能注释第35-36页
   ·Unigene 的 GO 分类第36-37页
   ·Unigene 的代谢通路分析第37-38页
   ·预测编码蛋白质第38页
   ·Unigene 表达差异分析第38-40页
 4 讨论第40-42页
第四章 干旱胁迫对甘草根中紫杉烯 5-α羟化酶和鲨烯合酶基因表达的调控第42-53页
 1 材料与仪器第42-43页
   ·材料第42页
   ·主要仪器设备第42-43页
   ·主要试剂第43页
   ·实验所用容器和耗材的处理第43页
 2 方法第43-48页
   ·甘草根总 RNA 提取第43-44页
   ·RNA 的反转录及 PCR 扩增第44-45页
   ·引物的设计与合成第45页
   ·退火温度及循环数分析第45-46页
   ·cDNA 模板量的分析第46页
   ·半定量 RT-PCR第46-48页
 3 结果第48-51页
   ·总 RNA 提取第48页
   ·GuT5H、GuSQS PCR 退火温度的分析第48-49页
   ·GuT5H、GuSQS PCR 循环数分析第49-50页
   ·cDNA 模板量的分析第50页
   ·GuT5H、GuSQS RT-PCR 结果第50-51页
 4 讨论第51-53页
第五章 甘草紫杉烯 5-α羟化酶基因的生物信息学分析第53-60页
 1 材料与方法第53-54页
   ·序列来源第53-54页
   ·实验方法第54页
 2 结果与分析第54-59页
   ·GuT5H cDNA 开放阅读框分析第54-55页
   ·甘草 GuT5H 的理化性质分析第55页
   ·甘草 GuT5H 的疏水性和跨膜结构域预测和分析第55-56页
   ·甘草 GuT5H 的二级和三级结构预测第56-57页
   ·甘草与其他植物 T5H 蛋白的多序列比对及进化树构建第57-59页
 3 结论与讨论第59-60页
第六章 总结与展望第60-61页
 1 总结第60页
 2 展望第60-61页
参考文献第61-67页
攻读学位期间发表的论文第67-68页
致谢与基金第68页

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